本试验旨在研讨白藜芦醇对LPS诱导小鼠肝脏损伤和氧化应激的保护作用。选取6周龄C57BL/6J雄性小鼠60只，随机分成4组，适应饲养两周后，分别进行如下处理饲喂基础日粮+腹腔注射PBS（CON）、基础日粮+腹腔注射LPS（LPS）、添加白藜芦醇100 mg/kg的基础日粮+腹腔注射LPS（LRL）、添加白藜芦醇500 mg/kg的基础日粮+腹腔注射LPS（LRH）组，每个组三个重复，每个重复五只，每48h注射一次LPS或PBS，实验期六周，末次给药24h后麻醉并处死小鼠，收集血液和肝脏样品并称重，测定血清氨基转移酶、肝脏抗氧化指标及肝脏相关基因mRNA表达量。结果如下腹腔注射LPS六周后，LPS组、LRL组和LRH组肝脏重量和相对肝脏重量明显高于CON组（P < 0.05），而LRH组小鼠肝脏重量和相对肝脏重量明显低于LPS组（P < 0.05）；与CON组相比，LPS组显示出肝细胞的严重溶解和空泡化，LRL组空泡化现象有所减轻，LRH组缓解程度更大。LPS注射后血清AST活性明显升高。与CON组相比，LPS组、LRL组和LRH组血清AST水平升高（P < 0.05）；与LPS组相比，LRL、LRH组血清AST活性降低（P < 0.05）。 与CON组相比，LPS组的ALT活性更高（P < 0.05）；与LPS组相比，LRH组的ALT活性更低（P < 0.05）。与CON组相比，LPS组的小鼠血清及肝脏组织中MDA含量明显升高（P < 0.05），SOD、MPO、GSH和GSH-Px活性明显下降（P < 0.05）。与LPS组相比，LRH组MDA含量明显下降（P < 0.05），SOD、MPO、GSH和GSH-Px活性明显升高（P < 0.05）。与CON组相比，LPS组小鼠肝脏组织中BAX和Caspase3 mRNA的相对表达量明显上升（P < 0.05）。与LPS组相比，LRH组BAX和Caspase3 mRNA的相对表达量明显上升（P < 0.05）。综上所述，日粮中添加白藜芦醇对LPS腹腔注射小鼠体内血清氨基转移酶活性有一定影响，能够提高血清和肝脏抗氧化能力，缓解肝脏损伤和氧化应激。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words2
引言2
1 材料 *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: ￥351916072$ 
与方法2
试验材料 2
1.1.1 试验动物与分组 2
1.1.2 试验日粮2
1.1.3 试验试剂3
1.1.4 主要仪器设备3
1.2 试验方法3
1.2.1 饲养管理3
1.2.2 腹腔注射3
1.2.3 样品采集3
1.2.4 肝脏结构形态切片收集3
1.2.5 血清及肝脏相关指标的测定3
1.2.5.1 血清氨基转移酶的测定3
1.2.5.2 血清和肝脏组织中抗氧化指标的测定4
1.2.6 肝脏组织RNA的提取和相关基因mRNA表达量的测定 4
1.3 数据处理4
2 结果与分析4
2.1 白藜芦醇对LPS注射小鼠肝脏及其结构形态的影响4
2.2 小鼠血清分离氨基转移酶（AST）和丙氨酸氨基转移酶（ALT）的活性5
2.3 小鼠肝脏指标变化6
2.4 小鼠肝脏基因表达量6
3 讨论7
3.1 白藜芦醇对LPS诱导小鼠肝脏病变情况及重量、结构形态的影响7
3.2 白藜芦醇对LPS诱导小鼠血清氨基转移酶活性的影响8
3.3 白藜芦醇对LPS诱导小鼠肝脏抗氧化酶活性及mRNA相对表达量的影响8
4 总结9
致谢9
参考文献9白藜芦醇对LPS诱导小鼠肝脏损伤和氧化应激的保护作用
引言
引言
白藜芦醇属于非黄酮类多酚化合物，可从花生、虎杖、葡萄、桑椹等植物中提取出来。现研究表明，白藜芦醇有利于人类和动物健康，它具有多种重要作用，如预防心脏和肝脏损伤、提升免疫系统活性、抗炎、抗突变、抗氧化和抗自由基作用，在人类医学以及保健品行列扮演着重要的角色[18]。
目前白藜芦醇在畜禽方面的研究及应用十分缺乏。此外，白藜芦醇预防肝脏损伤，减少氧化应激的机理尚未清楚。本试验利用LPS建立慢性免疫应激动物模型,探究白藜芦醇的保肝作用[9]，由于小鼠腹腔注射是异样毒性检查的主要措施之一，我们采取对小鼠腹腔注射LPS及喂食不同剂量白藜芦醇的试验方式，从氧化指标活性、mRNA表达量等角度探讨其改善肝脏损伤和氧化应激的保护机制，主要内容包括：分析白藜芦醇对小鼠肝脏病变情况及重量变化、肝脏结构形态的影响；分析白藜芦醇对小鼠血清氨基转移酶（AST）和丙氨酸氨基转移酶（ALT）活性的影响；分析白藜芦醇对小鼠肝脏免疫性能的影响，包括还原型谷胱甘肽（GSH）、氧化型谷胱甘肽（GSSG）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSHPX）、髓过氧化物酶（MPO）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）；分析白藜芦醇对小鼠肝脏基因表达量的影响，包括超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSHPX）。为此丰富白藜芦醇在人类医学和畜牧生产中的应用，提供科学理论依据。
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.1.1 试验动物与分组
本试验所有程序均按照实验动物福利伦理审查指南进行，并经过了大学机构动物保护和使用委员会（NJAUCAST2015095）的批准。从扬州实验动物研究所（SCXK(Su)20120004）购买60只6周龄C57BL/6J雄性小鼠，适应两周后，将所有小鼠分成四组，不同组别饲喂不同日粮：
试验I组为正常对照组（Control Group, Con），方式为重复注射PBS，饲喂对照饮食；试验Ⅱ组为LPS组（LPS Group），方式为重复注射LPS，饲喂对照饮食；试验Ⅲ组为LRL组（LRL Group），方式为重复注射LPS，并饲喂白藜芦醇100 mg/kg来补充饮食；试验Ⅳ组为LRH组（LRH Group），方式为反复注射LPS，并饲喂白藜芦醇500 mg/kg来补充饮食。本研究中每个组有三个重复，每个重复五只小鼠。正式试验开始第二天，CON组小鼠需腹腔注射500 ug/kg体重的PBS，LPS、LRL、LRH组小鼠需腹腔注射500 ug/kg体重的LPS，之后每两天注射一次PBS或LPS，注射时长为6周。在第一次注射LPS或PBS前对小鼠进行称重，之后每周末称重一次。每两天记录各组小鼠的采食量，并观察其生长状况。第8周处死小鼠后采血，收集肝脏样品并称重。
1.1.2 试验日粮
本试验一切日粮购自南通特洛菲饲料科技有限公司，日粮配比可参考AIN93标准[10]。
1.1.3 试验试剂
本研究中使用的白藜芦醇（V9003865G, 纯度≧98％）由美国SigmaAldrich公司提供。
LPS注射液的配置：先用无菌双蒸水配制PBS溶液，然后将购好的LPS溶于无菌PBS溶液内制成1 mg/ml的溶液，在4℃下保存备用。
使用试剂如下：10%水合氯醛麻醉；4%多聚甲醛固定；二甲苯；乙醇；苏木精和曙红；酶联免疫吸附测定（ELISA）试剂盒（上海易利生物技术有限公司）；TRIzol试剂盒（宝日医takara生物技术有限公司，中国辽宁大连）；抗氧化指标试剂盒（南京建成生物工程研究所，江苏南京）；高灵敏性染料法定量PCR检测试剂盒（takara生物技术有限公司，中国辽宁大连）；逆转录试剂盒（takara生物技术有限公司，中国辽宁大连）。

原文链接：http://www.jxszl.com/yxlw/dwyx/562419.html