摘要：以贵州野生鸭儿芹为材料，研究了与植物逆境胁迫有关的细胞色素P450 (CYP450) 家族成员异黄酮2-羟化酶 (Isoflavone 2-hydroxylase, I2H )基因对温度胁迫的应答和响应。利用PCR扩增技术克隆得到鸭儿芹异黄酮2-羟化酶基因CjI2H，该基因的开放阅读框长为1527 bp，可编码508个氨基酸，通过DNAMAN软件预测其蛋白质分子质量为1.2709×105Da，等电点(pI)为4.80。进化树分析结果表明CjI2H编码的氨基酸序列在不同植物间相对保守。实时定量PCR结果显示鸭儿芹在30 ℃处理下，叶柄中CjI2H基因的相对表达量随处理时间的增加而上升，且在24 h 时达到峰值。10 ℃处理下，CjI2H基因的相对表达量明显低于高温处理。说明CjI2H基因表达与温度胁迫存在关联性，高温胁迫后该基因的表达响应大于低温胁迫。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言 1
1材料与方法2
1.1植物材料 2
1.2 RNA的提取与cDNA的合成2
1.3 鸭儿芹CjI2H基因的克隆 2
1.4 PCR扩增产物的连接、转化和测序2
1.5 序列分析 3
1.6 实时荧光定量PCR和基因表达分析 3
2 结果与分析3
2.1 鸭儿芹CjI2H基因的克隆3
2.2 鸭儿芹CjI2H基因及氨基酸序列的同源性比较分析 6
2.3 鸭儿芹CjI2H的进化分析 6
2.4 鸭儿芹CjI2H基因在温度胁迫下的表达情况 6
3 讨论7
致谢8
参考文献8
图1 鸭儿芹CjI2H保守域预测 3
图2 鸭儿芹Cj I2H基因序列及编码氨基酸4
图3 鸭儿芹CjI2H氨基酸的亲水性和疏水性 4
图4 鸭儿芹、葡萄和梅的I2H基因序列比对5
图5 鸭儿芹、葡萄和梅的I2H氨基酸序列比对 6
图6 CjI2H与其他物种来源的I2H基于蛋白质序列
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的系统进化树构建 6
图7 不同温度处理下鸭儿芹叶柄中CjI2H基因的相对表达水平7
鸭儿芹异黄酮2’羟化酶基因的克隆及其表达的温度响应

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