猪圆环病毒病（porcine circovirus desease, PCVD）主要是由猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2, PCV2）引起的猪的多种疾病的总称，根据近些年以来的流行病学调查研究，PCV2b、PCV2d成为当前流行的主要基因型。PCV与多种病原混合感染生猪，为生猪养殖业的健康发展带来了巨大的挑战。本研究将鉴定为PCV2d阳性的病料组织研磨成混悬液，经0.22um滤膜过滤后接种PK15细胞，连续传代并收取每一代细胞病毒液，提取病毒DNA，经PCR检测、荧光定量PCR检测、病毒全基因组序列测定，初步获得了一株能够在PK15细胞上稳定增殖的PCV2d毒株，该分离株在细胞内增殖比较稳定，且病毒增殖整体呈上升趋势，后续还需继续传代和TCID50实验对其进行进一步的研究。本研究为深入研究PCV2d流行毒株的分子生物学特性及筛选疫苗优势毒株提供了理论依据。
目录
摘要3
关键词3
Abstract3
Key words3
引言3
1 材料与方法4
材料 4
1.1.1病料4
1.1.2 PK15细胞4
1.1.3 阳性对照4
1.1.4实验试剂4
1.1.5实验仪器4
1.1.6 PCV2特异性引物设计与合成4
1.2 方法5
1.2.1病料处理5
1.2.2 PK15细胞的传代培养5
1.2.3病毒的传代培养5
1.2.4病毒培养物PCR检测5
1.2.5 实时荧光定量PCR检测6
1.2.6 PCV2基因组全序列测定6
2 结果与分析7
2.1 PK15细胞培养结果7
2.2 病毒培养物PCR检测结果8
2.3 病毒的荧光定量PCR检测结果8
2.4 病毒全基因组序列测定结果10
3 讨论 11
致谢13
参考文献14
猪圆环病毒2d毒株的分离与鉴定

原文链接：http://www.jxszl.com/yxlw/dwyx/562269.html