：牛布氏杆菌病是 由布氏杆菌引起的人畜共患的一种慢性传染病 、一直是令养牛业最头痛的问题、这不仅是因为其带来的经济损失巨大、也是由于其引起的原因错综复杂难易防治。该病的临床特征是引起母牛流产或早产，故又称传染性流产并常引起子宫内膜炎导致受精障碍而不孕；公牛感染后发生睾丸、附睾、前列腺和贮精囊炎，造成无精子症或精子缺乏而致使生殖力降低或不育。据调查 ，我国各省市奶牛布氏杆菌病相当普遍。因此，防治与控制奶牛布氏杆菌病是每一个养牛工作者应该重视的问题。应力求系统的了解其致病的因素及诊断技术，针对病因，掌握其防治的有效措施 。为准确、快速、方便地诊断出该病提供了依据，继而提高牛布鲁氏杆菌病的治愈率。本研究采用ELISA血清学方法对新疆某牛场100份血清进行检测，结果发现阳性34份，可疑26份，阳性率为0.34%，该结果表明新疆某地区所属乡（镇）的部分牛被感染布氏杆菌病。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1材料与方法2
1.1实验材料 2
1.2实验方法 2
1.2.1动物保定 2
1.2.2动物采血2
1.2.3ELISA平板凝集试验2
1.2.4布病检测结果判定2
2结果与分析3
3讨论 3
3.1ELISA平板凝集试验注意事项3
3.2影响因素3
3.2.1标本的影响3
3.2.2试剂影响4
3.2.3操作技术的影响4
3.2.4干扰物的影响4
3.3本病的控制措施4
3.3.1预防措施4
3.3.2环境管理4
3.3.3分群防空4
3.3.4检测4
3.3.5检疫4
3.3.6消毒5
3.3.7加强培训5
4讨论5
致谢5
参考文献6
新疆某牛场布鲁氏杆菌病的检测
引言
布氏菌病（brucelosis）又称波浪热（undulant fever）或马
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尔他热（Molta fever）。是布氏杆菌引起的动物源性传染病，呈地方流行[1]。布氏杆菌病遍及世界各地，以中东、西亚和南美洲最多[2]。在我国多见于内蒙、新疆、甘肃、青海、西藏等农牧区。近年来，随着养殖业和畜牧业的迅速发展，布病发病数有逐年增多的趋势[3]。临床上主要表现为母牛除流产外，其他症状常不明显。流产多发生在妊娠后第5～8个月，产出死胎或弱胎。流产后可能出现胎衣不下或子宫内膜炎。流产后阴道内继续排褐色恶臭液体。母牛发生睾丸炎，并失去配种能力。胎儿胃内有粘液性絮状物，胸腔积液，淋巴结和脾脏肿大，有坏死灶。有的病牛发生关节炎、滑液囊炎、淋巴结炎或脓肿、肝脾肿大等症状和体征[47]。布鲁氏杆菌病是由布鲁氏杆菌引起的一种慢性人畜共患传染病，属国家二类动物传染病，我国流行的主要是羊种、次为牛种，少数为猪种布鲁氏杆菌。布氏杆菌是革兰氏阴性需氧杆菌分类上为布氏杆菌属。布氏杆菌属有6个种，即牛种、羊种、猪种、绵羊种、犬种和沙林鼠种，前5种感染家畜。本属细菌为非抗酸性，无芽胞，无荚膜，无鞭毛，呈球杆状。组织涂片或渗出液中常集结成团，且可见于细胞内，培养物中多单个排列。在自然界中抵抗力较强，在病畜的脏器和分泌物中，一般能存活4个月左右，在食品中约能生存2个月。对低温的抵抗力也强，对热和消毒剂抵抗力弱。对链霉素、氯霉素和四环素等均敏感。牛对本病的易感性，随着性器官的成熟而增加。病牛是主要的传染源。病菌随病母牛的阴道分泌物和病公牛的精液排出，特别是流产的胎儿、胎盘和羊水内含有大量的病菌，通过消化道传染，主要是易感牛采食了污染的饲料、饮水所致。另外通过直接接触传染，如接触了污染的用具，或者与病牛交配、皮肤或粘膜的直接接触而感染。本病常呈地方性流行。家畜临床表现不明显，但怀孕的母畜则极易引起流产或死胎。新发病牛群，流产可发生于不同的胎次；在常发牛群，流产多发生于初次妊娠牛。所排出的羊水、胎盘、分泌物中含大量布氏杆菌，特别有传染力。本病分布很广，不仅感染各种家畜，而且易传染给人。
1 材料与方法
1.1 实验材料
抗原、阳性血清和阴性血清由县畜牧兽医总站提供。游标卡尺，剪毛剪,1ml注射器 ,5 ml一次性注射器，4号针头,0.2 ml吸管2支 ,斜面血液放置架 ,75%酒精棉球 ,生理盐水,红色油漆气雾剂和布病虎红平板凝集抗。
1.2实验方法
1.2.1动物保定
在运动场中临时搭建隔离护栏和保定架。在动场中用钢管横扎围墙把运动场分成待检栏和检疫栏，在栏杆的内侧用建筑钢管搭建井字型临时保定架。
1.2.2动物采血
抽取 3.5 ml血液,把抽取的血液放置到斜面血液放置架上，同时由另一名检疫员在牛的颈中部上 1/3处剪毛,直径约 10 cm 的术部,用游标卡尺测量术部中央皮皱厚度，要详细记录原皮厚度、检疫顺序号和牛的耳号,酒精棉球消毒后用1 ml注射器抽取 0.1 ml结核菌素呈45度向下刺入皮内缓慢地推进药液形成豆大小包，拔出针头后用酒精棉球轻轻拭去少量漏液，完成操作后用红色油漆气雾剂在牛的头部喷上检疫记号放行。
1.2.3 ELISA平板凝集实验
具体步骤:
（1）包被 将包被液稀释包被抗原至合适浓度，包被酶莲板，每孔100微升。用保鲜膜包好，4℃过夜。次日弃去孔内溶液，并在面巾纸上拍干。用PBST洗液，洗4—5次。
（2）封闭 用封闭液封闭，每孔100微升。弃去孔内溶液，并在面巾纸上拍干。用PBST洗液，洗4—5次。（同包被），用保鲜膜包好，4℃备用。
（3）加标准样及样品 待测样或标准一：用PBST洗液进行稀释到适合浓度，每孔50微升，包好保鲜膜。室温下，在微量振荡器上孵育2小时之后清洗。 二：用PBST洗液进行稀释到适合浓度到每孔10微升，包好保鲜膜。室温下，在微量震荡器上孵育1小时之后清洗。
（4）显色液 A液：0.2mol/L Na2HPO4 Na2HPO4`12H2O，71.7g加水至1000ml。B液0.1mol/L柠檬酸，19.2g 柠檬酸加水至1000ml。
显色液每孔100微毫升。避光显色15—20min。每孔50微毫升2mol/LH2SO4终止反应。
1.2.4牛布病检测结果判定
牛布病检测结果判定,在阳性血清及阴性血清对照下被检血清出现任何程度的凝集现象均判定为阳性完全,不凝集的判断为阴性，其余判定为可疑。
判定标准:牛血清凝集价在l:100以上为阳性、牛血清凝集价为1:50时被判为可凝，如果是血清没凝集那就判定为阴性。
对一般病牛应淘汰，无治疗价值。结价值较昂贵的种牛可在隔离条件下进行治疗。对流产伴有子宫内膜炎的母牛，可用0.1%高锰酸钾溶液冲洗阴道和子宫，每日早、晚各一次。另外，应用抗生素（如四环素、土霉素、链霉素等）治疗。
2 结果与分析

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