为了鉴别出可以提高苏淮猪肌内脂肪（intramuscularfat，IMF)含量的分子标记，屠宰测定212.0 ± 0.5日龄、体重在59.16 ± 0.61 kg共132头苏淮猪的肌内脂肪含量，并分析早期报道的肌内脂肪含量相关的H-FABP基因rs1110770079位点和PHKG1基因rs697732005位点在苏淮猪群体的多态性及其与肌内脂肪含量的关联性。结果表明苏淮猪群体肌内脂肪含量为（2.01 ± 0.05）%，变异系数为30.90 %。其中，母猪肌内脂肪含量显著低于阉割公猪肌内脂肪含量（P = 0.030）。在H-FABP基因中，CC、CT和TT型基因型频率分别为0.250、0.318和0.432，C和T等位基因频率分别为0.409和0.591，不同基因型之间苏淮猪肌内脂肪含量差异并不显著；同样，在PHKG1基因中，CC、CT和TT型基因型频率分别为0.629、0.258和0.113，C和T等位基因频率分别为0.758和0.242，不同基因型之间苏淮猪肌内脂肪含量差异也不显著。因此，本研究未发现H-FABP上rs1110770079位点和PHKG1基因上rs697732005位点与苏淮猪的肌内脂肪性状相关，不能确定其是否可以作为提高苏淮猪肌内脂肪含量的分子标记。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1 材料与方法3
1.1 试验动物3
1.2 试验方法3
1.2.1 样品采集3
1.2.2 耳组织样DNA提取3
1.2.3 背最长肌中肌内脂肪提取3
1.2.4 DNA浓度与质量检测4
1.2.5 DNA浓度的稀释4
1.2.6 引物设计4
1.2.7 PCR扩增4
1.2.8 HFABP和PHKG1基因多态位点的分型4
1.2.9 数据整理4
2 结果与分析4
2.1苏淮猪肌内脂肪含量描述统计4
2.2 HFABP和PHKG1基因型多态性分析5
3 讨论 5
3.1 苏淮猪肌内脂肪含量变化趋势及其影响因素 *51今日免费论文网|www.jxszl.com +Q: ^351916072^ 
5
3.2 HFABP基因对苏淮猪肌内脂肪含量的影响6
3.3 PHKG1基因对苏淮猪肌内脂肪含量的影响6
4 结论 6
致谢6
参考文献6
苏淮猪肌内脂肪表型测定及其与HFABP和PHKG1基因的多态性关联性分析
引言
我国是世界上第一大生猪生产和消费的国家，猪肉是中国人民的主体肉食，约占肉类总消费的84 %左右。随着生活水平的提高，消费者对猪肉的品质有了更高的要求，在保证营养的基础上追求口感的享受。在猪肉肉质评定过程中，肌内脂肪（Intramuscular Fat，IMF）被视为一个重要的衡量指标。研究表明，肌内脂肪可以影响猪肉的嫩度、风味、多汁性等[1]，为了满足消费者的要求，想要有效的改善猪肉的品质，对猪肌内脂肪进行选育提高是一个很好的途径。有研究结果显示，肉用型猪的肌内脂肪含量一般可分为四个等级，理想值：3.0 %4.0 %，较理想值：2.0 % 2.9 %，尚可接受值：1.5 %2.0 %，较低值：< 1.5 %[2]。苏淮猪是以新淮猪为母本，大白猪为父本，通过杂交选育，横交固定，经7个世代选育形成的新品种[3]。苏淮猪具有耐粗饲、抗病力强、繁殖率高的特点，但其肌内脂肪偏低，并且变异系数较大，有可进一步选育提升的空间。不可否认，早期传统育种技术对家畜部分经济性状遗传改良起了重大作用，如瘦肉率、生长速度等。但对于肌内脂肪这类由多基因控制的复杂数量性状，活体测定难度大，屠宰测定费时费力，且生产世代间隔较长，传统育种技术选择难以快速对其选育提高。但利用分子标记法进行选育测定，不仅技术简单，而且检测速度快，节省人力和物力，因此，开发和利用分子标记来提高苏淮猪肌内脂肪具有重要的意义。
心肌型脂肪酸结合蛋白(heart fatty acid binding protein，HFABP)位于猪的6号染色体，是一种小细胞内蛋白质，在长链脂肪酸的吸收和代谢平衡中发挥关键作用，它的作用机制是在细胞内与脂肪酸结合，使细胞膜内外形成浓度差[4]。众多研究表明，HFABP基因与猪背膘厚和肌内脂肪含量息息相关。Gerbens等[5]发现了在HFABP基因中具有纯合单倍型aaddHH个体其肌内脂肪含量显著增高；曲亮等[6]利用PCRRFLP方法在苏淮猪群体中检测到了HFABP基因3个单核苷酸多态位点（single nucleotide polymorphism，SNP），并发现HFABP基因的这3个SNP都存在多态性，且Hinfi位点不同基因型的背膘厚和瘦肉率均存在显著差异；覃兆鲜等[7]在陆川猪群体研究中发现，在CDS区碱基序列235位由A突变为G，密码子所对应的氨基酸精氨酸也因为突变转变为甘氨酸，推测该位点可能影响陆川猪的肌内脂肪含量；庞卫军等[8]以大白猪、长白猪、杜洛克猪、内江猪、汉江黑猪、汉中白猪、荣昌猪、八眉猪和野猪作为试验对象，利用PCRRFLP方法检测了HFABP基因5’上游区和第二内含子区的遗传变异，结果显示，在上述猪种中，HinfⅠRFLP位点都存在多态性，MspⅠRFLP和HaeⅢRFLP位点上,荣昌猪、内江猪、汉江黑猪和八眉猪为单态，其余猪种为多态性，且提高“aaddHH”基因型频率可显著地提高IMF含量；张民扬等[9]在三元猪和圩猪的研究中发现，在猪肉品质方面，圩猪的肌内脂肪显著高于三元猪，并且，HFABP基因在圩猪肌肉和肝脏中mRNA的相对表达量都极显著高于三元猪，故而猜测，HFABP基因的mRNA的相对表达量可能是导致圩猪肌内脂肪含量较高的原因；2014年，Chen等[10]发现，HFABP基因Hinfi多态性位点在延安猪和DLY猪群体中，对IMF含量有显著影响，但是HFABP基因是否与苏淮猪肌内脂肪相关仍是未知。
磷酸化酶激酶γ1(phosphorylase kinase gamma1，PHKG1)基因位于猪的3号染色体，它的作用机制是分解糖原，维持血糖平衡和为机体肌肉的收缩提供能量[11]。糖酵解途径是影响系水力高低的关键因素之一，PHKG1基因是编码糖酵解途径中的关键酶，并且研究表明这个基因与多个肉质性状密切相关，它们可能通过糖酵解途径影响到系水力。而冯岗等[12]以北京黑猪为试验对象，在研究中发现肌内脂肪和滴水损失率呈显著的负相关，所以，在某种程度上，PHKG1可以作为影响肌内脂肪的候选基因；杨昊欣[13]三元猪群体研究中发现，PHKG1基因的表达与三元猪系水力水平呈显著的负相关；李龙云[14]在巴克夏猪和里岔黑猪群体的研究中发现，PHKG1基因多态性丰富，而且优势基因的基因频率较高，PHKG1基因对巴克夏和里岔黑猪的肌肉嫩度和背标厚的影响显著，但是PHKG1基因是否与苏淮猪肌内脂肪相关未知。

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