生防菌处理对草莓贮藏品质的影响[20200509190315]
摘要：本试验以“红颜”草莓为供试材料，研究生防菌葡萄有孢汉逊酵母（Hanseniaspora uvarum）挥发性代谢物对草莓常温贮藏品质的影响。试验结果显示：葡萄有孢汉逊酵母挥发性代谢物能够显著降低草莓果实腐烂指数、失重率，较好维持果实的可溶性固形物（TSS）、色差、质地（硬度、粘着性、弹性、回复性、凝聚性、咀嚼性）及外观。此结果表明拮抗酵母菌挥发性代谢物能够有效提高草莓贮藏品质，延长贮藏寿命，为生防菌保鲜技术提供理论依据。
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关键字:草莓；葡萄有孢汉逊酵母；贮藏性能
目录
摘要 1
关键词 1
Abstract 1
Keywords 1
引言 1
1试验材料与方法 2
1.1试验材料 2
1.1.1供试果实 2
1.1.2 供试菌株 2
1.1.3 供试菌株菌悬液制备 2
1.2仪器设备 2
1.3 挥发性气体对草莓常温贮藏影响 3
1.4. 草莓果实品质指标测定 3
1.4.1 腐烂指数 3
1.4.2果实失重率 3
1.4.3草莓果实质地 3
1.4.4可溶性固形物 3
1.4.5果实色差 3
2结果分析 3
2.1失重率的变化 3
2.2腐烂指数变化 4
2.3可溶性固形物含量变化 4
2.4草莓果实色差变化 5
2.5草莓果实质地参数变化 6
2.5.1草莓果实硬度变化 6
2.5.2草莓果实粘着性变化 7
2.5.3草莓果实弹性变化 7
2.5.4草莓果实回复性变化 8
2.5.5草莓果实凝聚性变化 8
2.5.6草莓果实咀嚼性变化 9
2.6草莓果实外观变化 9
3 讨论 10
4 结论 10
致谢 11
参考文献： 11生防菌处理对草莓贮藏品质的影响
引言
引言
目前，国内外研究获得具有拮抗作用的微生物分别有酵母菌、真菌和细菌等[1]，其中酵母菌由于具有遗传稳定；广谱抑菌性；使用安全，一般不产生对人 *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: ￥351916072￥ 
体及环境有害的代谢物质；生长旺盛，对营养要求较低；对逆境有较强的耐受性等特点被广泛应用于防治果实采后病害[2]。已报道具有拮抗作用的酵母菌属有假丝酵母属[3]、毕赤酵母属[4]、红酵母属[5]、梅奇氏酵母属[6]、有孢汉逊酵母属[7]、克鲁维酵母属[8]、掷抱酵母属[9]等。拮抗酵母菌在草莓果实上也做了相应研究，如黏红酵母[10]、柠檬形克勒克酵母[11]、罗伦隐球酵母[12]、季也蒙毕赤酵母[2]、葡萄有孢汉逊酵母[13]等对草莓采后病害均有抑制效果。然而明确拮抗酵母菌的作用机制，才能够更有效的开发利用。
已有研究报道酵母菌的抑菌机制有如下四点：（1）与病原菌营养空间竞争：由于酵母菌对营养要求低，生长迅速，能够在短时间利用营养并快速大量繁殖，最终占领原来病原菌的空间，从而抑制病害；（2）直接寄生作用：有些拮抗酵母菌能够分泌几丁质酶、β-1,3-葡聚糖酶，这些酶可以破坏病原菌结构，从而抑制病原菌；（3）诱导寄主产生抗病性：诱导寄主组织相关抗性酶活性；（4）代谢物质对病原菌的抑制作用：有些酵母菌可产生抗菌性代谢物，对多种病原菌和细菌均具有抑制效果。也有研究报道[14-15]，拮抗菌Muscodor albus和M.crispans产生的挥发性代谢物成分中有3种抑菌物质，能够抑制多种病原菌的生长。因此，根据生防菌的抑菌机制，研究拮抗酵母菌的挥发性代谢物对生防菌商业化有着重要作用。
本试验以葡萄有孢汉逊酵母为生防酵母菌，“红颜”草莓为供试材料，探究生防菌挥发性代谢物对草莓贮藏品质的影响。
1试验材料与方法
1.1试验材料
1.1.1供试果实
草莓果实(Fragaria ananassa Duch)，商品名“红颜”，种植于中国江苏省南京市雨花台区板桥政府生态园，试验中选用大小相近、成熟度一致、无病虫害、无机械损伤、无腐烂的果实。
1.1.2 供试菌株
酵母菌菌株：葡萄有孢汉逊酵母(Hanseniaspora uvarum)由本实验室筛选鉴定，保藏在4 ℃PDA马铃薯葡萄糖琼脂培养基 (葡萄糖20 g；去皮马铃薯200 g；琼脂15 g；蒸馏水1000 mL；120 ℃高压灭菌20 min) 试管斜面上。使用前用无菌接种环从斜面上取菌株划线于PDA上，28 ℃下恒温培养2 d活化。
1.1.3 供试菌株菌悬液制备
H. uvarum菌悬液制备：用无菌接种环取一环活化后的菌种于装有100 mL PDB 马铃薯葡萄糖液体培养基 (葡萄糖20 g，去皮马铃薯200 g，蒸馏水1000 mL) 的250 mL三角瓶中，28 ℃条件下180 rmin-1振荡培养24 h。随后取培养液于4 ℃，5000 rmin-1 下冷冻离心15 min收集菌体，并用无菌水清洗两次。血球计数板计数，用无菌水(含0.05 %吐温-20)调整至浓度为1×109CFUmL-1酵母菌菌悬液，待用。
1.2仪器设备
Nikon102光学显微镜 日本尼康有限公司
HZQ-F160全温振荡培养箱 太仓市试验设备厂
HVE-50自动灭菌锅 HIRAYAMA有限公司
GL-21MC高速冷冻离心机  *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: ￥351916072￥ 
湘仪仪器
恒温恒湿培养箱 宁波海曙赛富实验仪器厂
XB-K-25血球计数板 国营上海医用光学仪器厂
SW-CJ-JD型单人净化工作台 苏州净化
BSA124S-CW电子天平 SARTORIUS公司
移液枪 (100 µL、1000 µL) 河南兄弟仪器有限公司
便携式色差仪 上海汉谱光电科技有限公司
1.3 挥发性气体对草莓常温贮藏影响
吸取100 μL1×109 CFUmL-1葡萄有孢汉逊酵母菌悬液均匀涂布于PDA平板上(直径为7 cm)，放于28 ℃培养箱中培养1天后，移去培养皿盖子，将其放在干燥器底部，共放6个培养皿。干燥器底层放置6个涂布100 μL无菌水而没有涂布葡萄有孢汉逊酵母菌悬液的PDA平板，作为对照组。将刚采摘后的新鲜红颜草莓用70 %酒精对其表面进行消毒，自然晾干，之后把草莓摆放在干燥器的隔板上，每隔板上放10个草莓果实，放置前称量每组果实重量。用凡士林涂抹盖子，将干燥瓶盖子盖好封严。放置25 ℃，相对湿度RH 90 %-95 %恒温培养箱中。
注：CK对照组；H.1 × 109CFUml−1葡萄有孢汉逊酵母菌悬液处理组
2.5.2草莓果实粘着性变化
通过质构仪P/50探头对测定样品第一次下压后弹回所需能量来衡量粘着性，果实的粘着性说明果实组织的完整性。粘着性高，表明果实的品质较好，反之说明果实的品质较差。整个贮藏过程中，拮抗酵母菌H组果实的粘着性显著高于CK组(P<0.05)。贮藏前，果实的粘着性能够较好保持。贮藏后期，所有组别的粘着性均急剧下降，但葡萄有孢汉逊酵母处理组果实粘着性仍高于对照组，说明葡萄有孢汉逊酵母挥发性代谢产物较好地保持了果实内部组织和细胞的完整性。

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