为了研究日粮中不同非蛋白氮水平对湖羊睾丸发育的影响，将70只湖羊（3月龄，体重接近）分为5组:高蛋白组（豆粕组）、低蛋白组（豆粕组）、尿素1组（1%尿素）、尿素2组（2%尿素）、尿素3组（3%尿素）。每组7 个重复，每个重复2只羊。预饲7天，正试8周。试验结束后，采集血样，应用放射免疫方法检测血清睾酮浓度；采集睾丸分别测量睾丸长径、短径、周径以及重量，然后取睾丸组织放入多聚甲醛溶液中进行固定，并通过苏木素-伊红染色法观察睾丸组织形态。结果显示不同组之间睾丸的重量和睾丸指数差异均不显著（P>0.05），睾丸长径、短径和周径差异亦不显著（P>0.05）。显微镜观察结果显示，低蛋白组对睾丸发育损伤较大，高蛋白组与尿素3组的精子数相对较少。生精上皮厚度和内外径大小差异均不显著（P>0.05）。各组间血清睾酮浓度差异不显著（P>0.05）。这些结果表明，不同非蛋白氮水平对睾丸发育影响不大，但蛋白浓度过低会影响湖羊睾丸精子发育，为非蛋白氮应用于湖羊生产提供科学依据。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言（或绪论）1
1 材料与方法2
1.1试验时间及地点 2
1.2 仪器设备与试剂 2
1.2.1 仪器设备2
1.2.2 试验试剂2
1.3试验方法 2
1.3.1 试验设计2
1.3.2 日粮配方3
1.3.3 睾酮的测定3
1.3.4 固定包埋3
1.3.5 HE染色4
1.3.6 拍照测量4
1.4统计与分析4
2 结果与分析4
2. 1不同非蛋白氮水平对湖羊睾丸重和睾丸指数的影响 4
2. 2不同非蛋白氮水平对湖羊睾丸长径、短径和周径的影响4
2. 3不同非蛋白氮水平对湖羊睾丸组织形态的影响5
2. 4 不同非蛋白氮水平对湖羊睾丸曲精细管外径、内径和生精上皮厚度的影响7
2. 5不同非蛋白氮水平对湖羊血清睾酮的影响7
3 讨论 7
3. 1 不同非蛋白氮水平对反刍动物性 *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: ^351916072# 
腺发育的影响 7
3. 2 不同非蛋白氮水平对反刍动物精子发生的影响8
3. 3 不同非蛋白氮水平对反刍动物生殖激素的影响8
结论9
致谢9
参考文献9
日粮中不同非蛋白氮水平对湖羊睾丸发育的影响
引言
动物体内的含氮化合物除蛋白质外，还含有很多其他的含氮化合物。虽然这类化合物结构各不相同，功能各异，但都含有氮元素，因而统称为非蛋白氮（Nonprotein Nitrogen，NPN）。NPN并不能为动物提供能量，但可为瘤胃微生物提供合成蛋白质所需的氮源，以此节省饲料蛋白质。瘤胃微生物在脲酶作用下可将NPN分解成氨和二氧化碳。同时大量碳水化合物被分解为挥发性脂肪酸(VFA)和酮酸。随后氨和有效酮酸结合形成氨基酸，继而形成微生物蛋白[1]。奶牛食糜中59%蛋白质是微生物蛋白质[2]。反刍动物在低蛋白日粮条件下，可通过尿素再循环来节约氮的消耗，保证瘤胃内氨的浓度适宜，这利于微生物合成蛋白质。因此，非蛋白氮是蛋白质饲料直接有效的替代品。
非蛋白氮种类很多，然而能够作为牛羊补充氮源的并不多。目前对20多种可应用于反刍动物生产的NPN进行大量饲用试验，饲养价值较好的是尿素和双缩脲。而在当前畜牧生产过程中, 普遍采用尿素添加在反刍动物饲料中[34]。饲料中含有适宜的非蛋白氮，可降低饲料蛋白质在瘤胃内的降解，有利于优质蛋白直接进入真胃。将尿素配制成混合料并制成颗粒料时，应占混合料的1%~2%为宜，若含量超过3%，会影响饲料的适口性，甚至可能导致中毒。另外，80%瘤胃微生物能够将尿素等NPN为唯一氮源，26%的细菌离不开氨，50%的细菌可以将氨或氨基酸作为氮源，通过碳水化合物分解后，产生有机酸作为动物机体能源，在瘤胃中进行大量生长和繁殖，用于合成单细胞菌体蛋白。菌体蛋白具备很高的生物学价值，真胃和小肠吸收氨基酸总量的40%～70%由菌体蛋白分解而成，且这类氨基酸的组成和机体十分接近，易于动物机体消化吸收[5]。菌体蛋白再分解形成可吸收氨基酸，氨基酸再通过一系列转化合成机体所能使用的蛋白质。
蛋白质是生物功能的载体，是构成动物体几乎一切细胞和组织的重要成分。对于动物的繁殖活动，蛋白质是非常重要的参与者。许多生殖激素的本质就是蛋白质，如促卵泡素、抑制素和促黄体素等。因此，生物体内的蛋白质水平影响动物体内生殖激素的合成和释放。此外，蛋白质对于精子形成十分重要，是雄性动物精液的主要组成部分，对于维持雄性动物繁殖性能非常重要。
湖羊主要生活在我国太湖区域，是我国一级地方保护畜禽，具有许多优良性状如早熟、四季发情和繁殖力高，因而被广泛引入到全国各地。但目前关于非蛋白氮对湖羊生殖尤其是睾丸发育的研究还非常有限。本试验在前人研究的基础上，通过研究日粮中添加不同蛋白质水平的尿素对湖羊睾丸发育的影响，以期为非蛋白氮应用于湖羊生产实践提供科学依据。
1 材料与方法
1．1 试验时间及地点
试验时间为2018年9月至2019年5月，地点为大学。
1．2 仪器设备与试剂
1．2．1 仪器设备 石蜡切片机（德国徕卡公司）；烘片机（浙江省金华市科迪仪器设备有限公司）；虚拟显微镜（Nikon，日本）；烘箱（上海新苗医疗器械制造有限公司）；水浴锅（赛默飞，美国）。
1．2．2 试验试剂 从南京寿德器材有限公司购入试验所用相关试剂，包括乙醇、二甲苯、多聚甲醛、石蜡、苏木精、伊红、中性树脂、盖玻片和黏附性载玻片。
1．3 试验方法
1．3．1 试验设计
70只湖羊随机分为5组:高蛋白组（豆粕组）、低蛋白组（豆粕组）、尿素1组（1%尿素）、尿素2组（2%尿素）、尿素3组（3%尿素）。每组7个重复，每个重复2只羊。预饲期7天，正试期8周。试验结束后，采集血样，应用放射免疫方法检测血清睾酮浓度；采集睾丸分别测量睾丸长径、短径、周径以及重量，然后取睾丸组织放入多聚甲醛溶液中进行固定，并通过苏木素伊红染色法观察睾丸组织形态，并测量生精上皮厚度及内外径大小。由于尿素2组与高蛋白组蛋白水平相同，增重效果相当，因此本试验仅选取高蛋白组（豆粕组）、低蛋白组（豆粕组）、尿素1组（1%尿素）和尿素3组（3%尿素）进行采样。

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