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白藜芦醇对高脂日粮小鼠肝脏抗氧化功能的影响【字数:7831】

2024-02-25 12:04编辑: www.jxszl.com景先生毕设
本试验旨在研究白藜芦醇对高脂日粮小鼠肝脏抗氧化功能的影响。本实验选择3周龄的64只体质量相近、精神状态良好的雄性小鼠,并把64只小鼠随机分成4组对照组(C),饲喂普通日粮,其中所含的脂肪量是10%;高脂日粮组(HFD),饲喂高脂日粮,其中所含的脂肪量是60%;白藜芦醇组(Res),饲喂普通日粮+0.04%白藜芦醇;高脂日粮+白藜芦醇组(HFD+Res),饲喂高脂日粮+0.04%白藜芦醇。每组有8个重复,每个重复1只。分别在第12和15周龄时将小鼠宰杀取样。结果显示(1)与对照组相比,高脂组T-SOD活性显著降低(P<0.05);GPX1的mRNA表达量明显降低(P<0.05);Hsp90 mRNA的表达量明显升高(P<0.05)。(2)与高脂组相比, 高脂日粮+白藜芦醇组的MDA含量显著降低(P<0.05),GSH-PX活性显著升高(P<0.05);GPX1的mRNA表达量显著升高(P<0.05);Hsp90 mRNA的表达量显著降低(P<0.05)。结论: 高脂日粮可以使小鼠肝脏产生一定的损伤和氧化应激,添加适量白藜芦醇可以提高小鼠肝脏清除自由基的能力,增加了肝脏的抗氧化能力,减缓了由高脂日粮诱导的小鼠肝脏产生的氧化应激。
目录
摘要.1
关键词.1
Abstract1
Key words1
引言2
1材料与方法2
1.1材料与仪器2
1.2试验设计3
1.3测定指标及方法3
1.3.1抗氧化指标测定3
1.3.2抗氧化基因表达测定及热休克蛋白表达测定3
1.4数据统计与分析4
2结果与分析.4
2.1白藜芦醇对小鼠肝脏抗氧化能力指标的影响4
2.2白藜芦醇对于小鼠肝脏抗氧化相关基因表达的影响4
2.3白藜芦醇对小鼠肝脏热休克蛋白基因表达的影响5
3讨论5
3.1白藜芦醇对小鼠肝脏抗氧化指标的影响5
3.2白藜芦醇对小鼠肝脏抗氧化相关基因表达的影响6
3.3白藜芦醇对小鼠肝脏热休克蛋白基因表达的影响6
4结论7
致谢7
参考文献7
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/> 白藜芦醇对高脂日粮小鼠肝脏抗氧化功能的影响
引言
引言
白藜芦醇(Resveratrol,RES)是一种多酚类化合物,主要可以从花生、桑椹、葡萄、虎杖等植物中被人们提取出来,可以作为一种天然的抗氧化剂,具有抗衰老、抗肿瘤、抗癌、预防治疗心血管疾病、抗氧化等生物学作用,同时对肝脏亦有保护性作用。最近几年,白藜芦醇在保健品、食品、医药、植物生理等范畴获得了国内外广泛而深入的研究。
氧化应激[1]是指当机体受到各种有害刺激时(例如长期高脂饮食),机体内具有氧化活性的物质过度产生,超出机体本身能清除此类氧化活性物质的能力,从而促使了机体内的活性氧自由基(reactive oxygen, ROS)含量升高,氧化速度超出了机体的清除能力,氧化系统和抗氧化系统之间失去平衡,并且和某些重要物质及信号分子等互相作用从而引起一系列不良病理反应的过程。ROS是诱导机体产生氧化应激状态的主要原因,其中包括了超氧阴离子(.O2)、过氧化氢(H2O2)等。机体内含有两种抗氧化系统,一种是酶抗氧化系统,其中包括了过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD) 、谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx)等抗氧化酶;另一种是非酶抗氧化系统,其中主要是麦角硫因(EGT)、胡萝卜素、维生素C、E、α硫辛酸等物质。
Hung LM等[2]的研究显示白藜芦醇具有较强的抗自由基能力,拥有比维生素C、E更强的抗氧化能力,并且能够捕捉并清除活性氧自由基(ROS),从而能够保护机体内的细胞和组织免于遭受ROS的侵害。杨兰泽等[3]在以D半乳糖诱导小鼠衰老的实验中发现,白藜芦醇可以通过清除活性氧自由基(ROS)和抗脂质过氧化来发挥抗衰老作用。任亚浩等[4]在使用不同剂量的白藜芦醇对D半乳糖诱导的小鼠进行干预时发现,白藜芦醇能降低氧化应激和增加血清Hcy水平,并具有一定的抗衰老作用。朱立贤等[5]在研究中发现,高剂量的白藜芦醇可以明显增加患有高脂血症的大鼠的肝脂酶活性和脂蛋白脂酶活性,明显降低了高脂血症大鼠的肝脏脂质代谢水平。Liu等[6]的研究发现,小鼠经过白藜芦醇处理后其大脑中的超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx)活性显著增加,脂质过氧化程度显著降低。目前有关于在畜禽生产中使用白藜芦醇的研究报道主要集中在动物体内的脂质代谢方面[7],然而有关于白藜芦醇对高脂日粮小鼠肝脏抗氧化性的影响的研究鲜有报道。本次试验选取了SPF级三周龄的雄性小鼠,随机分成4组后分别饲喂普通日粮、普通日粮+0.04%白藜芦醇、高脂日粮、高脂日粮+0.04%白藜芦醇,通过高脂日粮诱导小鼠肝脏产生氧化应激,饲养12周后解剖取样,测定肝脏相关抗氧化酶活性、抗氧化基因的表达,以及热应激蛋白Hsp70、Hsp90的表达,分析并且讨论了白藜芦醇对高脂日粮小鼠肝脏抗氧化功能的影响。
1 材料与方法
1.1 材料与仪器
SPF级三周龄的C57BL/6J雄性小鼠,共64只,购自扬州试验动物研究所。
白藜芦醇(纯度大于98%),购自美国Sigma公司。
抗氧化指标试剂盒,均由南京建成生物工程研究所提供。
细胞/组织中总RNA提取试剂(Trizol 法)、Takara Prime Script® RT reagent Kit反转录试剂盒和ChamQ SYBR qPCR Master Mix试剂盒均由日本TakaRa生物科技股份有限公司提供。所用到的PCR引物均由上海英维捷基贸易有限公司提供。
高脂日粮TP2330055B,对照日粮TP2330055BC,高脂日粮TP2330055M,对照日粮TP2330055MC ,都采购自南通特洛菲饲料科技有限公司。
分光光度计、恒温水浴箱、台式离心机、漩涡混匀器、微量移液器、电动匀浆机、RealtimePCR仪。
1.2 试验设计
本实验选择3周龄的64只体质量相近、精神状态良好的雄性小鼠,并随机将64只小鼠分成4组:对照组(C),饲喂普通日粮,其中所含的脂肪量是10%;高脂日粮组(HFD),饲喂高脂日粮,其中所含的脂肪量是60%;白藜芦醇组(Res),饲喂普通日粮+0.04%白藜芦醇;高脂日粮+白藜芦醇组(HFD+Res),饲喂高脂日粮+0.04%白藜芦醇。每组有8个重复,每个重复1只。所有小鼠在同一饲养管理条件下饲养,确保小鼠饲养期间内没有精神异常现象,没有摄食异常现象,也没有其它疾病发生。

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