奶牛乳腺炎是由物理、化学或微生物等因素刺激乳腺所引发的一种炎症反应，革兰氏阴性菌是奶牛乳腺炎的重要病原菌之一。脂多糖（Lipopolysaccharides, LPS）是革兰氏阴性菌细胞壁的主要成分，也是其主要的致病因子。本实验首先采用MTT法筛选出LPS诱导的奶牛乳腺上皮细胞损伤模型条件，然后通过台盼蓝拒染实验和Real-Time PCR检测细胞存活率和细胞IL-6、TNF-α的表达水平，从而评价该模型损伤效果，建立LPS诱导的奶牛乳腺上皮细胞损伤模型，为进一步研究LPS对奶牛乳腺上皮细胞的损伤机制和乳腺炎的防控方法奠定基础。实验结果表明1 μg/mL LPS刺激奶牛乳腺上皮细胞24 h，细胞存活率显著下降(P<0.05)，细胞IL-6和TNF-α表达水平极显著上升(P<0.01)。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1材料与方法2
1.1材料 2
1.1.1细胞2
1.1.2试剂及耗材2
1.1.3仪器3
1.2方法 4
1.2.1细胞培养4
1.2.2 MTT法筛选LPS诱导bMEC损伤模型条件4
1.2.3台盼蓝拒染实验检测LPS对bMEC存活率的影响4
1.2.4 RealTime PCR检测LPS 对bMEC IL6和TNFα表达水平的影响4
1.2.5 数据分析6
2结果与分析6
2.1细胞培养与细胞形态观察6
2.2 MTT法筛选LPS诱导bMEC损伤模型条件6
2.3台盼蓝拒染实验检测LPS对bMEC存活率的影响7
2.4 RealTime PCR检测LPS 对bMEC IL6和TNFα表达水平的影响7
2.4.1 RealTime PCR产物的扩增曲线及熔解曲线8
2.4.2 bMEC IL6和TNFα的表达水平8
3讨论 9
3.1细胞培养与细胞形态观察9
3.2 MTT法筛选LPS诱导bMEC损伤模型条件9
3.3台盼蓝拒 *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: ￥351916072$ 
染实验检测LPS对bMEC存活率的影响10
3.4 RealTime PCR检测LPS 对bMEC IL6和TNFα表达水平的影响10
3.5全文小结10
致谢10
参考文献11
LPS诱导的奶牛乳腺上皮细胞损伤模型的建立

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