本文以枇杷果实作为实验对象，采用钙与钙拮抗剂处理，从正反两个方面对枇杷果实的活性氧途径和脯氨酸途径进行冷害调控的研究，以期解决枇杷果实低温保存时的冷害问题，期待提升枇杷果实的贮藏期与货架期，增加其商业价值。研究结果表明钙处理可从两种途径明显减轻枇杷果实的冷害损伤，能够较好的保持枇杷果实的贮藏品质，利于枇杷果实的保存与运输；而钙拮抗剂抑制了钙离子发挥作用，加剧了枇杷果实的冷害损伤，不利于在贮藏中维持枇杷果实品质。
目录
摘要 1
关键词 1
Abstract: 1
Key words 1
1.材料与方法 2
1．1 材料及处理 2
1．2 测定方法 2
1.2.1 枇杷果实褐变指数、硬度和出汁率的测定 2
1.2.2 枇杷果实可溶性固形物(TSS)、相对电导率和MDA含量的测定 3
1.2.3 枇杷果实H2O2含量和O2产生速率的测定 3
1.2.4 枇杷果实POD和PPO活性的测定 3
1.2.5 枇杷果实SOD活性、APX活性和CAT活性的测定 3
1.2.6 枇杷果实Pro含量、P5CS活性、OAT活性和PDH活性的测定 4
1.3 数据分析处理及作图 4
2.结果与分析 4
2.1钙和钙拮抗剂(TFP)处理对枇杷果实褐变指数、硬度和出汁率的影响 4
2.2 钙和钙拮抗剂(TFP)处理对枇杷果实TSS、相对电导率和MDA含量的影响 5
2.3 钙和钙拮抗剂(TFP)处理对枇杷果实H2O2含量和O2产生速率的影响 7
2.4钙和钙拮抗剂(TFP)处理对枇杷果实POD活性、PPO活性的影响 8
2.5 钙和钙拮抗剂(TFP)处理对枇杷果实SOD活性、APX活性和CAT活性的影响 9
2.6钙和钙拮抗剂TFP处理对枇杷果实Pro含量、P5CS活性、OAT活性和PDH活性的影响 10
3.讨论 12
致谢 13
参考文献： 13
钙和钙拮抗剂处理对枇杷果实冷害调控研究
引言
枇杷( *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: #351916072# 
Eriobotrya japonica Lindl)为蔷薇科(Rosaceae)，枇杷属(Eriobotrya)植物，原产于中国东南部，因叶子长得像乐器琵琶而得名，属于我国亚热带特有的水果[1]，果实柔软多汁，营养丰富，深受消费者的欢迎。但枇杷果实成熟于初夏时节，外部环境温度湿度较高，皮薄质软易伤，不耐贮藏和运输，在常温条件下，它易腐烂并且变质; 低温贮藏可有效抑制腐烂的发生，但易发生冷害现象，果实与果皮粘连难以剥落，果肉从柔软多汁变为坚硬粗糙且少汁的木质化，保鲜难度大，当前又缺乏有效实用的贮运保鲜技术，使其失去商品价值，从而限制了果实的贮藏期[23]。如何解决枇杷的保鲜问题，保持贮藏期间果实的品质，延长贮藏期亟待解决。
温度极大地影响枇杷品质，而低温贮藏更是枇杷保存的常用方法。低温可通过在许多代谢过程中降低酶的活性，减缓水果的老化速度，减缓乙烯的合成，也抑制了果实的呼吸作用，减少水分流失，并保证了水果的口感[4]；减少碳水化合物和维生素的损耗，保持较高的营养品质，减少果实失重[5]。同时，可明显抑制枇杷果实采后病原菌的生长，减少腐烂发生[6]。
长时间低温贮藏会导致枇杷果实出现冷害症状。关于冷害方面，国内外学者都进行了细致的研究[79]。冷藏枇杷果实的果皮变得难剥，果肉变得质地生硬、粗糙少汁，果实的感官品质和商品性受到严重影响。这种异常败坏现象被称为果肉木质化败坏(flesh woodiness)[2]是冷敏感性植物或植物器官对低温胁迫的不良反应[10]。在贮藏期间，随着贮藏期的延长，枇杷果实果皮的电导率逐渐增加，果皮组织的细胞膜系统的损伤水平逐渐增加[11]，膜脂过氧化产物丙二醛(MDA)的积累会与游离氨基酸和核酸生成褐色素，加剧果实的褐变。枇杷果实中含有较多的酚类物质和较高的多酚氧化酶(PPO)活性，可以催化多酚类物质的氧化并导致组织褐变[12]。在冷藏过程中，枇杷果实PPO活性和过氧化物酶(POD)在贮藏中活性呈升高趋势，两种酶共同作用导致枇杷果实的褐变和老化。
在低温条件下，作为酶促防御系统中主要酶成分，超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)三种酶[13]可以抵抗活性氧的膜脂过氧化作用，从而保护细胞膜在逆境胁迫下免受损伤。SOD清除超氧阴离子自由基产生H2O2以及O2。CAT则分解H2O2产生H2O以及分子氧，同时，APX可催化H2O2氧化抗坏血酸(ASA)降低细胞中H2O2含量，从而减少H2O2对细胞组织的伤害[14]。
研究表明，脯氨酸有较强的水合能力，可以作为理想的有机渗透调节物质[15]，此外脯氨酸在水溶液中可以形成亲水胶体，产生一个疏水骨架[16]，也会促进蛋白质水合作用，同时，也可作为活性氧清除剂，在低温胁迫下保护植物细胞。受低温胁迫下的枇杷果实中，Δ1吡咯琳5羧酸合成酶(P5CS)和鸟氨酸转氨酶(OAT)，各自限制脯氨酸合成途径即谷氨酸途径和鸟氨酸途径的限速酶，活性降低。同时脯氨酸脱氢酶(PDH)活性降低，以避免过量的脯氨酸降解产生有毒物质，植物中的酶活性下降或完全丧失[17]，从而枇杷果实抗冷性下降。
为了解决枇杷低温贮藏中的冷害问题，研究了常见的果蔬保存方式[1820]，常见的果蔬贮藏方法有物理方法，比如常温贮藏、辐射贮藏和机械冷藏；生物学方法及其他，比如气调贮藏和臭氧保藏。其中在钙处理下，细胞内多种重要酶的活性和代谢过程受钙与钙离子结合调节[21]，质膜的结构受其影响，导致细胞质膜透性变化，最终达到对果实冷害的调控。本文由活性氧途径与脯氨酸途径入手，参考了关钙处理在果蔬冷害中的研究，出于氯化钙具有便宜无毒害等优势，选择了钙与钙拮抗剂处理作为处理方法。
试验研究了钙与钙拮抗剂对枇杷果实的冷害的影响，并从正反两个方面探究钙与钙拮抗剂对枇杷果实冷害的作用机制，可有助于延长枇杷果实的贮藏期与货架期，有利于提升枇杷在水果市场上占有的份额，扩大销售区域，具有重大的现实意义和商业价值。

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