姜黄素是从姜科植物姜黄中提取的一种多酚类活性物质， 具有多种生物学功能。本实验通过检测小鼠组织及血清中抗氧化指标（MDA、T-AOC、T-SOD）和热休克蛋白基因表达的变化，研究日粮添加不同剂量姜黄素对小鼠抗氧化功能及热休克蛋白的影响为姜黄素应用提供理论依据。本实验择取24只8周龄昆明小鼠，随机分为3组，每组8只，公母各半。三组小鼠分别饲喂日粮为1）对照组基础日粮2）实验组一基础日粮+100 mg/kg姜黄素；3）实验组二基础日粮+200 mg/kg姜黄素。试验期21天。研究结果表明与对照组相比，日粮添加100mg/kg姜黄素显著提高小鼠日增重(P <0.05)，降低肝脏中MDA含量(P<0.05)；日粮添加200mg/kg姜黄素显著降低空肠中MDA含量(P <0.05)的同时(P <0.05)，显著提高空肠及血清中T-SOD的活性；此外，发现日粮添加100mg/kg姜黄素显著提高了小鼠空肠和回肠组织中HSP70、HSP90的基因表达 (P <0.05)。
目录
摘要2
关键词2
Abstract2
Key words2
引言2
1 材料与方法4
1.1实验设计4
1.2试验对象4
1.3 试验材料4
1.3.1主要试剂4
1.3.2主要仪器4
1.4 样品采集4
1.5测定指标及方法5
1.5.1生长性能5
1.5.2样品处理5
1.5.3抗氧化指标TAOC、TSOD、MDA5
1.5.4热休克蛋白基因HSP25、HSP70、HSP90的表达5
1.5.4.1总RNA的提取5
1.5.4.2RNA纯度检验5
1.5.4.3RNA浓度稀释5
1.5.4.4反转录6
1.5.4.5荧光定量PCR6
1.6数据统计6
2结果与分析6
2.1日粮添加姜黄素对小鼠生长性能的影响6
2.2抗氧化指标结果6
2.2.1姜黄素对MDA含量的作用6
2.2.2姜黄素对小鼠TAOC活性的作 *51今日免费论文网|www.jxszl.com +Q: ￥351916072$ 
用7
2.2.3姜黄素对小鼠TSOD活性的作用7
2.3热休克蛋白基因的表达7
2.3.1姜黄素对热休克蛋白HSP25基因表达的影响7
2.3.2姜黄素对热休克蛋白HSP70基因表达的影响7
2.3.3姜黄素对热休克蛋白HSP90基因表达的影响8
3 讨论 8
3.1姜黄素的小鼠生长性能的影响8
3.2姜黄素对热休克蛋白基因表达的影响8
3.3姜黄素对小鼠抗氧化作用8
致谢9
参考文献9
姜黄素对小鼠抗氧化功能与热休克蛋白表达的影响
动物科学 栗艳茹
引言
引言：姜黄素是从姜科姜黄属植物姜黄中提取的一种酚性色素，已广泛用作食品添加剂和染料[1]。大部分实验研究发现人体众多疾病的发生与自由基形成、炎症反应的参与有关，而姜黄素具有抗氧化、自由基清除的作用，而大量的研究证明 ，热休克蛋白与肿瘤的治疗有密切的关系[2]，所以将姜黄素抗氧化活性和抗炎作用与热休克蛋白的抗肿瘤特性有效结合，会产生巨大的作用。它具有抗肿瘤、抗炎、抗动脉硬化等广泛的药理作用[3]。大部分实验研究发现人体众多疾病的发生与自由基形成、炎症反应的参与有关，而姜黄素具有抗氧化、自由基清除的作用，所以姜黄素抗氧化活性和抗炎作用已引起国内外学者的广泛关注。
姜黄素的抗氧化机理：姜黄素是含有许多功能基团的独特的抗氧化剂，从化学结构分析，姜黄素有 2 个如同肉桂醛的苯丙烯酰基骨架，两个苯环上各有一个酚羟基和一个甲氧基，丙烯基与一个B双酮/烯醇式结构连接[4]。很多研究确认： 具有 1, 2二羟基基团的酚类物质有很强的抗氧化活性。因为动物细胞生存需要适当的氧化和抗氧化平衡[5]，而当其不能达到平衡时，氧化物与抗氧化物防御系统平衡遭到破坏，就有利于氧化物、氧化应激的发生，所以姜黄素的抗氧化作用对机体的健康及平衡有很大的帮助。
而在免疫功能上，姜黄素的免疫作用主要表现为抗炎、抗病毒、抗感染、抗肿瘤、抗凝、抗肝纤维化、抗动脉粥样硬化等[6]。当然吸引研究人员的不仅是姜黄素作为一种非甾体类抗炎药物，还因为其所具有的化学预防特性，姜黄素对疾病具有广泛的预防特性[7]。在抗肿瘤方面，虽然姜黄素本身具有抗肿瘤的特性，但是由于其稳定性差、水溶性差、生物利用度低等特质[8]，需要研究人员对其进行一系列有利的改造，确定其某些衍生物会具有较好的稳定性及抗肿瘤效果，例如Fuchs等[9]研究人员将姜黄素合成了一系列具有抗前列腺癌和乳腺癌活性的姜黄素衍生物，并且仔细研究了这些衍生物之间的构效关系。结果表明，姜黄素在体内会经历氧化、还原、糖基化和硫酸化等一系列的代谢过程，而 4 OH 是其糖基化和硫酸化的位点[10]，所以保护 4 OH 能够提高化合物的稳定性。姜黄素的免疫作用还有很多，随着人类科学技术研究的不断发展，攻克人类某些难以治疗的疾病成为人们日益关注的一个话题，所以对姜黄素免疫方面的研究不会止步不前。
在本实验中另一非常重要的试验因子热休克蛋白，在医学方面更是尤为广泛。热休克蛋白 ( heat shock protein,简称 HSP) 是所有原核细胞和真核细胞遭受高温或其它应激产生的一组非常保守的蛋白分子家族 ,它们主要起分子伴侣的作用[11]。热休克反应和热休克蛋白有以下特点: ( 1) 普遍性. 所有原核和真核生物都有热休克蛋白。( 2)保守性. 不同的物种有同源性很高的 HSP。( 3) 热激反应时 HSP的合成迅速增加而原有蛋白的合成则减少。这可能是热休克反应时正常蛋白的合成抑制与其信使 RNA的翻译抑制、剪接障碍及基因的转录受抑制等因素有关[12]。( 4) 除热以外的各种应激因子如缺血、缺氧等，都可诱导热休克蛋白的产生.。关于热休克蛋白的分类，现在应用最多的是 Morimoto的划分方法[13]，他将主要的 HSP分为 4个家族：HSP 90家族 (分子量约 83 ～ 90 ku)、 HSP 70 家族 (约 66 ～ 78 ku)、 HSP 60 家族及小分子量 HSP家族。
热休克蛋白具有很多功能，主要有：( 1) 增强生物或细胞的热耐受能力 ；( 2) 作为维系转运蛋白前体构象能力的分子伴侣；( 3) 正常情况下 HSP以可溶性形式存在于胞浆中 ，应激后转移至核内。应激后 HSP形成凝聚体，并作为瞬间的细胞基质和核基质固定细胞，起稳定的作用[14,15]。
随着对热休克蛋白研究的不断深入，热休克蛋白在医学上的应用价值也将不断的被开发出来。大量的研究证明，热休克反应和热休克蛋白与肿瘤的治疗有密切的关系。 近年来 ，高温和放射联合治疗肿瘤的应用日益增多，在第一次热疗后，肿瘤中的 HSP水平增高，肿瘤细胞对热的作用产生暂时性的抵抗力。当细胞中的 HSP减少时，抵抗作用也消失。这样就可通过测定HSP的量，来确定肿瘤细胞最易被高温治疗所摧毁的时间[11]。随着科学技术的发展，如今工业生产出的许多蛋白质在医学方面有着重要的作用。热休克反应和热休克蛋白在许多生物中都已被发现 ，它是生物抵抗不良环境的一种防御机制[16]。如果能用基因工程方法增强 HSP基因的表达 ，使动物、植物能忍受冷热及其它环境的影响 ，这无疑会带来巨大的经济价值。目前动、植物的的减产往往由于恶劣的环境造成 ，如使动植物能够经受相当大的环境考验 ，就有希望获得更高产。

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