磷元素是植物生长必需的大量营养元素之一，土壤中磷素的固定现象严重，有效磷含量降低，影响植物的生长发育。 解磷细菌能将基质中难溶性磷转化为可溶性磷，能够提高土壤中有效磷含量。本研究将以学校池塘污泥及土壤中筛选出的两株硫杆菌（编号分别为YY02、YY03）和一株实验室保存的氧化亚铁硫杆菌（编号为LY01）为实验材料，对三株菌进行比较。液体摇瓶解磷实验结果表明，菌株YY02、YY03、LY01的解磷效果分别为4.7%、3.63%、2.64%；其中YY02的解磷效果最好；LY01的解磷效果最差。以YY02为实验材料，进行土培实验，探究其对石灰性土壤和黄棕壤的解磷效果。实验结果表明YY02对石灰性土壤的解磷效果为2.62ug磷/g土.m月，对黄棕土的解磷效果为10.52ug磷/g土.m月。
目录
摘要2
关键词2
Abstract..2
Key words..2
引言.2
1材料与方法..3
1.1材料 .3
1.1.1实验菌种....3
1.1.2培养基....3
1.1.3试剂与仪器....4
1.1.4土培实验............4
1.2方法 .4
1.2.1硫杆菌富集筛选....................................................4
1.2.2硫杆菌YY02、YY03 、LY01活化4
1.2.3硫杆菌解磷效果的测定....4
1.2.4钼镝抗分光光度法测定磷标准曲线....5
1.2.5钼镝抗分光光度法测定培养液中PO43含量...........5
1.2.6土培实验....5
1.2.7土培实验土样中PO43的含量测定.......5
2结果与分析..5
2.1硫杆菌的分离筛选...5
2.1.1菌株YY02、YY03、LY01液体培养过程中pH的变化情况.......5
2．2菌株YY02、YY03、LY01液体培养过程中PO43的变化情况6
2.2.1磷标准曲线.... *51今日免费论文网|www.jxszl.com +Q: @351916072@ 
............6
2.2.2硫杆菌解磷效果....6
2.3 YY02土培实验解磷效果.8
3讨论 9
致谢...10
参考文献...10
硫杆菌的富集分离及解磷效果研究
引言
引言
磷是限制植物生长的主要营养元素之一，其在土壤中主要以难溶的矿物态存在，可溶性磷肥施入土壤后其利用率一般也不超过25%[1]。国外解磷细菌的研究开展较早。前苏联学者蒙基娜于1935年从土壤中分离到的一株解磷巨大芽孢杆菌能够分解核酸和卵磷脂[2]，该菌种于1947年大量生产并广泛应用于前苏联和东欧各国。据报道，接种后的土壤中P2O5提高了15%以上。Chabot等人研究了几株溶磷菌对农作物生长的影响，发现其能促进西红柿、洋葱、马铃薯、香蕉、柑橘、咖啡及其他可栽培作物吸磷的提高，解磷菌株洋葱伯克霍尔德氏菌(Burkholderia cepacia)IS16已被用作生物菌肥，施用于多种作物[3]。
我国的解磷细菌研究始于20世纪50年代。前东北农科所首先从东北黑土和灰化土中分离出了具有很强解有机磷能力的解磷大芽孢杆菌，并将其制成了菌肥在黑钙土和非黑钙土上施用，发现不同作物增产幅度不同，黑钙土平均增产13.5%，非黑钙土为11.7%，幅度为6.1%22.8%。同期，北京市农业科学院进行了解磷细菌肥料的研究和应用，开展了有效施用条件、解磷作用、刺激作用及土壤微生物对解磷细菌的影响等试验，得到了很多有价值的数据和实践经验[4]。李淑高在盆栽和大田试验中将磷肥和解磷细菌混合使用，在大豆生产中增产36.9%；在施用磷菌肥之后，作物对磷的吸收也有显著增加，解磷细菌与过磷酸钙或与钢渣混合施用，比对照组的大豆吸磷量分别增加12.3%和6.2%[5]。目前有研究人员筛选出的解磷菌菌株研制的解磷菌剂，进行盆栽和大田试验，发现解磷细菌除了能显著提高土壤速效磷含量、培肥土壤外，同时还有改善作物农艺性状、提高作物产量的功效[6]。孙华等在山东省的砂姜黑土中分别加入有机肥和一定量的溶磷细菌的肥料，发现解磷细菌不仅提高了土壤中的中等活性有机磷和活性有机磷含量，还促进了土壤中Ca8P、Ca10P向Ca2P、AlP、FeP等形态无机磷的转化，从而提高土壤有效磷的含量[7]。国内外的大量试验和研究表明，将解磷细菌施入土壤不仅可以提高磷肥的有效性，还可以活化土壤中的固定态磷，提高磷素利用率。
本研究将探究从学校池塘污泥及土壤中筛选出硫杆菌及实验室保存的氧化亚铁硫杆菌LY01的解磷效果，旨在利用硫杆菌提高土壤磷素利用率。
1 材料与方法
1．1材料
1.1.1 实验菌种
硫杆菌（YY02、YY03），从学校池塘污泥中筛选；
氧化亚铁硫杆菌（LY01），实验室保存，来源于南京某矿酸性矿坑水，由大学资源与环境科学学院环境工程微生物实验室分离纯化所得，并经16S rRNA序列分析鉴定。
1.1.2 培养基
改进的Waksman Starkey培养基[8]：(NH4)2SO4 0.2g、KH2PO4 5.0g、MgSO4.7H2O0.5g、CaCl2.H2O 0.25g、FeSO4.7H2O 0.01g、葡萄糖0.01g，1000ml去离子水、湿热灭菌（121℃，15min）、硫粉10g/L。pH =4.5。
MS培养液[9]：(NH4)2SO4 3.5g、KCl0.119g、KH2PO4 0.058g、Ca(NO3)2.4H2O 0.016g、MgSO47H2O 0.583g，葡萄糖0.01g，1000ml去离子水，用10N H2SO4 调pH=2.5，湿热灭菌（121。C，15min）；能量为FeSO47H2O 44.2g/L
解磷培养液（LY01）：(NH4)2SO4 0.2g、MgSO47H2O0.5g、KCl 0.2g、FeSO47H2O 0.01g、1000ml去离子水，1N H2SO4 调pH=4.5，加磷酸钙5g，150ml/500ml三角瓶，115℃ 灭菌20min，硫粉10g/L

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