色氨酸在新陈代谢中具有重要作用，而D-型色氨酸和L-型色氨酸在生理活性上具有很大的差异。本实验采用毛细管电泳芯片法对色氨酸中进行了快速、简单地检测，并对检测条件进行优化。以PH=5的醋酸溶液为缓冲液，加入醋酸铵醋酸铜L-脯氨酸为2:1:1，检测波长为214nm，分离电压为1500V，分离时间400s，进样电压为200V，进样时间为2s为最佳实验条件。同时发现色氨酸浓度在0.04-50μmol.L-1时，其浓度和紫外吸收峰面积具有很好的线性关系，其相关线性系数R达到0.99以上。经计算，D-色氨酸与L-色氨酸的分离度为1.28。
目录
1. 前言 1
1.1氨基酸的简介 1
1.2色氨酸的简介 1
1.2.1 L色氨酸 2
1.2.2 D色氨酸 2
1.2.3色氨酸的应用 3
1.2.4手性对映体的分离方法 4
1.3毛细管电泳法的概述 4
1.3.1毛细管电泳的定义 4
1.3.2毛细管电泳的发展简史 4
1.3.3毛细管芯片电泳的原理 5
1.3.4 毛细管芯片电泳装置的简介 5
1.3.5毛细管电泳手性分离原理 7
1.4本课题研究目的及意义 8
2. 实验部分 9
2.1主要实验仪器及药品 9
2.1.1主要实验仪器 9
2.1.2 实验药品及试剂 10
2.2实验过程 11
2.2.1 实验所用溶液的制备 11
2.2.2实验步骤 11
2.2.3 实验条件优化 12
2.2.4 定性实验 12
2.2.5 线性分析 13
3. 实验结果与讨论 14
3.1 仪器条件优化 14
3.1.1进样电压的选择 14
3.1.2进样时间的选择 15
3.1.3检测波长的选择 16
3.2背景溶液条件优化 16
3.2.1 L脯氨酸浓度的选择 17
3.2.2 醋酸铵浓度的选择 18
3.2.3 醋酸铜浓 *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: ￥351916072￥ 
度的选择 19
3.3 D,L色氨酸的定性实验 20
3.4 D,L色氨酸的线性分析 22
4.结论 24
参考文献 25
致谢 27
前言
氨基酸是指其分子式中同时具有氨基和羧基的有机化合物的统称，是构成动物体营养所需蛋白质的基本单元。而大多数氨基酸都具有D型和L型对映异构体，且其生理活性也具有明显差异。因此，手性物质对映体的分离是当今分析化学领域的一个重点研究课题。
近几年来，手性对映体分离的方法主要有：毛细管芯片电泳法（CE）、高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱法(GS)、质谱法(MS)、超临界流体色谱(SFC)等。其中毛细管芯片电泳法CE是近十几年来发展最迅速的分析方法之一，其源于20世纪80年代，是一种特殊的高效液相分离技术。其具然有以下优点：检测速度快、灵敏度高、成本低、进样量少等。因此适用范围极其广泛，例如被广泛应用于生物、化学、医药、食品、环保等方面，尤其是在手性药物拆分分离中得到广泛研究和使用。
1.1氨基酸的简介
氨基酸是一类生物分子的统称，是组成蛋白质的基本单元，也是分子中同时具有碱性氨基和酸性羧基的一类有机化合物。a氨基酸是指羧酸各种a碳原子旁的一个氢原子被氨基取代而形成的有机化合物。氨基酸是两性电解质，其氨基和羟基的解离度是由环境的PH值所决定。在a氨基酸中，除甘氨酸之外，其他所有的氨基酸都有不对称的碳原子，因此，其导致这些氨基酸形成了D型和L型的两种对映异构体，同时具有旋光性。氨基酸不仅是生命有机体的重要组成成分，而且是生命机体营养、生存、成长极其重要的物质，同时也在生命体内物质代谢、信息传递方面扮演着尤为重要角色。
此外，氨基酸的一个重要特征是对紫外光有吸收效应。相同波长下的不同氨基酸对紫外光吸收是不同的。因此，我们可以利用这一点来定性检测某种氨基酸。
1.2色氨酸的简介
色氨酸的化学名称为α氨基β吲哚丙酸，分子式为C11H12N2O2，是一种芳香族、杂环、非极性氨基酸，是结构式如图1.1所示。色氨酸于1825年首次被发现，而在1902年，才首次从酪蛋白中分离提取出来。色氨酸具有三种同分异构体分别为L色氨酸、D色氨酸、消旋体DL色氨酸。
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图1.1 色氨酸结构式
色氨酸是人体必需的八种氨基酸之一，其具有很重要的作用，例如：预防糙皮病、抑郁症，改善人体睡眠，缓解头疼，镇定大脑，调节情绪等等。色氨酸的外表面呈现白色或微黄色的结晶或结晶型粉末，其在水中和热乙醇的溶解度较高，但它不溶于乙醚、氯仿等有机溶剂，在稀酸或稀碱溶液中比较稳定[1]。在储存时应避免阳光、潮湿环境下，因为色氨酸与水加热时，易产生少量的吲哚，若在高温条件下，则会发生分解反应，长时间光照也会发生着色反应[1]。此外，色氨酸作为结构比较简单的小分子，是进行手性分离基础研究的良好选择。
1.2.1 L色氨酸
L色氨酸是人体和动物生长发育所必备的一种氨基酸，在蛋白质的合成和代谢方面也发挥着极其重要的作用，其不能通过自身合成，只能通过食物才能获取。L色氨酸通常被人们称为第二必须氨基酸，其在医药、食品、饲料添加剂、农业、环境监测等多个领域被广泛应用[2]。例如：L色氨酸和维生素B联合使用，可预防糙皮症；L色氨酸与铁剂联合使用，可治疗运动性贫血；L色氨酸与组氨酸联合使用可以医治消化道溃疡[3]。与此同时，L色氨酸在体内可以转变为许多种具有生理活性物质，具体有5羟色胺、黄尿酸、松果体激素、烟酸等。由于L色氨酸具有很多用处，其市场需求量的不断扩大，因此，L色氨酸具有很广阔的市场前景和被越来越多的研究者进行探讨。

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