降胆固醇乳酸菌的筛选与鉴定(附件)
目录
1 引言 1
1.1 乳酸菌 1
1.1.1 乳酸菌的定义 1
1.2 乳酸菌的一般特性 2
1.2.1 形态及染色 2
1.2.2 培养 2
1.2.3 生化特征 2
1.3 胆固醇 2
1.3.1 胆固醇简介 2
1.3.2 胆固醇的生理功能 2
1.3.3 血清胆固醇过量时的危害 3
2 材料及方法 5
2.1 主要材料 5
2.2 仪器设备 6
2.3 实验准备 6
2.4 标准曲线的制备 7
3 目标乳酸菌种的鉴定 8
3.1 形态和培养特征 8
3.2 淀粉水解试验 8
3.3 明胶液化试验 8
3.4 糖酵解试验 8
3.5 过氧化氢酶测定 8
3.6 菌株16SrRNA分子生物学鉴定 8
3.6.1 细菌基因组DNA的提取 8
3.6.2 PCR扩增 9
3.6.3 电泳检测 10
4 结果分析 11
4.1 形态和特征培养 11
4.2 生理生化实验结果 12
4.3 乳酸菌去除胆固醇的实验结果 13
4.4 菌株的16SrRNA鉴定结果 14
3.6.4 电泳检测结果 14
3.6.5 测序结果 14
3.6.6 进化树图 14
5 讨论 17
结论 18
致谢 19
参考文献 21 *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: ^351916072^
引言
现如今生活水准的提高，人们对于食品是否营养也有了一定的要求，然而却带来了很多心脑血管疾病[1]。根据近几年的调查研究，乳酸菌与其相关的产品可以适当降低胆固醇的含量程度，降低相关疾病的发生率。根据调查研究显示，引发心脑血管疾病的一个非常重要原因就是血清中含有过多的胆固醇 [2]。根据统计，因为心脑血管疾病而引起死亡的人数近些年来正在不断上升 [3]。为此，如何降低人体内胆固醇的含量来维持在一个正常的水平，是当前研讨的主要方向。所以近些年来，研究人员为了降低人体内的胆固醇含量，对乳酸菌进行了不同程度的研究，旨在开发研究具备降胆固醇的乳酸菌产品，用来满足人们的健康需要[ 4～5 ]。
乳酸菌
乳酸菌的定义
乳酸菌是可以通过碳水化合物（主要是葡萄糖）发酵产生乳酸的细菌的集体名称，并且它不是严格分类系统中的类别。
根据这个定义，乳酸菌现在可以分为23个属。 乳酸菌有一些基本特征或特征：染色阳性； 细胞形态为杆状或球状； 过氧化氢酶是阴性的； 代谢产物以乳酸为唯一或主要产物，也有乳酸，醋酸等混合产品；脂肪分解能力较弱。
降胆固醇乳酸菌理论及其发展
国外研究者发现[6]，马塞人饮用大量用乳酸菌发酵的相关产品，与其他常人比较，他们的胆固醇含量较低。而且有另外研究显示，在平时喜欢喝酸奶的人，他们体内的胆固醇含量相比较不爱喝酸奶的人较低。这个现象引起了广泛的关注，使人们对于研究降胆固醇乳酸菌的调查提起了兴趣 [7]。至今，大部分乳酸菌在研究中都显示可以降低胆固醇。近年来，专家们对乳酸菌降胆固醇的作用研究主要集中研究方向是不同种类的乳酸杆菌中，其中嗜酸乳杆菌最为常见[8]。
在国外对于此项研究进行的较早。有学者研究肠炎沙门氏菌可以用来降低胆固醇的作用，并且他认为乳酸菌在生长过程中经过降解可以促使胆固醇分解代谢，并且降低胆固醇含量[9]。他与其他的研究人员发现嗜酸乳杆菌有很强的降胆固醇作用[10]。
乳酸菌的一般特性
形态及染色
乳酸链球菌属球状细胞，菌体大多常排列成链，属于乳酸杆菌族，它的形态一般是杆状，大多成链。
培养
水分、碳源、氮源以及维生素无机盐等对于乳酸菌的成长是非常重要的。乳酸菌是适合在低氧环境中生长的兼性厌氧菌[11]。最适合生长的温度为3040℃，最适合的 pH值为5~6，在偏酸性的环境中生长较好，在中性或碱性环境中，生长速率会变缓慢。
生化特征
乳酸菌有其独特的生化特征：首先，它们分解蛋白质和脂肪的能力很弱。 其次，它们可以发酵某些糖类并产生乳酸（同型和异型乳酸发酵），适合在特定酸性环境下生长，产酸耐酸能力强。
胆固醇
胆固醇简介
胆固醇既具备非常重要的生理功能，又能在人体转化为人体必需的激素 [12]。但是，身体中高水平的胆固醇也会造成伤害。现在，与过量胆固醇有关的心血管和脑血管疾病如冠心病风正在危害人体健康。美国人Keys在研究中证实血胆固醇浓度越高，相关疾病的发病率也越高[13]。人体的大部分胆固醇都是来自于食物。如果输入过多的胆固醇的话，便会使血液中胆固醇含量过多从而导致一些疾病。近年来国家都呼吁要减少膳食中胆固醇的摄入。但是，饮食不合理导致血液中胆固醇的含量经常超标。近年来大家为了身体的健康，常常限制自己的饮食，这使得人们的生活质量下降 [14]。这种现象使得低胆固醇的食物涌现，并且具有很大的前景。因此，我们多研发出低胆固醇食物是很有必要的。
原文链接：http://www.jxszl.com/swgc/spzlyaq/66945.html
