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esco2调控猪卵母细胞减数分裂成熟的作用机理【字数:7382】

2024-02-25 12:00编辑: www.jxszl.com景先生毕设
在哺乳动物细胞中,染色体黏合素cohesin的乙酰转移酶Esco2通过乙酰化cohesin亚基Smc3来建立染色体黏合状态,确保后期染色体的精确分离。然而,我们之前已经证明,Esco2在小鼠卵母细胞减数分裂I中具有独特的底物和作用,以协调减数分裂的进展,但这些功能是否在物种间保守仍未确定。因此,我们使用猪卵母细胞作为模型来说明Esco2在卵母细胞减数分裂过程中发挥的功能是否保守。我们观察到Esco2在猪卵母细胞中分布在染色体上。通过siRNA显微注射敲低Esco2导致通过显示第一极体排除率和纺锤体组装检查点的失活从而加速减数分裂进程。值得注意的是,Esco2显示与组蛋白H4相结合,通过调控H4K16的乙酰化来维持动粒功能。总的来说,我们的数据显示Esco2在卵母细胞中发挥独特和保守的功能,不同于其在染色体黏合中的作用,以促进减数分裂进程。
目录
摘要3
关键词3
Abstract3
Key words3
引言(或绪论)3
1 材料与方法4
1.1 抗体和试剂 4
1.2 主要仪器和耗材 4
1.3 试剂的配置 5
1.3.1 IVM 培养液基础液制备5
1.3.2 IVM 培养液制备5
1.3.3透膜液6
1.3.4免疫荧光染色封闭液配制6
1.4 试验方法 6
1.4.1分离裸卵6
1.4.2体外成熟6
1.4.3敲低Esco2敲低基因6
1.4.4 cRNA构建体和体外转录6
1.4.5 免疫荧光和共聚焦显微镜7
1.4.6 免疫沉淀和免疫印记7
1.4.7 统计分析7
2 结果与分析7
2.1 猪卵母细胞中Esco2定位于染色体并在减数分裂进程中保持恒定7
2.2 Esco2的消耗加速减数分裂进程并在猪卵母细胞减数分裂过程中使SAC失活8
2.3 Esco2是猪卵母细胞中正确的纺锤体装配和染色体排列所必需的9
2.4 Esco2与组蛋白H4结合,是维持猪卵母细胞中H4K16乙酰化所必需的10 *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: *351916072

3 讨论 10
致谢11
参考文献12
Esco2调控猪卵母细胞减数分裂成熟的作用机理

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