甜菜碱处理对桃果实活性氧代谢的影响[20200509183214]
摘要：活性氧近年来被认为是果蔬衰老的重要原因。本文研究了不同浓度的外源甜菜碱处理对桃果实活性氧代谢的影响。以未作处理和甜菜碱处理的桃果实为实验对照对象，以超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、过氧化物酶（POD）、多酚氧化酶（PPO）、超氧阴离子（O2-）、过氧化氢（H2O2）、抗坏血酸过氧化物酶（APX）和总酚为指标进行测定，根据实验数据分析甜菜碱对桃果实活性氧代谢的影响效果。实验表明，甜菜碱处理对调节桃果实活性氧代谢有明显效果。
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关键字:桃果实；甜菜碱；活性氧代谢
目录
摘要2
关键词2
Abstract2
Key words2
引言2
1 材料与方法3
1.1 材料与试剂 3
1.2 仪器与设备 3
1.3 材料处理3
1.4 指标测定3
1.4.1 多酚氧化酶（PPO）活性测定3
1.4.2 过氧化物酶（POD）活性测定3 1.4.3 超氧化物歧化酶（SOD）活性测定4
1.4.4 过氧化氢酶（CAT）活性测定4
1.4.5 抗坏血酸过氧化物酶（APX）活性测定4
1.4.6 超氧阴离子产生速率的测定5
1.4.7 过氧化氢（H2O2）含量测定5
1.4.8 数据处理与分析5
2 结果与分析5
2.1 甜菜碱处理对桃果实中多酚氧化酶（PPO）活性的影响5
2.2 甜菜碱处理对桃果实中过氧化物酶（POD）活性的影响6
2.3 甜菜碱处理对桃果实中超氧化物歧化酶（SOD）活性的影响6
2.4 甜菜碱处理对桃果实中过氧化氢酶（CAT）活性的影响7
2.5 甜菜碱处理对桃果实中抗坏血酸过氧化物酶（APX）活性的影响7
2.6 甜菜碱处理对桃果实中超氧阴离子产生速率活性的影响8
2.7 甜菜碱处理对桃果实中过氧化氢（H2O2）活性的影响8
3 讨论 9
致谢9
参考文献10
甜菜碱处理对桃果实活性氧代谢的影响
食品科学与工程 李佳伶
引言
引言
桃是蔷薇科、李属、桃亚属植物，在中 *51今日免费论文网|www.jxszl.com +Q: %3^5`1^9`1^6^0`7^2# 
国北方是主要的经济树种之一，中国的桃产量约占世界总产量的一半，是位居第一的产桃打过。桃果实肉质细腻，香甜多汁，营养丰富，易于消化吸收,是深受广大人民喜爱的水果之一。桃果实除鲜食外还可作糖水罐头、速冻水果、桃脯、桃酱、桃汁、桃干等多种制品,因此具有极高的经济价值。
桃果实成熟于盛夏,正值高温多雨季节,采后呼吸旺盛,常温下两三天即达到后熟软化,而且贮运过程中容易受到机械伤，因此容易出现失水失重，果肉褐变、硬度下降、易受病原菌侵染,引起腐烂等问题，因此桃不耐贮藏运输，采后损失严重。控制桃果实的衰老，可有效提高桃果实的保水保重，抑制硬度的降低，增强抗病原菌侵染能力，从而达到桃果实的保鲜目的，延长贮藏期。
活性氧是高等植物在有氧代谢过程中产生的一类化学性质活泼、氧化能力极强的活性态氧的总称,包括超氧阴离子、过氧化氢、羟基自由基和单线态氧等[1]。近年来研究表明活性氧可以诱导植物体内木质素的合成,起到细胞壁强化的作用从而形成物理屏障抵御病原菌的入侵,同样活性氧还参与了植保素的合成。在系统抗病性获得的过程中活性氧还作为信号传导分子激发过敏反应。然而活性氧积累过多会对果实组织造成伤害,并促进果实的衰老进程,从而降低果蔬对病原菌的抗性[2]。近年来的研究表明,果实的诱导抗病性与活性氧清除酶的活性也存在密切关系。
甜菜碱(glycine betaine，GB)被证实是最重要的一类渗透保护物质[3]。目前对植物中甜菜碱的生物合成及其渗透调节作用有较多研究，已证实甜菜碱的积累可以提高作物的抗旱性、抗盐碱性和抗寒性[4-6]。植物在正常环境条件下，体内的甜菜碱的含量并不高，但当植物受到低温、干旱、盐等环境胁迫时，会在细胞内大量地积累甜菜碱[7]。甜菜碱作为一种无毒细胞质渗透剂和保护剂可以提高植物的抗胁迫性[8]，在细胞中积累能够提高细胞的渗透调节能力和稳定细胞内大分子蛋白和生物膜的结构和功能。外源甜菜碱可削弱外界环境如冷胁迫对超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和过氧化物酶(POD)活性的抑制，而活性氧的酶促清除系统可有效延缓果实衰老，从而促成果实的防腐保鲜[9]。
甜菜碱对植物生理作用的研究大多针对的是植物幼苗和对采后冷敏感果实的冷害预防。张海英等[10]用外源甜菜碱处理采后黄瓜，能减轻果实低温条件下的冷害，增加渗透物质脯氨酸的含量，提高组织SOD活性，增强组织的抗冷性，并引起关注[11-12]。
1 材料与方法
1．1 材料与试剂
实验材料为桃果实，购自江苏省农科院。选择新鲜、饱满、大小均匀、圆润、颜色无褐变、无机械损伤的桃果实。
实验试剂有磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、儿茶酚、核黄素、甲硫氨酸、EDTA、NBT、磷酸羟胺、对氨基苯磺酸、α-萘胺、抗坏血酸酶、丙酮、30%过氧化氢、愈创木酚。
1．2 仪器与设备
仪器设备 型号 厂商
冰箱 BCD—215KS 青岛海尔股份有限公司
数显恒温水浴锅 HH—6 国华电器有限公司
高速冷冻离 *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: %3^5`1^9`1^6^0`7^2# 
心机 GL—20G—Ⅱ 上海飞鸽
紫外可见分光光度计 UV—6000型 上海元析仪器有限公司
1．3 材料处理
将上述桃果实分别用蒸馏水和5mmol/L、10mmol/L、20mmol/L浓度的甜菜碱溶液浸泡，分别命名为CK、GA、GB、GC。浸泡处理后进行晾干并用聚乙烯薄膜装样备中。
1．4 指标测定
1．4．1 多酚氧化酶（PPO）活性测定
称取1g样品在5mL0.2mol/LpH6.5PBS中研磨成匀浆，将匀浆转入离心管中，于4℃离心15min，上清液为提取酶液。取0.2mL上清酶液与1.8mLPBS和2.0mL0.1mol/L儿茶酚于试管内，以蒸馏水参比调零，在反应15s时开始记录反应体系在在波长410nm处吸光值，作为初始值，然后每隔1min记录一次，连续测定6个点的数据。重复三次。
PPO活性按下式计算：
式中：OD410F为反应混合液吸光度终止值；OD410I为反应混合液吸光度初始值；tF为反应终止时间，min；tI为反应初始时间，min；V为样品提取液总体积，mL；VS为测定时所取样品提取液体积，mL；m为样品质量，g。
1．4．2 过氧化物酶（POD）活性测定
称取1g样品在5mL0.1mol/LpH5.5的乙酸-乙酸钠缓冲液中研磨成匀浆，将匀浆转入离心管中，于4℃离心20min，上清液为提取酶液。取0.2mL上清酶液与3mL25mmol/L愈创木酚溶液于试管内，再加入200uL0.5mol/L的H2O2溶液迅速混匀启动反应，同时立即开始计时。以蒸馏水参比调零，在反应15s时开始记录反应体系在在波长470nm处吸光值，作为初始值，然后每隔1min记录一次，连续测定6个点的数据。重复三次。
POD活性按下式计算：
式中：OD470F为反应混合液吸光度终止值；OD470I为反应混合液吸光度初始值；tP为反应终止时间，min；tI为反应初始时间，min；V为样品提取液总体积，mL；VS为测定时所取样品提取液体积，mL；m为样品质量，g。

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