为了研究微生物菌剂对猪粪堆肥发酵效果的影响，选择本实验室筛选的3种微生物菌株（NJAU-ND8、NJAU-N30、NJAU-NE8）进行研究，本研究首先检测了3种微生物菌株产生多种酶的酶活力，结果表明菌株NJAU-ND8产中性木聚糖酶酶活高达30.353nmol/min/ml，分别高出NJAU-NE8和NJAU-N30菌株所产的178%和234%；中性蛋白酶酶活测定结果显示NJAU-ND8和NJAU-N30酶活力的分别比NJAU-NE8 酶活高出288%和316%。综合多种检测结果，菌株NJAU-ND8和NJAU-N30的产酶能力高于NJAU-NE8。其次，将3种微生物制成菌剂后，分别加入以猪粪、木屑和蘑菇渣为材料按照比例调配好的堆体中，进行好氧堆肥试验，分析各处理组不同时期的堆温、pH值、电导率、碳氮比和堆肥养分等的变化情况，结果表明，3种微生物菌剂均能够有效促进堆体升温，延长高温期，加快腐熟进度，NJAU-ND8和NJAU-N30处理第10天达到最高温度，且保持50℃以上温度时间达10 d，提高堆肥腐熟效果最好，堆体发芽率随着堆体温度的变化而逐渐上升至90%以上，堆体有机质含量有所降低，且NJAU-N30处理组养分含量最高，这与酶活测定结果基本符合。综上，本研究表明，接种NJAU-ND8与NJAU-N30菌剂能够有效促进以猪粪为主要原料的堆体发酵腐熟。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1试验材料与方法2
1.1试验材料 2
1.1.1堆肥原材料 2
1.1.2菌种来源 2
1.1.3液态接种体的产生 2
1.2试验设置及取样方法3
1.3不同菌株高温条件产堆肥相关酶活力的测定3
1.4测定堆肥项目和方法4
1.4.1堆体温度测定4
1.4.2全碳、全氮和全钾含量和C/N的测定4
1.4.3 pH和电导率(EC)的测定4
1.4.4铵态氮和硝态氮含量的测定 4
1.4.5发芽指数的测定 4
1.4.6促生盆栽试验 4
1.4.7数据分析5 *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: *351916072* 

2结果与分析 5
2.1不同微生物菌剂的酶活 5
2.2堆肥过程中堆体温度的变化5
2.3堆肥过程中pH和EC的变化6
2.4堆肥过程中有机质含量和C/N的变化7
2.5堆肥过程中硝态氮和铵态氮的变化8
2.6堆肥过程中发芽指数的变化9
2.7堆肥过程中养分的变化10
2.8促生盆栽试验生物量的变化10
3讨论11
4结论 12
致谢12
参考文献13
本科阶段发表的文章和专利15
微生物菌剂对堆肥腐熟效率影响的研究
引言
改革开放30多年来，我国的畜禽养殖业已经进入规模化蓬勃发展阶段，大规模的集约化养殖企业迅速涌现。规模化猪场的发展对于提高人们的生活水平具有重要的作用，但是养猪业的不断扩大，带来了猪场粪便和废水的大量集中排放，给当地环境造成巨大压力[1]。目前，堆肥是解决大量畜禽粪便经济有效的处理方法之一，不仅能解决环境污染问题，还能够将废弃物堆制成肥料或土壤调节剂，施入田中，起到改良土壤和增加肥效的作用 [2]。因此，提升有机肥生产技术，发展产业化和商品化的精制有机肥、有机无机复合肥成为有效解决养殖污染的保障。但传统的堆肥方式和技术由于存在自然发酵耗时过长、卫生情况差、无害化程度和肥力低等诸多弊端，已经不能适应于商品有机肥的发展。同时，现有的现代化堆肥技术，均需要高效堆肥菌种的辅助，进而提高发酵效率，降低生产成本，提高堆肥附加值。为加快有机物料的降解速度，提高堆肥的腐殖化程度，近年来国内外学者对堆肥过程中的微生物过程进行了一系列研究。由于微生物是堆肥过程的主体，能够将有机废弃物降解成稳定的腐殖质，因此在堆肥物料中加入活性强、繁殖快的微生物菌种将大大加快堆肥进程，缩短堆肥反应时间，有利于保持堆肥养分[35]。但目前整个堆肥行业，仍存在部分堆肥菌种不稳定，堆肥效果促进效果不强等缺点，因此，开发更多的高温或耐高温菌种，利用工厂化实际堆肥，评估菌株的促进效果，变的异常重要。
本试验选择实验室自主研究的发酵菌剂作为试验材料，通过检测产酶能力以及堆肥过程中相关指标的动态变化，并依据理化参数和堆肥有机物质动态变化特征进行腐熟程度评价，探究微生物菌剂的添加对堆肥腐熟效率的影响，为选择适合江苏地区使用的发酵菌种，提高堆肥效率提供科学依据。
1 试验材料与方法
1．1 试验材料
1．1．1 堆肥原材料 试验选用的苏淮猪粪取自淮安快鹿牛奶有限公司养殖场，蘑菇渣来自江苏峻德生态农业科技有限公司，其基本理化性质见表1。将猪粪、木屑和蘑菇渣按照堆体C/N：24:1~26:1配比混合，调节堆体初始含水率至55~65%，配比后将堆体材料均匀混合，再砌成条垛状，堆体基料宽1.1~1.2m，高1.4~1.5m，长度不限。
表 1 堆肥原料基本理化性质
Table 1 Basic physicochemical properties of main composting materials
原料
总碳质量分数(%)
总氮质量分数（%）
碳氮比
含水率（%）
猪粪
13.03
1.09
11.95
74.19
蘑菇渣
43.44
1.48
29.35
35.01
木屑
41.4
0.67
61.79
6.37
1．1．2 菌种来源 试验所用的微生物菌种为有机物料堆肥高温期样品中分离获得，现保存于中国微生物典型菌种保藏管理中心（CGMCC）与本实验室，分别为枯草芽孢杆菌NJAUN30（Bacillus subtilis）（保藏于CGMCC编号No.16736）、解淀粉芽孢杆菌NJAUND8（Bacillus amyloliquefaciens）（保藏于CGMCC编号No.16737）、死亡谷枯草芽孢杆菌NJAUNE8（Bacillus vallismortis）（保藏于大学实验室）。
1．1．3 液态接种体的产生 将80℃冰箱甘油管保存的NJAUND8 、NJAUN30、NJAUNE8菌种于LB固体培养基平板划线活化，37℃培养箱培养小时。分别挑取NJAUND8 、NJAUN30、NJAUNE8的单菌落于3ml液体试管37℃，170r/min震荡培养10小时，菌液作为种子液。以1%（v/v）的接种量将种子液转接至LB液体摇瓶中，37℃，170r/min培养至对数中期（OD600=1.0），4℃离心收集菌体，菌体用蒸馏水洗涤3次，等体积蒸馏水重悬备用得液态接种体。

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