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ACTH和LPS对猪骨骼肌线粒体能量代谢的影响

2020-05-24 17:41编辑: www.jxszl.com景先生毕设
ACTH和LPS对猪骨骼肌线粒体能量代谢的影响[20200507190110]
摘要:应激和炎症是生产饲养中常见的疾病,为动物生长和健康造成严重危害。本实验以ACHT和LPS注射健康仔猪,建立动物应激和炎症模型,通过RT-PCR检测猪肉骨骼肌线粒体基因,研究在应激和炎症反应状态下机体能量的变化规律。结果发现在ACHT的刺激下,线粒体的COX、CYBT和ATP基因的表达显著升高;LPS作用后线粒体基因表达未发生明显变化。这提示在应激反应下,线粒体氧化磷酸化的FADH2电子传递链和糖酵解途径被激活。
 *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: *351916072
关键字:ACTH;LPS;线粒体基因;能量代谢;
目录
摘要1
关键词1
Abstract 1
Key words1
引言1
1.材料与方法3
1.1实验动物及样品采集3
1.2主要试剂及仪器3
1.3总RNA提取及相对定量实时荧光PCR3
1.3.1总RNA提取 3
1.3.2反转录4
1.3.3 PCR4
1.3.4引物设计4
1.3.5相对定量实时荧光PCR4
1.4数据处理5
2.结果5
3.讨论5
致谢6
参考文献7
ACTH和LPS对猪骨骼肌线粒体能量代谢的影响
引言
线粒体是细胞活动的主要场所,是细胞能量代谢的关键部位,它主要通过氧化磷酸化(OXPHOS)过程实现功能,产生ATP,以供应机体的能量需求,因此有“细胞动力工厂”之称。猪的线粒体DNA是一个环状双链结构,全长16.7 kb,由ND1、ND2、ND3、ND4、ND5、ND4L、COX1、COX2、COX3、ATP6、ATP8、CYBT 8这13个编码蛋白基因、22个tRNA,2个rRNA以及1.2 kb的非编码控制区域构成(见图1)[1]。13个编码基因除了烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶亚基Ⅱ(Nicotinamide adenine dinucleotide dehydrogenase subunit Ⅱ,ND2)和ND4L分别由亮氨酸(ATT)和缬氨酸(GTG)起始编码外,其他编码基因都以甲硫氨酸(ATG/ATA)起始编码。另外,有四个编码基因由不完全终止密码子(TA或T)终止翻译,分别是ND3、ND4、细胞色素c氧化酶亚基Ⅱ(Cytochrome *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: *351916072* 
c oxidase Ⅱ,COX2)和COX3。线粒体DNA控制区域含有1个重复序列GTACACGTGC,猪线粒体的研究发现,这段序列会在线粒体DNA控制区连续出现14~29次。线粒体DNA两条链中,鸟嘌呤含量高的是重链,而胞嘧啶含量高的是轻链,除了ND6是由轻链启动子转录的,其余12个编码基因都由重链启动子转录。作为ATP合成的关键步骤,氧化磷酸化发生在线粒体内膜,是细胞呼吸的最终代谢途径,它将糖酵解和三羧循环产生的NADH和FADH2经由线粒体内膜上的电子链传递系统将氢质子氧化产生的能量以ATP的形式保存,是细胞重要的生化过程,在动物骨骼肌能量代谢中有着举足轻重的作用。目前,已知有92个基因参与了线粒体OXPHOS反应,这92种因子是由70种核基因编码和13种线粒体基因编码的蛋白共同形成,其中除了琥珀酸-Q还原酶由核基因组编码蛋白组成,其余因子均由核基因组与13种线粒体基因组编码蛋白共同形成[2,3]。
ACTH(促肾上腺皮质激素)为腺垂体 分泌的多肽激素,是肾上腺皮质活性的主要调节者。它的生成和分泌受促肾上腺皮质激素释放激素(Hypothalamic cortico-tropin-releasing hormone, CRH)的直接调控,促肾上腺皮质激素释放激素也受生理性的昼夜节律和应急刺激的调控。ACTH的分泌过程是脉冲式的和应变的,释放的频率和幅度与昼夜交替节律性相关。总的趋势是清晨觉醒之前血液中ACTH水平出现高峰,白天维持在较低水平,入睡时再减少,半夜熟睡时则为低潮,随后又逐渐增多。由于ACTH分泌的这种日节律波动,糖皮质激素的分泌也出现相应的波动。ACTH的生理作用主要是促进肾上腺皮质激素的合成与释放,由体外注射过量的皮质激素时,内源性ACTH的分泌会受到抑制,肾上腺皮质发生萎缩,这被认为是引起“应激”状态所不可缺少的。当猪处于应激状态时,其内环境遭到破坏,糖皮质激素浓度升高,导致正常的能量代谢紊乱,蛋白质、碳水化合物和脂肪等分解代谢增强,使动物生长停滞、体重下降,饲料转化率降低,饲养成本升高。对养殖生产造成了非常严重的损失。同时会不可避免对宰后肌肉质量产生一定影响,动物应激引发的异常肉中,常见的有猪应激综合症、PSE肉等,对养殖业危害相当严重。
本科生毕业论文(设计)成绩评阅表
论文题目 ACTH和LPS对猪骨骼肌线粒体能量代谢的影响
一、论文选题的价值与合理性

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