生物药剂分类系统(BCS)是基于药物溶解性和渗透性而对药物进行分类的一种科学系统，其应用在药物的研发尤其是仿制过程中节约了大量的时间和资金，如果将其合理应用到兽药领域，将会大大推动我国兽药产业的发展。本研究以鸡常用的几种抗寄生虫药物为研究目标，通过建立MDCK-chAbcg2/Abcb1细胞模型和在鸡体肠灌流模型来测定渗透性，采用摇瓶法测定药物的溶解度，并且采用HPLC法测定药物的浓度，最终得到所选药物的溶解度和渗透性。最后我们参考FDA的规定结合鸡的生理特性确定了高溶解性和高渗透性的标准，并按照此标准将所选药物进行BCS分类。结果表明，盐酸左旋咪唑为Ⅰ类药物；吡喹酮、阿苯达唑、地克珠利为Ⅱ类药物；盐酸氨丙啉为Ⅲ类药物。
目录
摘要 2
引言
生物药剂学分类系统(Biopharmaceutics Classification System，BCS)是由Amidon 等于1995年首次提出的[1]，根据药物的溶解度和渗透性来对药物进行分类的一种科学体系，用来预测药物在体内的吸收及其影响因素，指导原研药和仿制药的开发。根据BCS理论，按照溶解性和渗透性，药物可以被分为四类，分别为第Ⅰ类: 高溶解度、高渗透性的药物; 第Ⅱ类：低溶解度、高渗透性药物；第Ⅲ类：高溶解度、低渗透性药物；第Ⅳ类：低溶解度、低渗透性药物[2，3]。目前FDA，EMEA 和WHO均提出关于BCS Ⅰ类药物口服速释制剂的生物豁免方案。该分类系统的应用在药物的研发、仿制中节约了大量的时间和资金，使得越来越多的研究人员和相关药品管理部门对其关注，成为药品管理中一个越来越重要的工具。
虽然人药BCS发展已经很完善，但由于人与动物之间的种间差异，想要把人药 BCS 直接外推运用到兽药行业是不太可行的[4]。而且由于不同动物生理结构差异，使得同种药物在种属间存在着差异，这也使得兽药的BCS分类不具备通用性。因此在开展兽药BCS研究时，必须考虑药物的种属间差异影响。在研究之初，我们先尝试着按动物的种类进行药物的BCS分类[5]。
本实验拟选取我国重要的养殖动物鸡，同时选取目前常用的5种适用于鸡的抗寄生虫药物，进行BCS分类。希望通过该研究可以有效地推动鸡仿制药的发展，同时为其它动物仿制药的豁免起到一个先导的作用。如果我们能够在兽药这一 *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: *351916072* 
领域合理应用上述BCS分类系统，那将会为我国兽药仿制药的研发节约大量的时间和资金，进而推动我国兽药行业的发展。
1 材料与方法
1.1材料
1.1.1细胞
MDCK细胞购自中国科学院上海生命科学研究院细胞资源中心，双表达鸡源BCRP/Pgp的MDCKchAbcg2/Abcb1细胞，为本实验室构建并保存。
1.1.2实验动物
6周龄白羽肉鸡，购自于江苏省南京市某养鸡场。
1.1.3药品与试剂
DMEM培养基（Solarbio），胎牛血清 （Solarbio），双抗（Solarbio），0.25%胰酶（Solarbio），DMSO（Solarbio），DHank’s平衡液（Solarbio），PBS缓冲液（Solarbio）以上试剂购于南京菲尔特公司；MTT（Macklin）购于南京寿德公司；乙腈（TEDIA，色谱纯）；三乙胺（Enox，分析纯）。CaCI2、NaCI、KCI、NaHCO3、葡萄糖、NaH2PO4、MgCl26H2O、盐酸、领苯二甲酸氢钾、磷酸二氢钾、硼酸、氯化钾均为实验室提供，乌拉坦、吡喹酮、盐酸左旋咪唑、盐酸氨丙啉原料药购自于扬州天和；地克珠利、阿苯达唑原料药购自于济州坤泰。
1.1.4仪器设备
倒置显微镜
日本奥林巴斯株式会社
生物安全柜
赛默飞世尔公司
二氧化碳培养箱
日本TOMY公司
高压蒸汽灭菌锅（SX700）
日本TOMY公司
高速冷冻离心机
德国sigma公司
数显恒温水浴锅
上海沪西分析仪器厂有限公司
恒流泵（HL2B）
上海沪西分析仪器厂有限公司
高效液相色谱仪（Thermo Ultimate 3000）
赛默飞世尔公司
紫外检测器
安捷伦公司
色谱柱（ZORBAX Eclipse XDBC18）
安捷伦公司
TranswellTM（3460）
美国康宁公司
十二孔板
美国康宁公司
96孔板
美国康宁公司
细胞培养皿（35 mm）
美国康宁公司
细胞计数板
美国康宁公司
酸度计
梅特勒托利多上海有限公司
电子天平
赛多利斯科学仪器北京有限公司
超低温冰箱
赛默飞世尔公司
液氮罐
赛默飞世尔公司
智能型恒温磁力水浴锅
宁波天恒
0.22 μm滤膜
南京菲尔特生物技术有限公司
1.1.5溶液配制
1.1.5.1完全培养液的配制
DMEM培养基+10%胎牛血清+1%双抗溶液。
即配制100 mL完全培养基：DMEM培养基89 mL+胎牛血清10 mL+双抗溶液1 mL（青链霉素混合液）。
1.1.5.2冻存液的配制
4 mL胎牛血清+5 mL DMEM培养基+ 1 mL DMSO，混匀分装，20 ℃冰箱保存备用。使用时1~1.5 mL可冻存1管细胞。
1.1.5.3 MTT试液的配制（5mg/mL）
将50 mg MTT 溶于 10 mL 灭菌三蒸水中，用0.22 μm滤膜过滤以除去溶液里的细菌后，放4℃ 避光保存即可。在配制和保存的过程中，容器最好用铝箔纸包住。
1.1.5.4 KR缓冲液的配制

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