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某猪场蓝耳病的爆发及其预防措施研究

2021-04-03 12:55编辑: www.jxszl.com景先生毕设
: 2017 年11月开始,江苏省某规模化猪场妊娠母猪妊娠后期发生流产、早产、木乃伊胎及产死胎等繁殖障碍, 个别母猪和仔猪耳朵、腹部和四肢内侧皮肤呈蓝紫色;育肥猪体温明显升高, 一些病猪体温甚至高达41 ℃;食欲不振乃至完全废绝;患病猪全身皮肤发红, 呼吸道症状明显。为了调查发病病因,以便及时采取有效的措施治疗以及之后该病的预防,开展了流行病学调查和临床诊断。经过临床剖检和实验室检测,可以确认本次疫病为猪蓝耳病病毒感染导致。之后采取了免疫疫苗和抗生素控制继发感染的方法,疫情逐渐稳定,猪群中蓝耳病基本消失。
目录
摘要3
关键词3
Abstract3
Key words3
1材料与方法4
1.1样品来源 4
1.2材料 4
1.2.1仪器4
1.2.2试剂4
1.3检测方法4
1.3.1病理剖检4
1.3. 2 RTPCR检测4
1.3.3 ELISA检测6
1.3.4 荧光定量PCR检测 7
2 实验结果与分析7
2.1剖检变化7
2.2病原PCR检测结果9
2.3 ELISA试验检测结果9
2.4 CT值10
3蓝耳病爆发后的紧急措施10
3.1紧急隔离11
3.2蓝耳病发病猪群的治疗11
3.2.1患病仔猪的治疗11
3.2.2患病母猪的治疗11
3.2.3患病保育猪的治疗11
3.2.4对症治疗11
3.3免疫预防11
3.4蓝耳病的预防12
3.4.1建立严格有效的隔离消毒制度,防止疫病传入12
3.4.2疫苗的预防接种12
3.4.3药物预防12
3.5预防效果13
4讨论14
致谢14
参考文献14
江苏某猪场蓝耳病的爆发及其预防措施研究
引言
猪繁殖与呼吸综合征(Porcinereproductive and respi *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: *351916072
ratory syndrome,PRRS),又称蓝耳病,是近些年来严重危害养猪生产的重大疫病之一。其病原猪繁殖与呼吸综合征病病毒(Porcine reproductiveand respiratory syndrome virus,PRRSV),为有囊膜,单链正RNA病毒,着遗传多样性,属套病毒目动脉炎病毒科动脉炎病毒属。因为其遗传多变性,蓝耳病具有较大的防治困难性。1987年该病毒在美国被首次发现,并于三年后年传入欧洲,并在欧洲多个国家间很快暴发并流行起来,现在猪繁殖与呼吸综合征病毒在全球范围内流行广泛[1]。我国于1996年首次分离到该病毒,证实了蓝耳病病毒在我国的存在。目前,该病已在我国江苏、山东、广东、广西等多个省份流行,因此造成危害在不断扩大。各个品种、年龄、性别的猪只均有可感染蓝耳病,其主要临床症状表现为母猪繁殖障碍与育肥猪的呼吸道症状 [23]。生猪蓝耳病发病率高,传染速度快,而且病程极短,死亡率高,严重威胁着我国生猪养殖企业的经济利益[4]。
2017年11月,江苏省某猪场保育猪,育肥猪和妊娠母猪,仔猪均有明显的发病现象,主要呈现全身发热,可达41℃,食欲减退,皮肤发红,明显的呼吸困难,眼睑部水肿,精神抑郁,昏睡,耳部出血淤血呈紫色等症状;妊娠母猪流产;仔猪存在较高发病率,且五天内死亡率高。其临床症状与猪繁殖与呼吸综合征相似度极高,故怀疑该猪场发生的疾病为蓝耳病,对此做出以下诊断。
1材料与方法
1.1样品来源
发病猪场取从6病猪取病料6份,主要取猪肾脏,脾脏,肺脏,淋巴结部分作为病料,充分研磨,置于1.5 mL离心管中备用。病猪猪群随机采血待检30份。
1.2材料
1.2.1仪器
超净工作台,购于AIRTECH;PCR仪,荧光定量PCR仪购于TAKARA;组织匀浆机,购于上海净信;离心机,购于Eppendorf;涡旋混合器(MXS),购于SCILOGEX;电子天平,购于良平仪器;微波炉,购于Galanz;电泳仪,购于南京麦高德生物科技有限公司;紫外分析仪,购于南京麦高德生物科技有限公司;倒置显微镜,购于ZEISS;CO2培养箱,购于南京宝诚生物技术有限公司;超微量移液器(2.5 μL,10 μL,100 μL,200 μL,1000 μL),购于Eppendorf;电热恒温水槽(DK8D),购于上海恒科技有限公司;连接仪,购于南京沃拓仪器设备有限公司;HZ9211KB恒温振荡器,购于太仓市华利达实验设备有限公司。
1.2.2试剂
RNAiso Plus(Trizol),购于TAKARA;三氯甲烷(氯仿),购于上海凌峰化学试剂有限公司;异丙醇,购于广州市金华大化学试剂有限公司;无水乙醇,购于广州市金华大化学试剂有限公司;RNasefree水(DEPC水),购于中科瑞泰(北京)生物科技有限公司;反转录试剂盒 5× AllInOne MasterMix(with AccuRT Genomic DNA Removal Kit),猪繁殖与呼吸综合征ELIDA检测试剂盒购于abm;2×PCR Taq Plus MasterMix with dye,购于TAKERA;PrimeSTARHS DNA Polymerase,购于TAKARA;胶回收试剂盒Biospin Gel Extraction Kit,购于BioFlu;pMD19T Veter,购于宝日医生物技术(北京)有限公司;PRRSV NADC30 引物,由南京金斯瑞生物科技有限公司合成;Agarose LE,购于MDBIo,Inc; GOLDView核酸染色剂,购于Solarbio;2000 bp DNA Marker,购于TAKARA; PRRSV阳性高致病性突变株,由大学传染病教研室分离并保存。

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