桑树叶富集γ氨基丁酸的技术研究
摘要：γ-氨基丁酸（GABA）是一种非蛋白质氨基酸，存在于谷物、水果、蔬菜和发酵食品中，对人体具有多种生理功能。现随着人们对γ-氨基丁酸深入地了解，γ-氨基丁酸的产品已被广泛地应用在食品、保健品、化妆品等领域。本试验探索桑叶γ-氨基丁酸（GABA）富集的工艺技术，研究γ-氨基丁酸含量与机械切分处理、4℃条件下冷激时间、50℃条件下热激时间、谷氨酸钠浸泡时间、磷酸-柠檬酸缓冲液pH值、Ca2+浓度和干燥球磨时间的关系，通过试验测定出桑树叶γ-氨基丁酸富集的最优条件：50℃处理20min，10 g/L谷氨酸钠浸泡处理2h。
*景先生毕设|www.jxszl.com +Q: 3 5 1 9 1 6 0 7 2
关键字:桑叶、γ-氨基丁酸、富集
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
1 材料与方法2
1.1试验材料及设备 2
1.1.1 试验原料2
1.1.2 试验仪器2
1.2 试验方法 3
1.2.1 不同处理条件对GABA含量的影响3
1.2.1.1 机械切分处理对GABA含量的影响3
1.2.1.2 冷激时间对GABA含量的影响3
1.2.1.3 热激时间对GABA含量的影响3
1.2.1.4 谷氨酸钠浸泡时间对GABA含量的影响3
1.2.1.5 不同pH值对GABA含量的影响3
1.2.1.6 不同浓度CaCl2溶液浸泡对GABA含量的影响3
1.2.1.7 球磨时间对GABA含量的影响3
1.2.2 GABA含量的测定3
1.2.2.1 样品制备4
1.2.2.2 电泳4
1.2.2.3 比色法测定4
2 结果分析4
2.1 机械切分处理对GABA含量的影响4
2.2 冷激时间对GABA含量的影响4
2.3 热激时间对GABA含量的影响5
2.4 谷氨酸钠浸泡时间对GABA含量的影响5
2.5 不同pH值对GABA含量的影响6
2.6 不同浓度CaCl2溶液浸泡对GABA含量的影响7
2.7 球磨时间对GABA含量的影响7
3 讨论 8
4 结论 9
致谢10
参考文献 *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: 3 5 1 9 1 6 0 7 2
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桑树叶富集γ-氨基丁酸的技术研究
引言
γ-氨基丁酸(简称GABA)，又名哌啶酸，是一种广泛分布于动植物体内天然存在的非蛋白质氨基酸，它是中枢神经系统中最重要的神经递质，参与脑循环生理活动,具有抗心律失常功能[1]。1949年人们首次在高等植物土豆茎块中发现GABA的存在。随后的研究发现GABA广泛地存在于各种植物以及植物的不同组织中。对于GABA的研究，一开始人们将关注点放在植物抗虫的生化机制上，之后发现在逆境条件下GABA可以得到积累，将关注点放到逆境胁迫下GABA的积累机制及对其胁迫逆境的缓解作用上，后来发现GABA对人体有着非常重要的生理作用。
GABA作为药品既可用于改善大脑血液循环、增加氧气供给，改善大脑细胞代谢，还有助于治疗因脑中风、头部外伤和脑动脉硬化后遗症等产生的头疼、耳鸣和意识模糊等病症。已有的研究表明，GABA还具有改善肝脏、肾脏的功能，抑制自律神经失调,用于因脑内缺少GABA所引起精神焦虑不安和初期老年痴呆症的治疗。人体本身对GABA有自我调节的功能，当缺乏时会出现焦躁、不安、疲劳、忧郁、失眠等症状。此外,GABA还有促进乙醇代谢、改善高脂血症、防止肥胖和消除体臭的作用。在人脑中，虽然GABA可由脑部的谷氨酸在脱羧酶的作用下转化而成，但是年龄的增长和精神压力加大会使GABA的积累异常困难，而通过日常饮食补充可有效的改善这种状况。
植物组织中GABA的含量通常在0.3～32.5μmol/g之间[2]。人们从天然食物中摄取的GABA，尚不能满足人体生理需要。因此，对植物性食品原料，如桑叶、茶叶、发芽糙米等采用一定的技术处理后，可使食品原料中的GABA得到一定程度的富集。 GABA的富集就是首先将鲜叶进行处理，使鲜叶中L—谷氨酸在谷氨酸脱羧酶作用下脱去羧基，生成GABA。近年来，日本科学家利用米胚芽等原料开发制造的富含GABA的功能食品配料，已经广泛地应用于饮料、果酱、糕点、饼干、调味料等制品中。另外还有报道，应用生物技术制造的高浓度GABA饮料以及利用乳酸菌等制作的富含GABA的食品，可以直接作为抗高血压、改善脑机能及肝功能的功能食品[3]。
我国目前有几百万亩桑园，是世界上最大的桑树种植国，桑树在我国有着极为丰富的资源优势。国家卫生部1991年第45号文公布批准桑叶既是食品又是药品，桑叶具有明显的降压、降血糖、抗肿瘤作用。因此，如何开发桑叶中的GABA，拓宽桑叶的利用渠道，是现在研究的热点。
1 材料与方法
1．1 试验材料及设备
1．1．1 试验原料
供试桑叶于2013年11月16日采于南京溧水傅家边科技园，叶位3 ~5片。
1．1．2 试验试剂
本研究用到的主要试验试剂见表1-1
表1-1试验试剂
Tab.1-1 Reagents for experiment
试剂名称 说明 来源
冰乙酸 分析纯 上海申博化工有限公司
乙醇（无水） 分析纯 南京化学试剂有限公司
吡啶 分析纯 国药集团化学试剂有限公司
茚三酮 分析纯 国药集团化学试剂有限公司
硫酸铜 分析纯 上海振欣试剂厂
石英砂 分析纯 国药集团 *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: 3 5 1 9 1 6 0 7 2
化学试剂有限公司
GABA标品 分析纯 Sigma公司
1．1．3 试验仪器
本研究用到的主要试验仪器见表1-2
表1-2试验仪器
Tab.1-2 Test equipments
设备名称 来源
DHG-9030A型电热恒温鼓风干燥箱 上海一恒科技有限公司
HH-4数显恒温水浴锅 国华电器有限公司
10μl微量进样器 上海光正医疗仪器有限公司
EH-ND20电吹风 松下电工万室电器（广州）有限公司
LSHZ-300冷冻水浴恒温振荡器 江苏太仓市试验设备厂
UV-5100B型紫外可见分光光度计 上海元析仪器有限公司
H1650-W台式微量高速离心机 长沙湘仪离心机仪器有限公司
DYY-10C型微电脑控制多用电泳仪 北京六一仪器厂
TG16-WS台式高速离心机 长沙湘智离心机仪器有限公司
JA2003型电子天平 上海精密科学仪器有限公司
BCD-226SLN冰箱 青岛海尔股份有限公司
1．2 试验方法
1．2．1 不同处理条件对GABA含量的影响
1．2．1．1 机械切分处理对GABA含量的影响
将桑叶平均分成5份，分别切成2份、4份、8份、16份，以完整叶片为对照，处理后室温放置5min。蒸汽灭酶1 min 后置于70 ℃热风干燥至恒质量，粉碎过60目筛，比色法测定各样品中的GABA含量。
1．2．1．2 冷激时间对GABA含量的影响
将清洗后的桑叶平均分成6份，放于玻璃器皿中用保鲜膜覆盖，4℃冰箱中分别放置0min、0.5min、1 min、1.5 min、2 min、2.5 min。蒸汽灭酶1 min 后置于70 ℃热风干燥至恒质量，粉碎过60目筛，比色法测定各样品中的GABA含量。
参照文献[5]的方法进行以下操作：
原文链接：http://www.jxszl.com/swgc/spzlyaq/12934.html
