灵芝hog1MAPK基因的沉默和表型分析[20200614171744]
摘 要：本文以抗草甘膦和抗草丁膦转基因油菜（Brassica napus）与近缘杂草野芥菜wild B. juncea的正反回交1代子2代、回交1代子3代、回交2代子2代以及回交3代子1代为试验材料，采用SSR方法研究了抗性油菜C-基因组特异片段向这些回交后代中的渗入情况，目的是研究2种抗性油菜的C-基因组特异片段向野芥菜的渗入是否存在差异。研究结果表明，对2种转基因油菜，在同种回交后代中C-基因组特异片段在不同个体中的遗传规律不同。各回交后代中，抗草甘膦的转基因油菜的C-基因组特异片段传递给回交后代的频率较抗草丁膦转基因油菜的C-基因组特异片段的传递频率低，例如在正向回交2代子2代中，抗草甘膦的回交后代中单株检测到的引物数量平均百分率是17.5%；抗草丁膦的回交后代中检测到的引物数量平均百分率是35.16%。2种转基因油菜C-基因组特异片段随着回交后代自交代数的增加保留的比例逐渐减小，例如在回交1代子2群体和回交1代子3群体中，抗草甘膦的回交1代子2代群体中被检测到的引物数量平均百分率是25.95%，而在回交1代子3代群体中被检测到的引物数量平均百分率是17.37%；抗草丁膦的回交1代子2代群体中被检测到的引物数量平均百分率是42.55%，而在回交1代子3代群体中被检测到的引物数量平均百分率是33.40%。以上研究结果将为抗除草剂转基因油菜的安全性评估的深入开展提供依据。
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关键字:野芥菜；C-基因组；抗草丁膦；抗草甘膦；回交后代
目录
摘要 2
关键词 2
Abstract 2
Key words 2
引言
一、实验材料与方法 8
（一）研究材料 8
（二）实验方法 8
1、DNA提取 9
2、PCR反应 10
3、聚丙烯凝胶电泳 11
二、实验结果与分析 12
（一）实验结果分析 12
1、17对C-基因组上的特异引物在回交1代子2代中被检测到的情况 13
2、17对C-基因组上的特异引物在回交1代子3代中被检测到的情况 14
3、17对C-基因组上的特异引物在回交2代子2代中被检测到的情况 15
4、17对C-基因组上的特异引物在回交3代子1代中被检测到的情况 16
三、讨论 22
四、参考文献 23
转基因甘蓝型油菜C基因组特异片段向野芥菜的渗入
Student majoring in Biological technology huangyigang
Tutor songxiaoling
Introgression of specific fragment of C – genome from transgenic Brassica napus into the wild B.juncea
ABSTRACT：BC1F3/ BC1F4/ BC2F3/ BC3F1 are the backcross progenies from wild Brassica juncea and F1 hybrid of Brassica *51今日免费论文网|www.jxszl.com +Q: ￥351916072￥ 
juncea × transgenic glyphosate- or glufosinate-tolerant oilseed rape (B. napus). In the paper, we evaluated the persistence of B. napus specific fragment of C – genome in the above backcross progenies by C-genomespecific simple sequence repeat (SSR) markers of B. napus. The aim was to study the difference between the introgression from two herbicide-tolerant oilseed rapes to wild B. juncea. These results indicated that the persistence of B. napus specific fragment of C – genome from the same transgenic oilseed rape differed in different individual palnt of the same backcross progenies. In the same backcross progenies, the persistence probability of specific fragment of C–genome was less from transgenic glyphosate-tolerant oilseed rape than from transgenic glufosinate-tolerant oilseed rape. For example, the average percentages of detected primers in BC2F3R and BC2F3L were 21.69 % and 33.99 % respectively. In the same backcross progenies, with the increasing of self-pollination of progenies, the persistence of specific fragment of C–genome became less. For example, in BC1F3R, the average percentage of detected primers was 25.95%，in BC1F4R, was 17.37%. In BC1F3L, the average percentage of detected primers was 42.55%, however, in BC1F3L, was 33.40%. The above results will provide more experiment basis for the safety assessment of genetically modified oilseed rapeseed.
KEY WORDS: Wild Brassica juncea; C-chromosome; Glufosinate- *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: ￥351916072￥ 
resistant oilseed rape ; Glyphosate-resistant oilseed rape; backcross generation 芸薹族(Brassiceae)是十字花科中较大的一族，包括46个属，200多个种(Al-Shehbaz et al., 2006)。其中芸薹属(Brassica)是最重要的一个属之一，约含40 多个种。芸薹属内包含许多重要的蔬菜、油料及饲料作物。芸薹属中最引人瞩目的是经众多学者研究，最终由韩国学者禹长春总结得出的禹氏三角(Ustriangle)。禹氏三角指出芸薹(B. rapa, n=10)、黑芥(B. nigra, n=8)和甘蓝(B. oleracea, n=9) 这3 个染色体数目较少的物种为芸薹属的基本种，基本种间两两杂交，形成了芥菜(芥菜型油菜, B. juncea, n=18)、甘蓝型油菜(B. napus, n=19)和埃塞俄比亚芥(B. carinata, n=17) 这3 个染色体数目较多的异源四倍体物种，并用A、B、C 分别表示白菜、黑芥和甘蓝的基因组，用AB、AC 和BC 分别表示芥菜、甘蓝型油菜和埃塞俄比亚芥的基因组(U, 1935)。
野芥菜是十字花科（Brassicaceae）芸薹属(Brassica L.)一年或两年生草本植物。目前与芥菜、芥菜型油菜同名，经常被引用的拉丁名有Brassica juncea (L.) Czern. et Coss.(浦惠明等, 2005)、B. juncea var.gracilis Tsen et Lee(宋小玲等, 2007)或wild B. juncea(Huangfu et al., 2007; Jham et al., 2009; Liu et al., 2012)。野芥菜是由二个基本种原始芸薹和黑芥天然杂交后再自然加倍形成的双二倍体复合种（AABB）。20世纪80年代我国境内的野芥菜主要分布于西北地区，而近20年来野芥菜已经扩散到长江中下游的广泛地区。现野芥菜已广泛分布于我国约16个省的路边、麦田、棉花田、稻田、荒地等生态环境中，并成为日趋严重的杂草危害。对于野芥菜的来源众说纷纭。有学者根据当地芥菜引种资料认为野芥菜为小叶芥油菜，原为油料作物，60年代初引种做绿肥，种子侵入麦田造成危害。由ISSR分子标记技术推断野芥菜为芥菜型油菜的逸生种(Huangfu et al., 2007)。通过形态学特征、染色体数目、自交结实率、与栽培芥菜的杂交结实率、过氧化物同工酶分析，研究表明“野芥菜”均系野生芥菜，在长期的栽培过程中发生变异形成我国栽培芥菜。（杨以耕, 陈材林, 周光凡,1989）。西藏地区认为野芥菜是野生芥菜型油菜.

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