本文以黑果枸杞为原料，提取其原花青素进行实验，比较了传统有机溶剂提取法、超声辅助提取法、低共熔试剂（DES）提取法的提取效果，对三种方法提取所得原花青素进行含量测定，分别为8.43 mg/g、7.43 mg/g、3.67 mg/g。综合考虑后选择传统有机溶剂提取法进行原花青素的提取，并以60%乙醇作为提取剂。采用AB-8大孔树脂对原花青素粗提物进行纯化，纯化后原花青素含量达21.10 mg/g。原花青素是一种多分散体系，通过溶剂萃取法对原花青素进行分级分离，得到乙酸乙酯级分A1、A2，水溶性级分B1、B2、B3。采用反相高效液相色谱法分析各级分的主要组成成分，推断出乙酸乙酯级分主要为低聚原花青素，可能含有表儿茶素、原花青素二聚体、三聚体等低聚成分，水溶性级分主要为原花青素多聚体。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1 材料、试剂及仪器2
1.1 材料 2
1.2 试剂 2
1.3 主要仪器与设备2
2 实验方法2
2.1 原花青素提取方法2
2.1.1 溶剂提取法2
2.1.2 超声波辅助提取法3
2.1.3 DES水混合物（ChM55）提取法3
2.2 原花青素含量测定方法3
2.2.1 香草醛盐酸法测定原花青素含量3
2.2.2 对照品溶液制备和标准曲线绘制3
2.3 AB8大孔树脂纯化原花青素3
2.3.1 树脂的前处理3
2.3.2 原花青素的AB8大孔树脂纯化方法3
2.4 原花青素分级分离方法3
2.4.1 乙酸乙酯萃取分离3
2.4.2 石油醚沉淀法处理乙酸乙酯相4
2.4.3氯仿甲醇二相体系沉淀分离法处理乙酸乙酯萃取水相4
2.5 原花青素各级分的高效液相色谱分析方法4
3 实验结果与分析4
3.1 黑果枸杞中原花青素的提取与含量测定4
3.1.1 原花青素标准曲线绘制4
3.1.2 原花青素含量测定5 *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: #351916072# 

3.2 黑果枸杞原花青素粗提物的大孔树脂纯化结果5
3.3 黑果枸杞原花青素的分级分离结果5
3.3.1 乙酸乙酯萃取过程5
3.3.2 石油醚沉淀乙酸乙酯相过程5
3.3.3 氯仿甲醇二相体系沉淀分离乙酸乙酯萃取水相过程5
3.4 原花青素各级分的高效液相色谱分析6
4 讨论10
致谢11
参考文献11
枸杞中原花青素的提取和组成分析
引言
引言
黑果枸杞（学名：Lycium ruthenicum Murr.）是枸杞的一种，多分布于中国宁夏、甘肃等西北部和北部地区[1]。黑果枸杞中含有丰富的活性成分，并且有着丰富的生理功能，其抗氧化[2]、抗疲劳[3]、防癌抗癌[4]、降血糖效果显著[5]，同时能够提升免疫调节能力[6]。人们经常使用冲泡的方式来食用黑果枸杞，这是一种药食同源的佳品。随着黑果枸杞的营养价值和药用功效，尤其是其中富含的花色素日益被人们所熟知，人们对黑果枸杞的开发研究与利用也日愈增加[7]。
原花青素（Proanthocyanidins，PC）是一种聚多酚类化合物，是近年来发展起来的一种强活性功能化合物，是一种低毒、高效、高生物利用度的植物功能成分，广泛存在于植物界，有着巨大的应用潜力。不同植物种类中PC的含量有所不同，研究表明，黑果枸杞PC含量超过蓝莓，是截止到2016年发现的PC含量最高的天然野生植物[8]。原花青素根据纯度的不同颜色呈现从浅黄至红棕，在弱酸条件下比较稳定，在空气中易氧化，同时对光热不稳定[9]，保存时应注意避光、低温保存。
原花青素的提取方法有很多种，各有其优缺点，本文选择传统有机溶剂提取法、仪器辅助提取法、低共熔试剂提取法[10]进行提取，并比较三者的提取能力。并且选择香草醛盐酸法来测定原花青素的含量[11]。
原花青素是一种多组分混合物，聚合度从几到几十[12]，通常按聚合度大小将原花青素分级分离，再对所得各级分进行分析。本文采用溶剂萃取法进行分级分离，利用原花青素不同聚合度的组分之间由于分子极性的大小不同而产生的在溶剂中溶解度的不同来进行分级，将黑果枸杞原花青素分成聚合度不同的级分并对其进行分析鉴定。选用反相高效液相色谱法（RPHPLC）对原花青素进行分离鉴定，相比于RPHPLC，NPHPLC可以按原花青素聚合度的不同将其分离，但不能区分同聚体中各异构体，而RPHPLC能分离单体和低聚体（聚合度≤3）的某些异构体 [13]，所以通常选用RPHPLC来进行组分的分析。
当前我国黑果枸杞的资源利用率有待提高，对黑果枸杞原花青素的提取、分离纯化和组成分析的研究，可以为从黑果枸杞中开发原花青素提供相关理论知识，从而可以拓宽开发利用市场，使黑果枸杞的产品类型更加丰富，提升加工附加值，使这一资源的开发和应用进入到一个新阶段。
1 材料、试剂及仪器
1．1 材料
宁夏黑果枸杞干粉
1．2 试剂
葡萄籽原花青素（95%）购自美仑生物技术有限公司；香兰素购于上海瑞永生物科技有限公司；氯仿、盐酸、儿茶素、氯化胆碱、丙二酸购于南京化学试剂有限公司；甲醇和乙酸乙酯购自中国医药集团化学试剂有限公司；乙醇购自广东光华科技有限公司；乙酸和石油醚购自南京化学试剂有限公司；乙腈（色谱纯度）和甲醇（色谱纯度）购自美国泰迪亚公司。；甲酸（色谱级）和三氟乙酸（色谱级）购自上海Aladdin公司；AB8大孔吸附树脂购自美国Waters公司
1．3 主要仪器与设备
HHS24s 数显恒温水浴锅
金坛市大地自动化仪器厂；
CCA20低温冷却水循环泵
巩义市予华仪器有限责任公司；
Heidolph Laborota 4000旋蒸仪

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