益生菌和植物提取物作为抗生素的绿色替代品在畜牧业生产中越来越普遍的使用。本实验旨在通过体外培养嗜酸乳杆菌,比较其固液发酵体系的产物,以及研究不同浓度的植物提取物对益生菌体外增殖效果的影响，为发酵饲料的生产和植物提取物与益生菌的联合应用提供试验依据。试验利用固态发酵法和液态发酵法来比较不同发酵体系产生的乳酸，VFA，PH值及CFU的差异；用吸光光度法、平板计数法筛选嗜酸乳杆菌，将筛选出的嗜酸乳杆菌与植物提取物共培养。分析实验结果表明，固态发酵体系中，三株菌各有优势；液态发酵体系中，G菌和H菌优势作用明显；且不同浓度的植物提取物的增菌效果不同，当添加量2‰时对嗜酸乳杆菌生长的促进作用最显著。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言（或绪论）1
实验一 嗜酸乳杆菌的固态发酵与液态发酵4
1 材料与方法4
1.2实验方法 5
1.3数据处理5
2结果与分析5
2.1固态发酵体系产物的变化5
2.1.1固态发酵体系PH变化5
2.1.2固态发酵体系菌落计数结果5 2.1.3固态发酵体系乳酸含量6
2.1.4固态发酵体系VFA含量6
2.2液态发酵体系产物的变化6
2.2.1液态发酵体系PH变化6
2.2.2 液态发酵体系菌落计数结果 6
2.2.3液态发酵体系乳酸含量7
2.2.4液态发酵体系VFA含量7
实验二 不同浓度的复合提取物对嗜酸乳杆菌生长的影响7
1 材料与方法7
1.1实验材料 7
1.2实验方法 7
1.2.1 嗜酸乳杆菌的筛选7
1.2.2物提取物与嗜酸乳杆菌共培养7
1.3测定指标7
1.4数据处理8
2结果与分析8
3讨论9
3.1 嗜酸乳杆菌固液发酵体系的比较 9
3.2植物提取物对嗜酸乳杆菌生长的影响 10
致谢11
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三株不同来源的嗜酸乳杆菌发酵体系的比较及其与植物提取物的协同作用
引言
引言
自二十世纪中叶发现了抗生素的治病抗病及提高动物生产性能的功效以来，动物饲粮中添加抗生素作为生长促进剂得到广泛应用，极大的促进了畜产品的集约化生产。然而随着时代的发展,滥用抗生素的危害越来越凸显。欧盟在2006年颁布了禁止在动物饲料中使用抗生素的法令，目前，动物饲料中不得添加抗生素已经成为社会各界关注的焦点。因此急需能够代替抗生素功能又符合安全、可持续发展理念的替代品来保障畜牧业生产的效益，科学家们开始将科研方向转为植物提取物和益生菌的研究。植物提取物作为一种抗生素的绿色替代品在畜禽饲料中得到越来越广泛的应用其，具备安全性、高效性、无抗残留、不产生抗药性等优势，可大大减少滥用抗生素带来的危害。
有研究显示，在畜禽饲料中添加植物提取物有抗氧化，增强免疫力，抗菌、抗病毒，提高饲料转化效率，增强机体抗应激能力，提高生产性能等多种优势[1]，某些植物提取物应用于反刍动物饲粮中有助于减少瘤胃产生的甲烷含量，提高饲料养分的吸收利用效率[2]。而益生菌等微生态制剂添加于畜禽饲粮中能够调节肠道 PH 值，产生对动物生长有益的有机酸、小肽和必需的维生素；抑制有害微生物的增殖，减少有毒有害代谢产物，提高机体免疫力，促进动物肠道发育和动物健康，提高动物生产性能等多种生理功能[3]。而益生菌发酵饲料具备益生菌与发酵饲料的所有优势，因此益生菌发酵饲料技术逐渐发展起来。益生菌的益生作用很大程度上取决于其代谢产物。随着益生菌的增殖，发酵饲料中产生微生物菌体蛋白、小肽类氨基酸、各种维生素、抑菌因子等生物活性物质，能够调节起到调节动物肠道微生物区系平衡，抑制肠道在中有害菌群的繁殖，预防肠道疾病的发生；发酵后的饲料的PH下降，弱酸性环境能有效控制一些病原微生物的繁衍增殖；饲料经微生物发酵后，其中不易被动物消化道所消化吸收的营养物质变得容易消解，此外还产生醇、醛以及多种活性酶，饲料带有芳香味，饲料的适口性提高，刺激动物食欲，增加采食量，促进机体生长[48]；同时益生菌通过抑制动物肠道内有害微生物的生长，减少含氨胺类有害物质及硫化氢的产生和排放，间接的提高饲料粗蛋白的转化率，利于保护环境，减少大气污染[9]。秸秆、牧草等粗纤维饲粮经益生菌发酵后营养物质易消化，饲料转化率提高，能减少粮食饲料的使用量，饲养成本降低；益生菌的益生作用，还可降低疾病发生率，减少饲用抗生素的添加，提高畜产品质量，适于现代化畜牧业生产。
随着我国健康养殖理念的发展，开发研究益于保护生态环境的饲料生产技术显得尤为重要，而益生菌发酵饲料技术成为适应当前发展趋势的主流。我国国民经济的日益提高，人们对优质安全的畜禽产品的需求也越来越高，更多的关注到食品的健康与安全性以及是否污染环境，对绿色无公害等优质畜牧产品的需求量越来越多，因此在动物生态有机养殖生产中益生菌发酵饲料将发挥越来越重要的作用。二者在对促进动物机体健康，改善机体状态的作用已在临床上得到广泛验证和应用，但目前研究多是益生菌或植物提取物单独应用于对仔猪腹泻的防治效果，而鲜有对其二者联合作用效果的报道；此外研究人员对于微生物发酵饲料的研究并不是很全面，为了更准确的控制发酵时间，在日后的研究中应关注对发酵时所使用的的菌种的特点、使用量、存活时间的研究。嗜酸乳杆菌在人体和动物肠道发挥着重要作用，其在体内可发酵释放乳酸和乙酸[10]，降低肠道PH值，抑制肠道不良微生物的增殖，调整肠道菌群平衡，调节胃肠功能，促进维生素D和钙的吸收，提高铁、磷的利用率；还能分泌抗生物素类物质如嗜酸乳菌素、嗜酸杆菌素、乳酸菌素等，对肠道致病菌产生的拮抗作用，增强动物抵抗疾病的能力，乳酸具有调节PH值、抑制有害菌的生长、延长饲料及动物产品的保质期等优点[1113]，因此本实验选取嗜酸乳杆菌为代表，通过比较用嗜酸乳杆菌进行饲料的固态、液态发酵体系的产物，以及研究不同浓度的植物提取物对益生菌如乳酸杆菌体外增殖效果的影响，以及为植物提取物和益生菌的协同作为饲料添加剂应用于实际生产提供试验依据，同时为发酵饲料的规模生产提供技术指导。

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