南苜蓿茎总黄酮提取及其抗氧化活性的研究【字数：8614】
目 录
1前言 1
1.1南苜蓿的概述及研究现状 1
1.1.1南苜蓿的简介 1
1.1.2南苜蓿的研究现状 1
1.1.3研究方法 1
2.材料与方法 2
2.1.材料 2
2.2 仪器与设备 2
2.3 南苜蓿茎黄酮提取方法 2
2.3.1南苜蓿预处理 2
2.3.2芦丁标准曲线绘制 2
2.3.3总黄酮提取率的测定 3
2.3.4单因素实验 3
2.4响应面设计 4
2.5抗氧化性实验 4
2.5.1南苜蓿茎总黄酮对去除DPPH自由基能力的测定 4
2.5.2南苜蓿茎总黄酮对去除羟基自由基能力的测定 5
2.5.3南苜蓿茎总黄酮对Fe3+还原能力的测定 6
3实验结果与分析 7
3.1芦丁标准曲线 7
3.2单因素实验分析 7
3.2.1纤维素酶与果胶酶的比例对南苜蓿茎黄酮提取率的影响 8
3.2.2复合酶解温度对南苜蓿茎黄酮提取的影响 8
3.2.3复合酶解温度对南苜蓿茎黄酮提取的影响 9
3.2.4复合酶用量对南苜蓿茎黄酮提取的影响 10
3.3响应面分析 *51今日免费论文网|www.jxszl.com +Q: &351916072&
10
3.3.1方案设计 10
3.3.2方差分析 11
3.3.3响应面分析 13
3.4南苜蓿茎总黄酮抗氧化性 16
3.4.1南苜蓿茎总黄酮对去除DPPH自由基能力分析 16
3.4.2南苜蓿茎总黄酮对去除羟基自由基能力分析 17
3.4.3南苜蓿茎总黄酮对Fe3+还原能力分析 17
4.结论 19
参考文献 20
致谢 21
1.前言
1.1南苜蓿的概述及研究现状
1.1.1南苜蓿的简介
南苜蓿是一种草本植物。李时珍在《本草纲目》苜蓿项的集解中说：‘入夏及秋，开细黄花’,后经过日本学者岩崎常正考证《本草纲目》中的苜蓿应该是南苜蓿。[1]南苜蓿茎是一种生命力很强，一年有多季的植物。季节变化，土壤的肥沃情况，日照时间的长短，生长季节的降雨量对其生长有很大的影响。[2]
1.1.2南苜蓿的研究现状
经研究发现南苜蓿中的黄酮类对人体造血系统和免疫系统都有很好的保护力，还可以清除自由基对抗氧化有很好的帮助作用。而且南苜蓿有分布广泛，取材容易，容易栽培，我们可以通过优化对南苜蓿中黄酮的提取工艺从而可以实现大规模的黄酮提取，可以大幅度节省资金，和工作量。自从改革开放以来，在医药保健消费上站的比例也越来越大。而人们对药品都会比较抗拒，所以保健品的地位也越来越高。但是现社会上的保健品参差不齐，价格也越来越贵，所以对南苜蓿这种产量大，易于培养的植物研究越来越重要。
1.1.3研究方法
通过阅读文献对黄酮提取工艺的了解，乙醇回流法是提取黄酮得主要方法。乙醇回流法提取黄酮有着提取率高，方法简单，对操作不需要太多的要求。但是通过研究发现，传统的方法，有着对溶剂的消耗比较大，浪费过多的时间和材料。而且过高的水浴温度对苜蓿中黄酮的活性成分是否有破坏还需要进一步的考证。然后我们对传统的提取方法进行改进，使用用酶辅助乙醇回流的方法提取。有提取率高，节省时间，减少对溶剂的使用，耗能较低得优点，可以用于大规模的工业化生产。
本实验主要是为提高黄酮的提取率。用复合酶乙醇提取方法，以酶比例、复合酶解时间、复合酶解温度、复合酶用量为单因素在进行单因素实验，然后进行响应面研究。最后对其进行抗氧化性实验，然后理论分析，得出结果。为以南苜蓿黄酮为主的保健食品提供可靠的理论依据。
2.材料与方法
2.1.材料
南苜蓿，芦丁标准品，亚硝酸钠，硝酸铝，氢氧化钠，果胶酶，纤维素酶，酒精，DPPH试剂，绿矾（FeSO47H2O），邻二氮菲，磷酸盐缓冲液，三氯乙酸，三氯化铁，抗坏血酸
2.2 仪器与设备
表1仪器型号
Table 1 instrument models
仪器
型号
生产厂家
电子天平
PL602E/02
梅特勒托利多仪器（上海）有限公司
超声波清洗器
KH2200E
昆山禾创超声仪器有限公司
恒温干燥箱
DHG9037A
上海浦东荣丰科学仪器有限公司
水浴锅
HH112S
上海新苗医疗器械制造有限公司
紫外分光光度计
722UV
上海高致精密仪器有限公司
旋转蒸发仪
R202
上海申胜生物科技有限公司
粉碎机
HK 20B1000g
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