为探讨壳聚糖纳米银水凝胶体外抑菌性能和对犬感染创的治疗效果。选用外科感染常见的绿脓杆菌和金黄色葡萄球菌进行抑菌试验。12只中华田园犬随机分为阴性对照组、阳性对照组（磺胺嘧啶锌软膏组）、低pH凝胶组（pH=5.5,低pH值壳聚糖纳米银水凝胶组）、高pH凝胶组（pH=6.5,高pH值壳聚糖纳米银水凝胶组），每组3只，造24个创口，建立感染创模型。连续给药14 d，于用药后第3、7、14 d观察创面，记录肉芽形成及完全愈合时间，计算创口体积愈合率、面积愈合率，HE染色和Masson染色观察组织形态学变化。结果表明，抑菌试验中壳聚糖纳米银抑菌活性优于纯壳聚糖且显著随pH减小而增强（P＜0.01）。临床试验中低pH凝胶组较其他三组最早出现肉芽组织，高pH凝胶组较其他三组最早出现上皮化，凝胶组伤口愈合和组织再上皮化时间小于对照组。壳聚糖纳米银水凝胶能抑菌消炎，加速成纤维细胞及胶原形成，促进伤口的愈合。
目录
摘要3
关键词3
Abstract3
Key words3
引言3
1 材料与方法4
1.1 试验动物及分组4
1.2 仪器与设备4
1.3 试剂与菌种4
1.4 细菌的培养与制备4
1.4.1 细菌培养与鉴定4
1.4.2 抑菌试验4
1.4.3 细菌浓度测定及制备4
1.5 犬感染创模型的制备5
1.6 治疗及样品的采集5
1.6.1 创面处理5
1.6.2 样品采集及预处理5
1.7 创面愈合观察指标5
1.7.1 创面肉眼观察5
1.7.2 创面肉芽形成及完全愈合时间5
1.7.3 创口体积愈合率5
1.7.4 创面面积愈合率5
1.8 组织学观察5
1.9 数据分析5
2 结果与分析5
2.1 抑菌试验结果5
2.2 创面愈合观察结果7
2.2.1 创面肉眼观察7
2.2.2 创面肉芽形成及完全愈合时间8 *51今日免费论文网|www.jxszl.com +Q: *351916072* 

2.2.3 创面体积愈合率8
2.2.4 创面面积愈合率9
2.3 组织学观察结果10
2.3.1 组织HE染色结果10
2.3.2 组织Masson染色结果11
3 讨论12
致谢13
参考文献13
壳聚糖纳米银水凝胶对犬感染创的治疗效果
引言
在门诊病例中，打斗、车祸及坠落等原因造成犬的创伤时有发生，外伤和皮肤病在外科病当中比例上升，此类临床病例在就诊时往往已演变为感染创，创伤的愈合是一个复杂而动态的过程，主要包括了急性炎症、细胞增殖、肉芽组织增生和瘢痕的形成以及表皮及其他组织的再生几个阶段，如果创伤不经及时治疗或治疗不当而延期不愈，不但会影响宠物美观、加重宠物主人经济负担，还会增加动物继发其他疾病的风险，加大治疗难度。临床上在治疗感染创时，除全身应用抗生素、清创处理外，局部应用药物也是常见治疗方法之一，促进伤口愈合、控制感染的药物目前被广泛研究，本文讨论的壳聚糖纳米银也是目前的热门研究药物之一。
众所周知，银具有杀灭细菌的作用，其化合物被用于治疗烧伤、伤口感染等病例，研究发现含纳米银的壳聚糖抗菌活性明显高于纯壳聚糖的抗菌活性，能够促进伤口愈合、控制感染并降低银被吸收的风险，降低毒副作用[12]。有报道在一项人的临床研究中发现，壳聚糖纳米银伤口敷料不仅能够减少伤口中的细菌数量，还能通过减少炎性反应来促进慢性小腿溃疡的愈合[3]。壳聚糖对复杂伤口的愈合具有许多积极作用，研究表明，壳聚糖能逐渐解聚成N乙酰d氨基葡萄糖，促使成纤维细胞的增殖，胶原的沉积并提高天然透明质酸合成水平[4]，另外壳聚糖能通过激活血小板从而起到止血作用[5]，并且在使用壳聚糖处理后的伤口中发现，炎性细胞浸润增加以及促进伤口愈合的毛细血管生成增多[6]，壳聚糖还能加速Ⅲ型胶原的产生，促进犬伤口中肉芽组织的形成[7]。
本试验对壳聚糖和纳米银在犬感染创上的联合使用进行探究，采用抑菌圈法进行抑菌试验探究壳聚糖纳米银的抑菌性能，并应用中华田园犬的背部皮肤圆形感染创模型，研究壳聚糖纳米银水凝胶对犬感染创的治疗效果，进行创面愈合观察及组织学观察，为动物临床上感染创的治疗提供参考。
1 材料与方法
1．1 试验动物及分组
12只中华田园犬，体重为810 kg，预饲1周，随后将试验犬随机分为4组，分别是阴性对照组、阳性对照组（磺胺嘧啶锌软膏组）、低pH凝胶组（低pH值壳聚糖纳米银水凝胶组）、高pH凝胶组（高pH值壳聚糖纳米银水凝胶组），每组3只犬，造24个创口，共96个创口。
1．2 仪器与设备
SWCJ2D双人单面净化工作台（苏州净化仪器设备有限公司，苏州）；FA1604N电子天平（常熟市双杰测试仪器厂，常熟）；DHG90系列电热恒温鼓风干燥箱（上海索普仪器有限公司，上海）；手术操作台（泰州竣迪机械制造有限公司，泰州）；手术无影灯（山东欣雨辰医疗设备集团有限公司，曲阜）。
1．3 试剂与菌种
选用外科感染常见的金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌(大学微生物教研组馈赠)。主要试剂为HE染色液、Masson染色液、舒眠宁注射液（本课题组研制的犬、猫专用复方塞拉嗪注射液）、双氧水、0.9%氯化钠溶液（生理盐水）、磺胺嘧啶锌软膏、壳聚糖纳米银水凝胶。
1．4 细菌的培养与制备
1.4.1 细菌培养与鉴定
通过高压灭菌法将制备的琼脂培养基和Todd Hewitt Broth（THB）液体培养基进行灭菌处理，分别从培养了纯金黄色葡萄球菌及绿脓杆菌的培养基中挑取单菌落接种至THB液体培养基中，37 ℃摇床培养24 h，同时划线接种到血平板上，置于37 ℃温箱培养24 h。肉眼观察菌落形态并镜检观察鉴定。用菌液进行16 SrDNA序列测序，鉴定细菌及其纯度。
1.4.2 抑菌试验
采用抑菌圈法，选用两种药物，即壳聚糖凝胶和壳聚糖纳米银凝胶，各有4种不同pH（4.5；5.5；6.5；7），分别将八种药物与分别涂有金黄色葡萄球菌或绿脓杆菌菌液的琼脂培养基接触，置于37 ℃温箱培养24 h后，观察并测量抑菌圈的直径，每种药物做3个重复，评价药物的抗菌效果。
1.4.3 细菌浓度测定及制备

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