1本文选取茯砖茶（FBT）作为研究对象，研究其多糖组分（FBTPS）的流变学特性，利用DEAE Sepharose Fast Flow树脂对FBTPS纯化并对纯品进行初步表征。结果表明，FBTPS溶液的黏度与多糖浓度、蔗糖浓度以及CaCl2浓度均成正相关，而pH值和热处理温度对FBTPS黏度的影响并不明显。DEAE Sepharose Fast Flow树脂纯化分别得到FBTPS-2和FBTPS-3组分，采用HPLC对其单糖组成及摩尔比进行分析，结果表明，FBTPS的单糖组成和摩尔比为（ManRhaGalAGlcGalAra=0.220.2310.730.740.52）、FBTPS-2的单糖组成和摩尔比为（ManRhaGalAGlcGalAra=0.20.2510.340.490.36）、FBTPS-3的单糖组成和摩尔比为（ManRhaGalAGlcGalAra=0.190.2310.310.470.32）。对FBTPS、FBTPS-2及FBTPS-3进行红外光谱分析，结果显示，FBTPS、FBTPS-2及FBTPS-3中均含有O-H键、C-H键、C=O键及β-糖苷键。
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引言
引言
茯砖茶属于黑茶，早期的生产条件限制在夏季的伏天，所以称之为“伏茶”，且其入口的滋味与著名中药“土茯苓”十分相似，故又得名“茯茶”[1]。在实际的生产过程中，人们将其制成茶砖，以便于远途运输和保藏，故称之为“茯砖茶”。茯砖茶多糖是茯砖茶中一种重要的成分，其具有降脂减肥、降低血糖、提高机体免疫力、抗氧化等多种生理活性。
目前，多糖的提取多采用水提法，采用这种方法提取多糖不仅价格便宜、操作简便，而且所得的产率较高，因此目前水提法的应用较为广泛[2]。但采用此种方法仍存在部分水溶性杂质，后续还需通过醇沉、去蛋白、透析等一系列步骤除去杂质，再经过浓缩及在真空条件下冷冻干燥才可获得粗多糖。
关于茯砖茶多糖流变学特性的研究还未见任何报道，因此在茯砖茶多糖的黏度方面还有较大的研究空间。本研究通过设置不同的变量，探索多糖浓度、蔗糖添加量、盐的添加量、pH值以及热处理温度对茯砖茶多糖黏度的影响。
提取的粗多糖还需进一步纯化才能得到纯化组分，柱层析法是目前一种较为重要的纯化方法，其操作方式简单，且纯化效果较好 *51今日免费论文网|www.jxszl.com +Q: ^351916072^ 
，因而应用较为广泛。本研究采用色谱柱进行纯化，并选用DEAE离子纤维素作为填料，茯砖茶多糖由于其具有酸性可吸附在层析柱中，并采用不同浓度的NaCl溶液作为流动相可将其洗脱下来[3]。
研究表明，多糖的理化性质与其功效及活性息息相关[48]，因此需粗多糖及其纯化组分的各种理化指标进行测定，其中包括总糖、蛋白质、糖醛酸及多酚的含量。
茯砖茶的结构对其功能活性有着本质上的影响，故本实验对茯砖茶多糖的分子结构进行了初步探索，并对其单糖的组成及摩尔比进行了测定，同时采用红外光谱对其中所含有的化学键进行了初步的探索。
1 材料、试剂与仪器
1．1 实验材料
茯缘购自于湖南省白沙溪茶厂股份有限公司。
1．2 主要试剂
苯酚、浓硫酸、无水乙醇等实验所需试剂全部为国产分析纯；
各标准单糖、DEAE52纤维素、乙腈、1甲苯3甲基5吡唑啉酮（PMP）购于美国Sigma公司。
1．3 仪器设备
电子天平、数显恒温水浴锅、旋转蒸发仪、冻干机、流变仪、恒流泵、干燥箱、高效液相色谱仪、可见分光光度计等。
2 实验方法
2．1 粗多糖的提取流程
（1）醇提：称取160 g茶叶，加入1600 mL体积分数为85%的乙醇溶液，在70 ℃的水浴锅中加热8小时，除去上清，重复3次。
（2）水提：将茶叶在铝制托盘中自然风干，加入1600 mL的蒸馏水，在70 ℃的水浴锅中加热3小时后收集上清，重复3次。
（3）浓缩：将收集的上清旋蒸浓缩至总体积为1000 mL左右。
（4）醇沉：向浓缩液中加入3000 mL的乙醇溶液（体积分数为95%），在4 ℃的条件下静置68小时，直至沉淀充分。将醇沉的溶液离心（4000 rpm，10 min），加入蒸馏水反复溶解沉淀物，同时控制加入蒸馏水的总体积在1000mL以内，从而得到多糖溶液。
（5）去蛋白：向FBTPS溶液中加入约占溶液体积1/10的Sevage试剂，该试剂由体积比为5:1的氯仿和正丁醇配制而成。于分液漏斗中充分震荡至蛋白质析出，弃去有机相。重复10次后收集上层的多糖溶液。
（6）透析：将上层的多糖溶液进行透析，每天更换3次透析液，透析时间为3天。
（7）浓缩：在85℃的水浴锅中将总体积浓缩至200mL左右。
（8）冻干：将培养皿用保鲜膜密封，采用注射器将粗多糖浓缩液注入平板中，放入20 ℃的冰箱中冷冻，溶液结冰后转移到冻干机中真空干燥36小时。
2．2 茯砖茶多糖的流变学特性研究
2．2．1 样品的制备
（1）浓度对茯砖茶多糖黏度的影响
分别配制浓度为0.5%，1%，2%，3%，4%的FBTPS溶液各3 mL，将溶液的pH值调节至7.0左右。
（2）蔗糖质量浓度对茯砖茶多糖黏度的影响
配制浓度为2%的FBTPS溶液，分别置于5只试管中，每管3 mL。分别添加不同质量的蔗糖，使各管中的蔗糖质量浓度分别为5%，10%，20%，30%，40%。
（3）CaCl2质量浓度对茯砖茶多糖黏度的影响
配制浓度为2%的FBTPS溶液，分别置于5只试管中，每管3 mL。分别添加不同质量的CaCl2，使各管中的CaCl2质量浓度分别为0%，0.5%，1%，1.5%，2%。
（4）pH值对茯砖茶多糖黏度的影响
配制浓度为2%的FBTPS溶液，分别置于6只试管中，每管3 mL。再分别调节各管的pH值至4.0、6.0、8.0、10.0。
（5）热处理温度对茯砖茶多糖黏度的影响
配制浓度为2%的FBTPS溶液，分别置于5只试管中，每管3 mL。在20°C，40°C，60°C，80°C的水浴中加热20分钟并冷却至室温[9]。
2．2．2 表观黏度的测定
使用PhysicaMCR301流变仪测定各处理组的表观黏度，温度设定为25℃，剪切速率范围设定为0.011000s1，间隙宽度设定为0.5 mm。
2．3 粗多糖的纯化方法

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