产后奶牛血液中免疫因子动态变化的研究
目录
摘要3
关键词3
Abstract3
Key words3
引言3
1 材料与方法4
1.1 集约化牛场奶牛的选择4
1.1.1 奶牛的选择4
1.1.2 饲养方式4
1.1.3 日粮组成4
1.2 试验仪器与试剂4
1.2.1 试验仪器4
1.2.2 试验试剂5
1.3 试验方法5
1.3.1 血样采集与保存5
1.3.2 产后奶牛血清中IL6、IL8和TNFα测定方法5
1.4 数据的统计方法5
2 结果分析6
3 讨论7
3.1 健康组和患病组奶牛产后不同阶段血清中IL6含量变化规律的研究7
3.2 健康组和患病组奶牛产后不同阶段血清中IL8含量变化规律的研究7
3.3 健康组和患病组奶牛产后不同阶段血清中TNFα含量变化规律的研究7
致谢8
参考文献8
表1 精饲料组成(%)4
表2 日粮组成(干物质%)4
表3 IL6、IL8和TNFα含量的测定(X±SD,ng/mL)6图1 产后不同时间中IL6含量的变化6图2 产后不同时间中IL8含量的变化6
图3 产后不同时间中TNFα含量的变化7
产后奶牛血液中免疫因子动态变化的研究
引言
子宫内膜炎是奶牛产后常见病,是造成奶牛不孕症的主 *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: ^351916072*
要原因之一。如果得不到及时的诊治,会降低奶牛的生产性能和奶牛场的潜在效益[1]。调查显示,在奶牛业中,约20%的分娩母牛患有子宫内膜炎。国内外学者普遍认为病原微生物感染是导致子宫内膜炎的主要原因[23]。随着研究的不断深入,有专家认为子宫内膜炎的发生不仅与病原微生物的感染有关,而且还与奶牛自身的免疫状态存在着紧密的联系。当外界微生物入侵子宫时要通过两道防御屏障,第一道是物理排除能力,子宫通过收缩首先能排出一部分恶露和病菌。若病菌突破第一道防线,第二道屏障即子宫内膜中分布的免疫细胞及它们分泌的细胞因子,可激发机体免疫应答产生免疫球蛋白,从而净化子宫。若两道防御屏障都受到破坏,就会引起子宫炎症反应[4]。
免疫因子主要是由各种免疫细胞释放,其水平反映了子宫内的炎性反应程度和免疫状况。IL6主要是由巨噬细胞、T细胞、B细胞等多种产生的一种糖蛋白,IL8是一种中性粒细胞、T细胞及嗜碱性粒细胞的趋化因子,TNFα主要是由单核—巨噬细胞产生的一种细胞因子[5]。目前对于子宫内膜炎的发病机理,国内外医学界把研究重点放在了子宫生殖免疫方向,通过研究子宫免疫防御[6]、免疫刺激剂[7]、子宫局部免疫[8]、激素的免疫调节[9]来提高子宫防御体制。国内外学者对子宫内膜炎引发的生化指标(如免疫因子)的变化方面研究不深。本实验应用酶联免疫吸附实验(ELISA)对产后奶牛血液中的IL6、IL8、TNFα等免疫因子水平的测定,可以对产后子宫内膜是否患有炎症做出初步诊断,以便及时诊治。
1材料与方法
1.1 集约化牛场奶牛的选择
1.1.1 奶牛的选择
选自江宁淳化某养牛场产后荷斯坦母牛18头,对这些牛进行初步的临床检查,选取的奶牛无传染病、寄生虫病等其他疾病,体格大小接近,产犊时间较为集中。统计试验奶牛的耳号、胎次、产犊日期、发情与配种记录、产奶量、体况评分(BCS),所选取奶牛的产犊时间、BCS、胎次等要求无明显差异。
1.1.2 饲养方式
牛场饲养方式全部为散栏饲养,采用全混合日粮(TMR)饲喂,混合拌料包括羊草、苜蓿、青贮玉米、全棉籽和精料。每日早中晚各投料一次,投料量较大,保证奶牛随时能采食到全混合日粮。舍内有采食区、躺卧休息区,奶牛分组群饲养,可以在舍内自由走动,无固定栏位和牛床,牛床采用细沙作为垫料,室外设运动场,土地面。
1.1.3 日粮组成
表1 精饲料组成(%)
原料
组成
玉米
36.0
豆粕
20.0
棉粕
12.7
大麦
9.3
大豆皮
3.3
DDGS
9.7
磷酸氢钙
1.0
牧盐
0.7
脱霉剂
1.3
97100A
6.0
表2 日粮组成(干物质%)
原料
组成
玉米青贮
56.6
燕麦草
9.3
羊草
11.0
甜菜粕
4.6
干奶料
13.9
生长料
4.6
1.2 试验仪器与试剂
1.2.1 试验仪器
酶标仪:芬兰(Labsystems Multiskan MS),仪器型号:352型
洗板机:芬兰(Thermo Labsystems),仪器型号:AC8
离心机:微量高速离心机(国产),仪器型号:TG16W
培养箱:隔水式恒温培养箱(国产),仪器型号:GNP9080型
1.2.2 试验试剂
牛白细胞介素6(IL6)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒
牛白细胞介素8(IL8)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒
牛肿瘤坏死因子α(TNFα)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒
以上试剂盒均购自于北京鑫方程生物技术有限公司。
原文链接:http://www.jxszl.com/yxlw/dwyx/43488.html
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