茉莉酸甲酯对草莓幼苗生长发育的影响(附件)【字数:5555】
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1材料与方法2
1.1实验材料 2
1.2实验方法 2
1.2.1草莓幼苗的培养2
1.2.2指标的测定2
2实验结果3
2.1形态指标的测定3
2.2.1对草莓幼苗生长的影响3
2.2.2对草莓幼苗叶片的影响3
2.2.3对草莓幼苗叶柄长度的影响4
2.2.4对草莓幼苗根部生长的影响4
2.2.5对草莓幼苗干鲜重的影响4
2.2花青素含量的测定6
3讨论 6
致谢7
参考文献7
茉莉酸甲酯对草莓幼苗生长发育的影响
引言
引言
茉莉酸类(JAs)包括茉莉酸及其衍生物,是植物激素的一种,以往认为茉莉酸类主要作用于提高植物的抗逆性,可以调控植物抵御病虫害和病原体感染,增加植物耐受非生物胁迫的能力,包括臭氧、紫外线辐射、高温和冷冻;但最近很多研究表明茉莉酸类在植物幼苗生长中同样起着重要作用,还调节了发育的各个方面[1]。
草莓(Fragaria×ananassa)是蔷薇科草莓属植物,多年生,营养价值高,我国各地广为栽培。同时,草莓也是一种典型的非呼吸跃变型果实。2011年二倍体草莓测序的完成以及草莓具有遗传转化方便,容易繁殖,生育期短 *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: ^351916072^
等优点,使草莓成为研究非呼吸跃变型果实发育和成熟的模式植物。
茉莉酸类有些功能在不同植物物种中是基本相同的,例如抑制幼苗生长,抑制拟南芥根的生长,且随着茉莉酸甲酯浓度的增加,根生长受抑制的程度也逐渐增大[2];茉莉酸类还通过抑制有关细胞分裂和有丝分裂周期的蛋白CycB1; 2的活性来抑制拟南芥真叶和子叶的扩张。除此之外,它还调节植物物种间不同的生殖和发育过程,茉莉酸路径是调控拟南芥雄蕊发育的枢纽[3],能够促进花丝伸长、花药开裂和花粉成熟和萌发;还调节胚与种子发育,生殖器官发育等。但目前,茉莉酸甲酯对草莓幼苗生长发育的影响还没有类似相关研究,于是本文着重探究茉莉酸甲酯浓度与培养30天的草莓幼苗生长发育之间的关系,为以后的研究奠定基础。而且,研究茉莉酸类物质对草莓幼苗生长的影响,还可为以后筛选茉莉酸相关的草莓突变体打下根基。
1 材料与方法
1.1 实验材料
实验材料为培养3035天的Ruegen草莓。
1.2 实验方法
草莓幼苗的培养
(1)培养基的配制
每升培养基称取MS粉末4.302g、蔗糖30g加蒸馏水溶解至刻度线并调节PH至5.805.84。每升培养基可分装4瓶锥形瓶,每瓶锥形瓶中加入1.851.90g琼脂。培养基分装完毕后,应及时封盖瓶口,在锥形瓶外壁贴上标签。最后经过98kPa、121℃灭菌20 min,灭菌后取出锥形瓶,让其中的培养基自然冷却凝固后再使用。每瓶锥形瓶装有培养基250ml,可倒圆形或方形平板十块。计算后取茉莉酸甲酯母液适量,按浓度梯度稀释,分别加入5个已编号的MS培养基锥形瓶中。使得1号、2号、3号、4号、5号锥形瓶中茉莉酸甲酯浓度分别为0μmol/L、0.5μmol/L、1μmol/L、2μmol/L、4μmol/L,每个处理设置三个重复。
(2)草莓种子的处理与播种
取若干种子置于10ml的离心管中,加蒸馏水放入55℃水浴锅中热激10min。用75%的酒精消毒3min,10%的次氯酸钠消毒8min,最后用无菌水把种子冲洗45次后,倒入无菌的有滤纸的培养皿中。将处理好的的草莓种子整齐的播种于各浓度平板上,每块平板种2025颗。播种完成后在平板正反面做好标记,并用封条封住平板,避免染菌。平板水平放置于黑暗恒温培养箱中。播种后10天左右,待种子发芽后转移至光照培养室中,培养3035天。
1.2.2 指标的测定
(1)形态指标的测定
草莓幼苗生长30天后,观察不同浓度茉莉酸甲酯处理的草莓幼苗,每个处理中挑选一株最具代表性的植株,清洗干净后拍照记录草莓幼苗的生长情况和叶片数目。筛选掉长势不一致的的幼苗后,每个处理挑选10株幼苗,通过刻度尺分别测量每个处理下10株幼苗的根长和下胚轴长度,记录数据。分别测定每棵植株每个叶片叶柄的长度,取平均得到每株草莓幼苗叶柄的长度。统计须根数目分析根系发育情况后,使用天平分别测定十株幼苗地上部与根部的鲜重,迅速分成三份装入标记好的小信封,放置于鼓风干燥培养箱中,80℃下烘干至恒重,测定干重。
(2)花青素含量的测量
取新鲜草莓幼苗地上部分,去离子水冲洗干净培养基,并将多余水分用吸水纸吸干,加入液氮研磨后得到草莓幼苗浆。每个重复称取一定量,按照料液比为1∶5(g/mL)加入酸性乙醇溶液作为提取溶剂,称重并记录数据。然后室温下水浴振荡提取 30 min,完成后在50 ℃温度下水浴超声提取50min(功率为100W),取出后放置至室温,补重并记录数据。以转速4000r/min离心10min后,取一定量上清液,备用。分别用pH=1.0和pH=4.5的缓冲溶液稀释固定倍率后,取稀释得到的液体分别于510nm处和710nm处测定吸光值A,并按照花青素含量的计算公式[4],计算草莓幼苗中花青素含量。
原文链接:http://www.jxszl.com/swgc/smkx/563654.html
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