本试验旨在研究白藜芦醇（RES）对热应激（HS）大鼠空肠和肝脏谷胱甘肽氧化还原代谢的调节作用。选择8周龄雄性SD大鼠24只，随机分为3个处理组，每组8只，分别为对照(CON)组（基础日粮）、HS组（基础日粮+HS）和HS+RES组（基础日粮+ 100mg/kg RES + HS）。HS组和HS+RES组大鼠每天置于40 ℃环境下热处理2 h建立热应激模型，热应激前口服0.5 %羧甲基纤维素钠，连续3天。对照组大鼠口服等量的0.5 %羧甲基纤维素钠。结果表明与CON组相比，HS组大鼠肝脏GST活性显著增强（P＜0.05），GSH活性显著降低（P＜0.05），并且GSH-PX和γ-GCLM mRNA表达量显著降低（P＜0.05）。日粮中添加100 mg/kg RES后，与HS组相比，HS+RES组大鼠肝脏GSH活性显著增强（P＜0.05），GR、GSH-PX、γ-GCLC和γ-GCLM mRNA表达量显著增加（P＜0.05）。由此可见，HS大鼠肝脏的谷胱甘肽氧化还原代谢发生紊乱。RES有改善HS大鼠肝脏谷胱甘肽氧化还原代谢紊乱的潜力。
目录
摘要3
关键词 3
Abstract3
Key words3
引言3
1材料与方法4
1.1试验材料与仪器4
1.2试验设计 4
1.3饲养管理4
1.4样品采集5
1.5测量指标及方法5
1.6数据统计分析5
2结果与分析6
2.1 RES对HS大鼠空肠谷胱甘肽氧化还原代谢的影响6
2.2 RES对HS大鼠肝脏谷胱甘肽氧化还原代谢的影响6
2.3 RES对HS大鼠空肠谷胱甘肽氧化还原代谢相关基因mRNA相对表达量的影响7
2.4 RES对HS大鼠肝脏谷胱甘肽氧化还原代谢相关基因mRNA相对表达量的影响7
3讨论 7
3.1 RES对HS大鼠空肠和肝脏谷胱甘肽氧化还原代谢的影响7
3.2 RES对HS大鼠空肠和肝脏谷胱甘肽氧化还原代谢相关基因表达量的影响8
致谢9
参考文献9
白藜芦醇对热应激大鼠空肠和肝脏 *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: #351916072# 
谷胱甘肽氧化还原代谢的影响
引言
热应激（heat stress，HS）是指机体在过高的环境温度为应激源刺激下所表现出来的一系列非特性反应。在现代畜牧高密度、集约化生产中时常会遇到各种应激，其中热应激所造成的危害最为严重。大量研究表明，热应激会破坏机体氧化－抗氧化平衡，诱导机体产生氧化应激，使机体出现氧化损伤[12]。钟光[3]等以黄羽肉鸡为研究对象发现，热应激能够降低肝脏中过氧化氢酶(Catalase，CAT)、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase，SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase，GSHPX)活性，破坏机体的氧化还原平衡。此外，徐霄龙[4]等研究还发现，热应激导致大鼠小肠上皮细胞内的活性氧（Reactive oxygen species，ROS）含量显著升高，细胞内的SOD、GSHPX活性下降。这些研究初步表明，热应激会导致谷胱甘肽氧化还原代谢发生紊乱，引起动物机体发生氧化损伤，影响动物的生长发育和生产性能。热应激对动物机体组织的损伤主要通过氧化应激、炎症反应等途径造成细胞损伤和细胞凋亡。谷胱甘肽是由γ谷氨酸、半胱氨酸、甘氨酸组成的天然生物活性肽，是生物机体内重要的生物活性物质。谷胱甘肽分为还原型和氧化型两种，能参与机体自由基的清除、免疫应答的激活、毒素的螯合、细胞完整性的保护和部分物质的吸收等多方面的生理活动，在临床医学和营养学上已有大量的研究[5]。维持机体谷胱甘肽氧化还原代谢平衡是机体抗氧化系统正常运行的保障。冯建[6]等人研究发现，适宜浓度的槲皮素能够提高谷胱甘肽—S转移酶（glutathioneS transferase，GST）活性,并能通过提高谷氨酰半胱氨酸连接酶（Glutamine cysteine ligase，γGCL）活性促进大鼠肝细胞还原型谷胱甘肽（GSH）生成，从而提高谷胱甘肽抗氧化系统的抗氧化能力。因此，寻找有效营养调控手段来缓解热应激引起的谷胱甘肽氧化还原代谢紊乱问题已成为当前研究热点之一。
白藜芦醇（resveratrol, RES）是一种广泛存在于花生、红葡萄等植物果实中的多酚类化合物，具有抗氧化、抗炎症、抗心血管疾病、抗肿瘤和调节免疫等重要生物活性[78]。国内对家禽饲粮中添加白藜芦醇的作用效果的研究处于初步探索阶段，而国外的相关报道较多，且取得了良好的效果。Mullins等[9]研究发现，白黎芦醇可提高背最长肌总抗氧化能力、GSHPX活性及其mRNA水平，有效提升育肥猪的抗氧化能力。此外，Yen等[10]研究表明，白藜芦醇在浓度为10100 μmol/L时能通过增加机体还原型谷胱甘肽（GSH）的含量减少过氧化氢造成的氧化损伤。以上结果均说明白藜芦醇有显著的抗氧化、抗自由基、保障动物健康的功能。
目前，有关白藜芦醇对由热应激导致的谷胱甘肽氧化还原代谢紊乱方面的影响研究甚少。因此，本试验拟通过给热应激大鼠灌服白藜芦醇，来探讨白藜芦醇对热应激大鼠空肠和肝脏谷胱甘肽氧化还原代谢和关键基因表达的影响，为进一步促进白藜芦醇在畜禽养殖生产上的应用提供试验依据。
1 材料与方法
1．1 试验材料与仪器
试验所用RES购自梯希爱（上海）化成工业发展有限公司；谷草转氨酶（Aspartate aminotransferase，AST）试剂盒、谷丙转氨酶（Alanine aminotransferase，ALT）试剂盒、谷胱甘肽过氧化物酶（GPX）试剂盒、谷胱甘肽还原酶（Glutathione reductase，GR）试剂盒、谷胱甘肽—S转移酶（GST）试剂盒、谷氨酸半胱氨酸合成酶（Glutamic acid cysteine synthetase，γGCS）试剂盒、谷氨酰半胱氨酸连接酶（γGCL）试剂盒、还原型谷胱甘肽（GSH）试剂盒、氧化型谷胱甘肽（GSSG）试剂盒购自南京建成生物技术研究所；TaKaRa反转录试剂盒（TaKaRa，大连，中国），灭菌超纯水；主要仪器：QuantStudio 5 实时荧光定量PCR仪（美国Thermo Fisher Scientific公司）；5804R型台式高速冷冻离心机（德国Eppendorf公司）；BioGen Series PRO 200匀浆机（美国PRO Scientific公司）；Thermo Nano Drop 2000 超微量可见光分光光度计（美国Thermo Fisher Scientific公司）。
1．2 试验设计
选择体重接近的8周龄雄性SD大鼠24只，随机分为3个处理组，每组8只，分别为：对照（CON）组（基础日粮）、HS组（基础日粮+HS）和HS+RES组（基础日粮+ 100mg/kg RES +HS）。HS组和RES组大鼠每天置于40℃热处理2h建立热应激模型，热应激前口服0.5%羧甲基纤维素钠，连续3天。对照组大鼠口服等量的0.5%羧甲基纤维素钠。
1．3 饲养管理

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