乳腺肿瘤严重影响着犬的生活质量与寿命，且具有较高的发病率。同时，犬乳腺肿瘤与人乳腺肿瘤的相似度较高，可以作为人乳腺肿瘤的动物模型。姜酚是姜根茎中的一种酚类物质，在人医领域已被证明具有一定的抗肿瘤作用，而对动物的抗肿瘤作用却尚未知晓。本研究通过细胞增殖抑制试验，细胞迁移试验和细胞侵袭试验初步探讨6-姜酚，8-姜酚与10-姜酚对犬乳腺肿瘤CIPp细胞系的抑制作用。结果表明，三种药物均可有效抑制犬乳腺肿瘤细胞的增殖，迁移和侵袭，6-姜酚，8-姜酚与10-姜酚的细胞半数致死剂量IC50分别为244.10（±10.47）μM，91.92（±1.81）μM，88.48（±2.19）μM（N=3）。结合三个试验，对犬乳腺肿瘤CIPp细胞系的抑制作用10-姜酚>8-姜酚>6-姜酚。
目录
摘要3
关键词3
Abstract3
Key words3
引言3
1 材料与方法4
材料 4
1.1.1 试验对象 4
1.1.2 药品 4
1.1.3 主要试剂耗材 4
1.1.4 主要仪器设备 5
1.2 方法 5
1.2.1 细胞培养5
1.2.2 细胞增殖抑制试验5
1.2.3 细胞迁移试验5
1.2.4 细胞侵袭试验5
1.2.5 数据统计与分析6
2 结果与分析6
2.1 三种姜酚药物对细胞增殖的抑制作用6
2.2 三种姜酚药物对细胞迁移能力的影响6
2.3 三种姜酚药物对细胞侵袭能力的影响9
3 讨论 10
致谢12
参考文献12
姜酚对犬乳腺肿瘤细胞的抑制作用
引言
现如今，肿瘤已成为医学界的关注焦点，在人类的死亡原因中排名第二，仅2015年一年就引起了880万人死亡[1]。此外，肿瘤在动物上也同样是一种高发性疾病，严重影响动物的生活质量与寿命。作为国内犬第二大肿瘤的乳腺肿瘤，其发病率约占全部犬肿瘤病例的30%[2]。在人医上，中国虽不是乳腺癌的高发国家，但依旧拥有十万分之四十二左右的发病率。因此， *51今日免费论文网|www.jxszl.com +Q: *351916072* 
不论是在人类或是动物的医学领域，乳腺肿瘤均受到了人们的高度关注。
外科手术摘除是目前最有效的治疗犬乳腺肿瘤的方法，激素疗法也是常用的方法之一，其主要是通过实施犬卵巢摘除术，一般与肿瘤摘除同时进行，这种方法可有效延长犬的生存期，但是若想进行手术，对病犬的身体状况要求较高，应在术前进行全面检查，若有精神较差，发热，感染的患犬需等到病情稳定之后再进行手术，年老体弱和有肿瘤转移发生的患犬不建议进行手术，且手术麻醉也有一定的风险。化疗的应用也逐渐变得普遍，长春新碱可抑制乳腺肿瘤细胞的增殖并促进其凋亡，环磷酰胺、亚硒酸钠和紫杉醇也具有一定的抗乳腺肿瘤作用，然而化疗有一定的毒副作用。因此不论是在手术还是化疗的选择上均有一定的局限性，人们也在不断找寻新的治疗方法。
影响肿瘤的因素有很多，不仅我们所处的环境与药物的预防治疗对肿瘤疾病产生影响，饮食因素也与肿瘤的发生发展存在着重要的相关性[3]。而姜在我们的饮食生活中已成为了人们不可或缺的调味品之一，有解表散寒，温中止呕等功效[4]，其根茎也拥有广泛的药用功效，在中国和马来西亚，姜的根茎可制成传统的东方草药，用于治疗感冒、消化紊乱、风湿病、神经痛等疾病。姜酚存在于姜的根茎之中，是一种味辣而苦的酚类物质，具有抗氧化、抗诱变、抗炎、抗风湿[5]等多种生物活性。目前，在人医领域中，已有多项研究表明姜酚在对抗乳腺癌，宫颈癌，直肠癌等多种类型的肿瘤中也有一定的作用，姜酚具有一系列分化的同源物，以6姜酚的含量最为丰富，因此人们对6姜酚的研究也最多，有研究表明其可介导多种肿瘤类型包括乳腺肿瘤的抗肿瘤作用和体内体外的抗肿瘤转移活性。早在1998年国外就有研究表明6姜酚对HL60细胞（即人早幼粒白血病细胞）有抑制作用，提出了姜酚具有抗肿瘤药物的潜力作用[6]。在之后的几年中，又有多项研究揭示了6姜酚的抗肿瘤作用机制，如2006年发表的对6姜酚诱导表达突变型p53的胰腺癌细胞的细胞周期停滞和细胞死亡相关研究[7]。再如2007年发表的6姜酚抑制MDAMB231人乳腺癌细胞的转移相关研究[8]，从姜酚对肿瘤细胞的黏附侵袭与运动的抑制角度进行了研究等等。直到2009年，首次提出10姜酚对人直肠癌细胞的抑制作用机制研究[9]，并相继对10姜酚的抗肿瘤作用机制有了更多的研究。8姜酚的研究则主要集中在2015年之后，且相关研究并不是很多。而国内的相关研究相比之下则比较少，且研究较晚。然而不论是6姜酚，10姜酚还是8姜酚目前均已有研究表明对人乳腺肿瘤细胞有抑制作用[10][11][12]，且已有一些抑制机制已被发现。
母犬乳腺肿瘤的发病率可能是人类女性的三倍，虽然这些肿瘤中许多是混合乳腺肿瘤，但约三分之一与人类乳腺肿瘤相类似。虽然人和犬存在寿命的差异，但是两个物种的发病年龄却很相似，世界卫生组织对犬乳腺肿瘤的分类也尽可能遵循WHO对人乳腺肿瘤的分类，且现在已经完成了犬乳腺肿瘤的临床分期。两个物种的一些预后因素相似，转移扩散也大致相似，只是肝脏和骨骼的参与在母犬中并不像人类女性那样普遍。尽管这两个物种之间存在相当大的内分泌差异，但卵巢摘除术在两者中均可预防乳腺癌，此外还有研究表明犬的乳腺肿瘤表现出与人类乳腺病变中观察到的抗原表型相当的表型。虽然在人医领域对姜酚抗肿瘤作用已开展了部分研究，目前姜酚对动物肿瘤的抑制作用却几乎没有研究，因此结合国内乳腺肿瘤在犬上的高发情况和人类与犬乳腺肿瘤的相似程度，本文主要研究6姜酚、8姜酚与10姜酚三种主要姜酚成分对犬乳腺肿瘤细胞系的抑制作用，这可能是首次将姜酚作用于动物肿瘤细胞，该研究很可能能够为犬的抗肿瘤药物研发提供帮助，提供一种新的抗犬乳腺肿瘤方法，以减少其它已有抗肿瘤方案的毒副作用，为犬乳腺肿瘤治愈率的提升方法提供一种新的思路。
1 材料与方法
1．1 材料
1．1．1 试验对象

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