SnRK 是植物体内一类蛋白激酶，通过调节植物碳氮平衡和能量状态在植物生发发育和逆境响应中发挥重要功能。本文对荷花 SnRK 基因家族进行了全基因组鉴定，系谱树构建、基因结果和表达谱分析；对红荷 SnRK1 基因进行测序、克隆，以农杆菌为载体构建 SnRK1 基因表达载体并对其进行基因检测；实验探究适合本实验室烟草生长的培养基浓度并种植烟草材料；将目的基因转入模式植物，共培养后筛选转化植株。本文工作为后续进一步研究 SnRK1 基因在荷花中的生理功能奠定基础。
目录
摘要3
关键词3
Abstract4
Key words4
引言（或绪论）4
1 材料与方法5
1.1 实验材料5
1.2 红荷 SnRK 基因家族分析5
1.2.1 总 RNA 提取5
1.2.2 第一链 cDNA 的合成5
1.2.3 高保真 PCR 扩增5
1.2.4 目的片段的连接5
1.2.5 大肠杆菌转化5
1.2.6 大肠杆菌菌液检测5
1.2.7 高保真 PCR 全长验证6
1.2.8 序列分析与进化树的构建6
1.3 基因表达载体的构建6
1.3.1 带酶切位点的基因的克隆6
1.3.2 质粒的提取6
1.3.3 载体的构建6
1.3.4 根癌农杆菌的转化6
1.4 载体构建成功农杆菌菌液检测6
1.4.1 筛选剂浓度对烟草叶片分化及生根的影响6
1.5 农杆菌侵染烟草时间的确定6
1.6 农杆菌介导的烟草遗传转化及植株再生6
1.6.1 划线分离6
1.7.2 侵染用农杆菌菌液的准备6
1.6.3 转化7
1.6.4 共培养7
1.6.5 转移至诱导培养基7
1.6.6 转移至筛选培养基7
1.6.7 生根筛选7
1.7 农杆菌介导的蘸花法转化拟南芥7
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1.7.1 拟南芥的准备7
1.7.2 侵染用农杆菌菌液的准备7
1.7.3 转化7
2 结果与分析8
2.1 荷花几组 SnRK 家族基因的鉴定和染色体定位8
2.2 荷花 SnRK 家族基因蛋白质理化性质分析9
2.3 荷花 SnRK 家族基因蛋白二级结构分析10
2.4 荷花 SnRK 家族基因的系谱发生10
2.5 荷花 SnRK 家族基因的基因结构分析11
2.6 荷花 SnRK 家族基因在不同组织和胁迫下的表达12
2.7 SnRK1 基因的克隆13
2.8 SnRK1 基因过表达载体的构建14
2.9 SnRK1 基因在模式植物的异源表达16
3 讨论18
致谢19
参考文献19
荷花 SnRK 家族基因鉴定及功能分析

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