本实验采用高效液相色谱法（HPLC）检测血浆中恩诺沙星的浓度变化，来探究氟尼辛葡甲胺对健康肉鸡口服恩诺沙星药动学的影响。实验选取14只AA肉鸡并随机分为两组，一组为单剂量（10 mg/kg.b w）口服恩诺沙星对照组，另一组为用氟尼辛葡甲胺提前6 h诱导给药后再口服恩诺沙星实验组。各组肉鸡在给药前后不同时间点采集血样，用HPLC测定恩诺沙星的血药浓度，并通过3P97软件计算药动学参数。实验表明，氟尼辛葡甲胺提前6 h给药后再口服给予恩诺沙星，会使恩诺沙星的峰浓度Cmax（3.01±0.16 µg·mL-1，P<0.01)以及曲线下面积AUC（59.09±6.29 µg·ml-1·h，P<0.05)与对照组相比均显著增大，清除速率（Cl）与对照组相比虽有降低，但差异不显著（P>0.05）。其它药动学参数变化并不显著。结果提示氟尼辛葡甲胺与恩诺沙星联合使用时，可以影响恩诺沙星在体内的药动学过程，产生药物间的相互作用。
目录
摘要 1
关键词 1
Abstract 1
Key words 1
引言 1
1 材料与方法 2
1．1 材料 2
1．1．1 试验动物 2
1．1．2 药品与试剂 2
1．1．3 试验仪器 2
1．2 方法 2
1．2．1　检测波长选择 2
1．2．2 血浆中恩诺沙星检测的色谱条件 2
1．2．3 主要工作液配制 2
1．2．4 给药方案与血样的采集 2
1．2．5 血浆样品处理方法 3
1．2．6 HPLC检测血浆中恩诺沙星方法学的建立 3
1．2．6．1 专属性考察 3
1．2．6．2 标准曲线制备 3
1．2．6．3 回收率 3
1．3数据的处理 3
2 结果与分析 3
2．1 恩诺沙星色谱检测方法的建立 3
2．1．1 紫外波长的选择 3
2．1．2 专属性考察 3
2．1．3　标准曲线的制备 4
2．1．4　回收率 5

 *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: ^351916072* 
2．2 恩诺沙星的药时曲线与药动学参数 5
2．2．1 对照组和氟尼辛葡甲胺处理组肉鸡体内恩诺沙星的药时曲线 5
2．2．2 氟尼辛葡甲胺对健康肉鸡体内恩诺沙星的药动学参数的影响 6
3 讨论 6
致谢 7
参考文献： 8
氟尼辛葡甲胺对肉鸡口服恩诺沙星药动学的影响
引言
引言
恩诺沙星(Enrofloxacin)是一种动物专用的氟喹诺酮类化学合成的抗菌药物，不溶于水，可溶于氢氧化钠、甲醇、氰甲烷等有机溶剂，具有广谱抗菌性、杀菌活性强、广泛分布于体内、与其他抗菌药物无交叉耐药等特点[1]，已普遍应用于国内外兽医临床对动物疾病的预防和治疗。动物给药后，在肝脏、肺、肾等组织中能达到很高的浓度，是血药浓度的几倍[2]，绝大多数细菌感染的MIC达0.008~0.75 μg/mL[3]，其对G+、G及支原体感染等有很好的疗效。非甾体抗炎药作为对症治疗的药物其临床需求量十分巨大[6]，能够消除或减缓机体的炎症、发热、肿胀、疼痛等症状。氟尼辛葡甲胺（FM）系氟胺烟酸的葡甲胺盐，易溶于水，甲醇和乙醇，氯仿中难溶，作为动物专用的非甾体抗炎药（NSAIDs），在美国和英国已普遍应用，且被收入药典[45]。该药是一种强效环氧化酶抑制剂，广泛用于治疗多种动物疾病，毒副作用小，具有镇痛、解热、抗炎和抗风湿作用。国外对FM的研究和使用主要集中在马、牛、羊及猪[7]上，而我国养禽业发展迅速，但是在禽类养殖中使用的非甾体抗炎药仍较缺乏，因此FM是个非常理想的候选药物。所以本实验率先开展了对恩诺沙星和氟尼辛葡甲胺的药物之间相互作用的研究，研究氟尼辛葡甲胺对肉鸡口服恩诺沙星药动学的影响，可以为其在兽医临床上与抗菌药物的联合用药和安全使用药物提供依据。
1 材料与方法
1.1材料
1.1.1试验动物 1日龄AA健康肉鸡14只，南京某养鸡场提供，饲喂全价不含任何抗菌药的日粮，健康饲养至30日龄，体重达0.6~0.7Kg且符合试验要求后进行试验。试验前禁食24h，期间自由饮水。
1.1.2药品与试剂 氟尼辛葡甲胺：由齐鲁保健品有限公司提供，含量为0.05g/mL；恩诺沙星原料药：由上虞京新药业有限公司提供，含量为99.8 %；对照品恩诺沙星：购于中国药品生物制品检察所，含量为99.8 %，批号：H0080904；乙腈：购自德国默克公司，色谱级（HPLC）；二氯甲烷、正己烷：南京化学试剂有限公司，均为分析纯级（AR）；三乙胺、磷酸：购于南京寿德有限公司，分析纯级（AR）；肝素钠注射液：购于上海第一生化药业有限公司，规格：2 mL，12500单位，批号：H31022051。
1.1.3试验仪器 高效液相色谱系统：Waterse2695型高效液相色谱仪G1314BVW型紫外检测器，购于美国Waters公司；自动平衡微型离心机：LCLXJ10K，购于上海领成生物科技有限公司；电子分析天平：BS210S型，北京赛多利斯天平有限公司；涡旋混合仪：WH3型，上海沪西分析仪器厂；高速离心机：3K15型，德国Sigma公司；pH计：梅特勒托利多（上海）有限公司。
1.2方法
1.2.1检测波长选择　根据参考文献[8]，在报道波长范围内检测观察，在选择吸收高，且分离良好，杂质干扰少的波长作为检测波长。
1.2.2血浆中恩诺沙星检测的色谱条件　色谱柱：Kromasil C18 HPLC Columns (5 μm，25 cm×4.6 mm，南京微色谱公司)；柱温：35℃；检测波长：278 nm；进样量：10 μL；流速：0.85 mL/min；流动相：0.1M H3PO4 溶液（三乙胺调Ph至3.5）：乙腈=84：16（V/V）。
1.2.3主要工作液配制 0.1mol/L H3PO4溶液配制：准确移取85% H3PO4溶液6.822 mL于1 L容量瓶中，定容，混匀后用三乙胺调pH至3.50，抽滤，超声除气泡，待用。
10 mg/mL恩诺沙星溶液的配制：准确称取1.0 g恩诺沙星于小烧杯中，滴加10mL NaOH溶液使之充分溶解，至100 mL 容量瓶中，准确定容。
恩诺沙星储备液的配制：准确称取恩诺沙星对照品10.0 mg，于10 mL容量瓶中，加混匀的流动相充分溶解后定容，得含量为1mg/mL溶液，4℃保存备用。
1.2.4 给药方案与血样的采集 14只健康肉鸡，随机分成两组，每组各7只，分别为对照组和实验组。试验前禁食12 h，期间自由饮水。实验组提前6 h按剂量2.2 mg/kg口服给予氟尼辛葡甲胺，然后口服恩诺沙星（10 mg/kg），对照组以10 mg/kg的剂量单独口服恩诺沙星。
实验鸡采取侧卧保定，翅静脉采血，给药前采空白血（0 min），然后在口服恩诺沙星后的5 min、10 min、20 min、30 min、45 min、1 h、2 h、4 h、6 h、8 h、12 h、24 h和48 h采集血样，每次采血量约为2.0 mL。采集的血液样品置于肝素钠抗凝管中，4℃，4 000 rpm离心8 min后分离血浆，所得血浆样品置新EP管中，20℃冰箱保存，备用。

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