A群轮状病毒常见于婴幼儿和多种幼龄动物，对猪而言，会引起急性胃肠疾病。DEAD-box解旋酶21( DExD-box helicase 21，DDX21) 是含DEAD-box的RNA解旋酶家族成员之一，不仅参与RNA的合成和加工过程，同时还参与机体的天然免疫应答，调控病毒的复制。本研究拟通过过表达和RNA干扰研究DDX21基因在猪A群轮状病毒复制中的作用。首先克隆DDX21基因，并构建真核表达质粒，其次鉴定siRNA对细胞的干扰效果，最后采用荧光定量PCR检测DDX21过表达和干扰对猪A群轮状病毒复制的影响。结果显示，所设计的三个siRNA能够抑制DDX21基因的转录，且DDX21表达被抑制后，病毒的复制能力显著增加；过表达质粒转染细胞后能表达DDX21，且病毒复制能力显著下降。综上，RNA解旋酶DDX21对猪A群轮状病毒的复制有抑制作用。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1材料与方法2
1.1试验材料 2
1.1.1细胞及毒株2
1.1.2主要工具酶及试剂2
1.1.3主要仪器及设备2
1.1.4主要溶液的配制2
1.1.5细胞培养3
1.2试验方法 3
1.2.1构建真核表达质粒3
1.2.2蛋白质免疫印迹（Western blot）验证过表达情况4
1.2.3 siRNA证实干扰效果5
1.2.4过表达DDX21对RVA复制的影响5
1.2.5 DDX21干扰对RVA复制的影响6
2 结果与分析6
2.1 DDX21基因的RTPCR扩增6
2.2 构建DDX21基因的真核表达质粒7
2.3 Western blot鉴定DDX21过表达情况7
2.4 siRNA干扰效果的鉴定8
2.5过表达DDX21对RVA复制的影响9
2.6 DDX21干扰对RVA复制的影响9
3 讨论 10
致谢10
参考文献11
RN *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: &351916072& 
A解旋酶DDX21在猪A群轮状病毒复制中的作用初探

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