在维持宿主健康状况方面，肠道微生物群是非常重要的。它能够从摄取的食物中得到所需的营养和能量，并且帮助机体更好地进行代谢。胆汁酸，是由肝细胞通过一系列复杂反应经胆固醇合成的一类物质，是胆汁重要成分，对于脂肪的代谢有着必不可缺的作用。作为能够进行信号调节的小分子物质，机体内许多代谢途径都有胆汁酸的参与，并且胆汁酸可以改变肠道微生物群的组成成分，使宿主代谢受到影响。本实验对妊娠后期母猪饲料中添加不同剂量胆汁酸，提取粪便中DNA比较母猪产前和断奶时肠道微生物菌群的变化，可以初步推断出胆汁酸作为一种生物活性物质，能够起到抑菌的作用。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1材料与方法2
1.1材料 2
1.1.1实验仪器 2
1.1.2实验试剂2
1.2方法2
1.2.1试剂的配制2
1.2.2饲喂胆汁酸3
1.2.3收集母猪产前和断奶时粪便然后进行粪样预处理3
1.2.4提取粪便样品中DNA3
1.2.5 DNA浓度的测定及统一 4
1.2.6 DNA凝胶电泳 4
1.2.7 Realtime PCR5
2 结果与分析6
2.1实验结果6
2.1.1母猪产前和断奶时肠道微生物菌群因饲料中添加不同剂量胆汁酸的变化6
2.1.2母猪妊娠后期饲料中添加不同剂量的胆汁酸对产前和断奶时肠道微生物菌群影响的比较9
2.2结果分析10
2.2.1多重比较10
3讨论10
致谢12
参考文献12
图16
图27
图37
图48
图5 9
图610
妊娠后期胆汁酸对母猪产前和断奶时肠道微生物菌群变化的比较分析
引言
肠道内细菌种类多，数量大，能够协助机体的生理机能保持在一个正常的水平上，维持机体健康。肠道内细菌群使肠道组织能够逐步正常发育成熟[1]，能够在肠道黏膜 *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: *351916072* 
形成保护层，防止致病菌的侵袭，并且对于宿主的免疫系统发挥正常功能能够起到很好的调节作用[2]。同时，肠道内细菌能够促进宿主对营养物质的摄入与吸收[3]，并且通过调节机体内肠脑轴发挥相应功能[4]进而维持机体正常水平的物质和能量代谢[5]。机体内肠道微生物菌群的变化会引起内环境稳态的改变，导致疾病的发生。
胆汁酸可以加快小肠中脂类物质的代谢与吸收，这是通过形成混合胶束并利用了自身的乳化功能[6]，并且胆汁酸作为常见的信号分子可以与多种机体内受体结合或者使细胞内相应的信号传导通路激活，通过不同机制途径调节机体稳态，在糖脂与能量等代谢中起到不可或缺的作用以及能够改变相关基因的表达[7]。例如胆汁酸能够和细胞膜表面蛋白G蛋白偶联受体TGR5相结合从而介导白色脂肪组织的棕色化并且能够加快能量代谢[8]。胆汁酸还可以通过多种途径参与对肠道细胞的调节，加强肠道的生长发育和免疫力，减少机体肠道对细菌内毒素的吸收，并且维持肠道微生物的稳态[9]。
肠道内微生物菌群的稳态和胆汁酸在机体内的合成代谢有着非常重要的联系，肠道内细菌群的组成成分、生长增殖与胆汁酸的代谢之间可以相互影响，相互作用[10]。本课题拟通过在母猪妊娠后期的饲料中添加不同剂量的胆汁酸，比较分析母猪产前和断奶时粪便中微生物的迁移变化，探讨其对母猪健康及后代仔猪产生可能的影响，为胆汁酸在母猪妊娠期和哺乳期的添加提高理论依据。
1 材料与方法
1.1材料
1.1.1实验仪器
高压蒸汽灭菌锅，研磨珠均质器（Beadbeater），水浴锅，离心机，涡旋混合器，加热磁力搅拌器，Nano drop，实时荧光定量PCR仪，量筒，烧杯，玻璃棒，电子天平，实验室酸度计，蓝盖试剂瓶，棕色玻璃瓶，氧化锆珠，锆珠管，移液枪，枪头，1.5ml离心管，2ml离心管，离心管管架，无菌纸巾，电泳仪，电泳槽，电泳板，梳子，紫外投射分析仪，微波炉，锥形瓶。
1.1.2实验试剂
氯仿，异戊醇，无水乙醇，三蒸水，浓盐酸，Tris，Na2EDTA2H2O，氢氧化钠，CTAB，RNA酶，异丙醇，NaAcH2O，冰醋酸，饱和苯酚溶液，氯化钠，2巯基乙醇，琼脂糖，TAE电泳缓冲液，溴化乙锭。
1.2方法
1.2.1试剂的配制
95%乙醇的配制：
用量筒量取95ml无水乙醇，使用三蒸水定容至100ml。配好后放置于20℃保存。
70%乙醇的配制：
用量筒量取70ml无水乙醇，使用三蒸水定容至100ml。配好后放置于20℃保存。
1M/L TrisHCl的配制：
精确称取12.11g Tris 放置于烧杯中，加入80ml 三蒸水，充分搅拌溶解，滴加浓盐酸调节pH 值至7.6，最后定容至100ml。高温高压灭菌后，室温保存。
0.5M/L EDTA的配置：
精确称取18.61g Na2EDTA2H2O放置于烧杯中，加入50ml 三蒸水，充分搅拌均匀，使用氢氧化钠调节至pH 值为8.0，最后定容至100ml。高温高压灭菌后，室温保存。
TE缓冲溶液的配制：
分别量取已经配制好的 1M/L TrisHCl 溶液1ml和0.5M/L EDTA溶液0.2ml，加入80ml的三蒸水混合均匀后，使用三蒸水定容至100ml。高温高压灭菌后，室温保存。
3M NaAc 的配制：
称取408.1g NaAcH2O放置于烧杯中，加入800ml三蒸水，充分搅拌溶解，使用冰醋酸将pH值调至5.2，最后定容至1000ml。高温高压灭菌后，室温保存。

原文链接：http://www.jxszl.com/yxlw/dwyx/562180.html