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进口种牛赤羽病及病毒性腹泻病的血清学检测

2021-04-03 13:02编辑: www.jxszl.com景先生毕设
牛病毒性腹泻(BVD)是由牛病毒性腹泻病毒(BVDV)引起的传染病,以幼龄牛易感性最高,但是各个年龄段的牛都可能感染。传染来源主要是病畜,因为病牛的分泌物、排泄物、血液和脾脏等都含有病毒,所以可以通过直接接触或间接接触方式传播。赤羽病又名阿卡斑病,是由赤羽病病毒引起的牛、绵羊和山羊的一种多型性虫媒传染病,主要传播媒介是以吸血为生的蚊子和库蠓。根据进口种牛的疫病防控需求,对一批在江苏省盐城大丰隔离场隔离的澳大利亚进口种牛(共2543头)运用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法进行牛病毒性腹泻和赤羽病的检测。结果发现赤羽病的患病率为0.079%(n=2543),牛病毒性腹泻病的患病率为0%(n=2543)。检测结果为江苏省盐城大丰隔离场了解该批澳大利亚进口种牛的疫病的流行情况提供了准确的报告。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言(或绪论)1
1□材料与方法2
1.1□检测样品 2
1.2□主要检测试剂 2
1.3□送检样品的处理2
1.4 病毒性腹泻病毒抗原检测2
1.5□赤羽病病毒抗原检测3
2□结果与分析4
2.1病毒性腹泻病毒抗原检测结果4
2.2□赤羽病病毒抗原检测结果5
3□讨论 6
3.1□病毒性腹泻病的讨论6
3.2□赤羽病的讨论6
3.3□两种传染性疫病的讨论6
致谢7
参考文献8
江苏省进口种牛赤羽病和病毒性腹泻病的血清检测
引言
牛病毒性腹泻(Bovine viral diarrhea, BVD)是由牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)引起的一种以感染牛为主的疾病,该病呈世界性分布,牛病毒性腹泻病毒属于黄病毒科(Flaviviridae)瘟病毒属(Pestivirus)[12]。该病毒具有高传染性,各年龄阶段牛都可被感染,可在世界范围内传播。主要危害是引起不孕、流产、死胎、腹泻、免疫抑制、弱犊牛和发育不良,临床上以发热、黏膜糜烂、溃 *51今日免费论文网|www.jxszl.com +Q: @351916072
疡、白细胞减少、腹泻、怀孕母牛流产或产畸型胎儿为主要特征[34]。牛病毒性腹泻病可以通过直接或间接的接触传播,这种传播方式使牛病毒性腹泻病十分容易传播。由于它的易传染性,牛病毒性腹泻病已经十分严重的影响到了我国畜牧养殖业的发展。目前 BVD 在世界各地都普遍存在,尤其在养牛业发达的地区,此病更为严重。BVD 在我国同样普遍存在,一些大中型奶牛场使用BVDV ELISA试剂盒进行普查发现, BVDV 抗体阳性率平均超过 85%[5]。由于感染BVDV的牛大多数都为亚临床感染,所以往往不能看到牛病毒性腹泻病的典型临床症状。本实验在江苏出入境检验检疫局动物检验检疫实验室进行, 采用ELLSA方法进行检测。运用的时牛病毒性腹泻病毒(BVDV)抗原捕捉ELISA试剂盒(美国IDEXX公司生产)。该检测方法及试剂盒能够准确、灵敏、快速地得到试验结果,适合检测大批量的样品,其已成为牛病毒性腹泻病检测的常用方法[6]。
赤羽病又名阿卡斑病,是由布尼亚病毒科正布尼亚病毒属辛波病毒群的阿卡斑病毒(Akabane virus,AKV)所引起的牛和羊的一种多形性虫媒传染病[7] 。赤羽病主要对处于妊娠期的病畜产生较大的危害,因为它的病理特征主要是使病畜发生流产、早产以及先天性的胎儿关节弯曲和积水性无脑综合征等。该病首次被发现是在日本的一个村落中,该村落就是群马县的赤羽村,所以命名为赤羽病[8]。我国首次发现赤羽病是于1991年,由农业部动物检疫所分离鉴定出来的[910]。赤羽病这种多形性虫媒传染病给全世界的畜牧业造成过无比严重的经济损失,是国际动物贸易中检疫的重点疫病之一。世界动物卫生组织(OIE)所规定的必须申报的动物传染病就包括赤羽病,同时赤羽病也是我国所规定的二类传染病[6]。检测赤羽病的方法有很多种种,他们各有各的有优点和缺点以及不同的适用性。在当下我们主要的检测方法为ELISA法,这种方法可以精准和高效地得到检测结果。酶联免疫吸附试验(ELISA)非常适用于大批量的样品检测,同时它也是我国检测赤羽病的常用方法。本次实验是对一批澳大利亚进口种牛进行赤羽病检测,运用的就是ELISA法。本次检测在江苏省出入境检验检疫局动物检验检疫实验室完成,采用的是购自法国IDVET公司的ID Sereen® Akzbane Competition赤羽病抗体检测试剂盒。
本研究是对一批从澳大利亚的进口种牛进行病毒性腹泻病和赤羽病的检测,并且为江苏省盐城大丰隔离场提供详细的检测报告。可以使进口种牛的养殖场准确的了解到这批澳大利亚进口种牛的疫病情况,同时良好地防止这两种传染性疾病通过贸易进出口的方式在我国大规模的传播和爆发。
1 材料与方法
1.1 检测样品
一批在江苏省盐城大丰隔离场的澳大利亚进口种牛(共2543头)的血液样本。
1.2 试剂
1.2.1 检测病毒性腹泻病毒抗原所用试剂 牛病毒性腹泻病毒(BVDV)抗原捕捉ELISA试剂盒(美国IDEXX公司生产)购自于北京爱德士元亨生物科技有限公司。
1.2.2 检测赤羽病病毒抗原所用试剂 ID Sereen® Akzbane Competition 阿卡斑病毒(AKV)抗原捕捉ELISA试剂盒(法国IDVET公司)。
1.3 送检样本的处理
由于江苏省出入境检验检疫局动物检验实验室的工作要求,这次实验的样本全都是血液样本,是江苏省盐城大丰隔离场所送来的。所以根据检测要求需要把所有的血液样本制成血清样本,以方便检测。第一步先把所有的血液样本根据编号分组,以方便检测完成之后报告的书写。然后把血液样本用离心机离心,分出上层清液和下层沉淀。具体步骤为每个样本取出1 mL添加到1.5 mL规格的离心管中,离心机的参数为转速8000转/每分,时间为3分钟。然后提取出的上层血清可以用做酶联免疫吸附试验(ELISA)试验,下层余留约200 µL用于核酸提取。

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