氧化锌纳米颗粒预防鸡感染堆型艾美耳球虫的研究【字数:8739】
目录
摘要 1
关键词 1
Abstract 1
Key words 1
引言1
1.材料与方法2
1.1 实验动物及材料 2
1.1.1 实验动物 2
1.1.2 实验材料2
1.2实验方法 2
1.2.1 E.acervulina孢子化卵囊的扩增及感染方法2
1.2.2 实验动物及分组3
1.2.3实验设计 3
1.2.4抗球虫保护效果的观察 3
2.结果与分析5
2.1存活率 5
2.2增重效果 5
2.3十二指肠病变记分结果 6
2.4 卵囊值 6
2.5 ACI测定结果 7
3讨论 7
致谢9
参考文献9
氧化锌纳米颗粒预防鸡感染堆型艾美耳球虫的研究
引言
引言:球虫病是畜牧生产中十分常见的一种原虫病,在家畜中,马、牛、羊、猪、犬、骆驼、兔、鸡、火鸡、鸭、鹅和鹌鹑都会发生球虫病。鸡球虫病是要特别注意的一种寄生虫病,分布十分广泛,它对养鸡生产的危害十分严重。其中1550日龄的雏鸡发病率高,死亡率可达80%,而发病雏鸡即使病愈,其生长发育也会受阻,长期不能康复。而成年鸡多会成为带虫者,虽没有明显的临床症状,但其增重和产蛋会受到影响。全世界每年用于药物预防鸡球虫的费用已超 *51今日免费论文网|www.jxszl.com +Q: ¥351916072¥
过数十亿美元[1]。据相关统计,我国每年被用于防治鸡球虫病的费用,高达数亿元人民币。
寄生在鸡的艾美耳球虫,全世界报道的有9种,但为世界公认的有7种[1],其致病力与危害各不相同,但是都会造成大量的经济损失。堆型艾美耳球虫(Eimeria acervulina)的致病力程度属于中等,但是它在家禽养殖场会造成巨大的经济损失。它主要影响肠道的正常吸收功能,会导致饲料转化率下降,因此受感染的肉仔鸡或母鸡会出现增重受阻和或产蛋量下降的现象,虽然鸡群的死亡率不高,这种隐性感染造成的经济损失也十分严重。
对鸡球虫的防治措施主要有抗球虫鸡种群的培育、控制环境、药物使用和免疫防治等[2]。由于对鸡球虫长期使用药物手段进行防治,导致鸡球虫的耐药性不断提高,耐药虫株也在不断出现,药物防治的效果逐渐变差。使用抗球虫药物,还会引起动物性食品的药物残留问题。免疫防治目前主要使用的是活球虫进行免疫,用量不易掌握易造成球虫病的发生。这就要求我们寻找到更好的物质来进行球虫病的防治。Mohamed[3]的研究表明氧化锌纳米颗粒对于鼠球虫病有预防保护作用。本研究拟选取堆型艾美耳球虫作为研究对象,探讨氧化锌纳米颗粒作为防治球虫的可能性。
1 材料与方法
1.1实验动物及材料
1.1.1实验动物
购买1日龄海兰白雏鸡,购自海安县双利孵禽场,饲养于经严格消毒的鸡舍与鸡笼中,饲养于无球虫环境,饲喂全价颗粒饲料,饲料不含任何抗球虫药物和添加剂,每天给予新鲜饲料和饮水,自由采食。
1.1.2 实验材料
卵囊:由大学寄生虫组保存的孢子化E. acervulina卵囊,用前经复壮。
溶液:饱和食盐水;2.5%重铬酸钾溶液。
仪器设备:贝克曼库尔特Avanti J26XP系列高效离心机;冷冻台式离心机,eppendorf centrifuge 5418;SORVALL LEGEND RT 离心机;上海润友科技有限公司;其林贝尔Kylinbell 旋涡混合器 VORTEX5;麦克马斯特虫卵计数器,血细胞计数板;电子显微镜(OLYMPUS)。
试剂:胃蛋白酶(猪胃粘膜),源叶生物;浓盐酸,南京化学试剂有限公司;纳米氧化锌分散液,上海麦克林生化科技有限公司。
实验方法
1.2.1 E. acervulina孢子化卵囊的扩增及感染方法
取出在4℃冰箱中保存于2.5%重铬酸钾溶液中的堆型艾美耳球虫(E. acervulina)孢子化卵囊10mL(约20×104个/mL),室温情况3000r/min速度离心10min。弃去上清液,用10mL蒸馏水使沉淀重悬,并且重复4次之前的步骤以除尽保存用的重铬酸钾溶液。将卵囊沉淀用10mL蒸馏水重悬,使用血细胞计数板计数每毫升孢子化卵囊数量,并将卵囊液稀释到5×104mL。
选择14日龄未被球虫感染海兰白20羽,每羽鸡经口感染5×104个/mL新鲜孢子化E. acervulina卵囊1mL,收集感染第49天的粪便。用10倍以上体积的水稀释粪便,稀释液分别经40目、100目金属筛各过滤1次,3000r/min速度离心10min,弃去上清液;用饱和食盐水重悬沉淀,2000r/min速度离心10min,收集离心杯表面漂浮的白色物质,即为球虫未孢子化卵囊。将收集的卵囊置于灭菌离心管中,加入4倍体积去离子水,充分洗涤,3000r/min速度离心10min,弃去上清液,所得沉淀即为球虫卵囊。将卵囊放入57倍体积的2.5%重铬酸钾溶液中,放置在28℃培养箱中通气培养2436h,直至通过镜检观察有90%以上的卵囊完成孢子化时,即可从培养箱中取出,停止培养。将培养所得孢子化卵囊置于10倍体积的重铬酸钾溶液中,置于4℃冰箱保存备用[4]。
1.2.2 实验动物及分组
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