挥发性脂肪酸是日粮在瘤胃中发酵的重要产物，是反刍动物的主要代谢能来源。主要由碳水化合物及蛋白质经微生物降解产生，并通过瘤胃上皮吸收。挥发性脂肪酸对瘤胃上皮生理功能的调节一直受到广泛关注。本课题是在整体动物水平和组织水平上，研究挥发性脂肪酸和胰高血糖素样肽对瘤胃上皮细胞基因表达的调节作用与调节方法。实验分为四个步骤1.实验动物饲养，品种为山羊；2.瘤胃内容物理化性质检测；3.瘤胃上皮细胞基因表达检测；4.瘤胃上皮离体培养。结合文献对实验结果进行分析讨论，最终得出结论。
目录
摘要4
关键词4
Abstract4
Key words4
引言4
1 材料与方法4
1.1 动物饲养 4
1.2 主要仪器和试剂5
1.2.1 主要仪器5
1.2.2 主要试剂6
1.3 样品采集6
1.4 瘤胃基本指标测定6
1.4.1 瘤胃pH和渗透压测定6
1.4.2 瘤胃氨氮测定6
1.4.3 瘤胃微生物蛋白测定 6
1.4.4 瘤胃挥发性脂肪酸测定7
1.4.5 瘤胃上皮形态学研究7
1.5 瘤胃上皮RNA提取及PCR7
1.5.1 材料准备7
1.5.2 瘤胃上皮RNA提取8
1.5.3 RNA反转录8
1.5.4 实时荧光标记PCR8
1.6 瘤胃上皮体外培养8
1.6.1 材料准备8
1.6.2 体外培养方法9
2 结果与分析9
2.1 日粮调节山羊瘤胃内容物理化性质9
2.1.1 山羊瘤胃pH和渗透压9
2.1.2 山羊瘤胃氨氮和微生物蛋白10
2.1.3 山羊瘤胃VFA浓度11
2.1.4 山羊瘤胃上皮乳头参数12
2.2 山羊瘤胃上皮VFA相关的mRNA表达13
2.2.1 山羊瘤胃上皮Na/H交换蛋白mRNA表达13
2.2.2 山羊瘤胃上皮转运载体mRNA表达13
2.2.3 山 *51今日免费论文网|www.jxszl.com +Q: ￥351916072$ 
羊瘤胃上皮细胞VFA受体mRNA表达14
2.2.4 山羊瘤胃上皮紧密连接复合体mRNA表达14
2.3 体外培养山羊瘤胃上皮的RNA表达14
3 讨论15
3.1 日粮精料水平对山羊瘤胃内容物理化性质的影响15
3.2 日粮精料水平对山羊瘤胃上皮VFA相关基因表达的影响15
3.2.1 日粮精料水平对山羊瘤胃上皮VFA吸收转运相关载体基因表达的影响15
3.2.2 日粮精料水平对山羊瘤胃上皮VFA相关G蛋白偶联受体基因表达的影响16
3.2.3 日粮精料水平对山羊瘤胃上皮紧密连接复合体基因表达的影响16
4 总结16
致谢17
参考文献17
挥发性脂肪酸对瘤胃上皮能量物质转运吸收载体基因表达和上皮吸收面积的调节
引言
引言：反刍动物与单胃动物最大区别是除皱胃外，还具有三个前胃，其中瘤胃是最大、最主要的器官。与其他动物通过胃分泌消化液将营养物质分解为简单小分子进而吸收利用的消化模式不同，反刍动物的瘤胃没有消化腺，摄入的日粮都需要先在瘤胃中被瘤胃微生物发酵分解。发酵产生的挥发性脂肪酸是反刍动物主要的能量来源，可提供机体所需能量的6080%。挥发性脂肪酸（Volatile fatty acid, VFA）是指含有1~6个碳链的短链脂肪酸，包括乙酸、丙酸、丁酸、异丁酸、戊酸和异戊酸，其中对反刍动物最为重要的是乙酸、丙酸和丁酸，约占瘤胃发酵总VFA的95%以上。
VFA对瘤胃多种生理功能都存在着调节作用，而其具体调节机制又大多尚未阐明。通过实验对VFA的调节作用进行研究，有助于探索其作用机制，为进一步的研究打下基础。此外，饲料的精/粗料比可以直接影响反刍动物瘤胃VFA的浓度。通过实验选择合适的饲料配比用于养殖，可以为畜牧行业带来极大的收益。
1 材料与方法
1．1 动物饲养
选用波杂山羊作实验动物，年龄4个月左右，体重15~20 kg。将羊随机分为三组，编为1~6号，分组标记为L组（10%精料水平）、M组（35%精料水平）、H组（65%精料水平）。每头羊单独一栏饲养，实验前进行适应期饲养7天，供足草料和水，使其适应环境变化。
按照定制配方（表11）制备混合精料。
玉米粉 Corn meal
150 g
1500 g
豆粕/soybean meal
40.2 g
402 g
预混料/premix
5.0 g
50 g
食盐/salt
1.3 g
13 g
磷钙/Ca、P
3.5 g
35 g
总计
200 g
2000 g
表11 实验混合精料配方
粗料选用新鲜的羊草，喂养时将不同比例的精、粗饲料混合，饲养方案如下（表12）。
实验组
饲喂时间
新羊草
混合精料
豆粕
L组
合计
800 g
65 g
上午8:00
450 g
37 g

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