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摘要 II
Abstract II
第一章 文献综述 1
1. 鸡胚性腺发育 1
1.1 鸡胚性腺的发育过程 1
1.2 鸡胚性腺异受外源性刺激从而影响发育 1
1.3 研究雄激素对鸡胚睾丸形态的影响的意义 1
1.4 研究背景 1
1.5 应用前景 3
2. 研究目标 3
3. 项目内容 3
第二章 材料与方法 3
1. 实验材料 3
1.1. 实验试剂 3
1.2. 实验器材 3
2. 研究方法
2.1 项目内容 3
2.2 鸡胚性腺组织切片的制作 3
2.3 DNA提取 5
2.4 性别鉴定（PCR检测W基因） 5
第三章 研究结果 5
1. 睾酮最适浓度的探究 5
2. 睾丸组织样本观察 6
2.1. PCR检测鸡胚性别 6
2.2. 雄鸡胚性腺解剖照片 6
2.3. 对照组与处理组鸡胚性腺对比观察 6
第四章 分析与讨论 7
1. 睾酮对鸡胚睾丸发育的影响 7
2. 睾酮对鸡胚重和成活率的影响 8
3. 研究中的不足之处 8
4. 实验的意义讨论 9
第五章 致谢 9
参考文献 9
雄激素对鸡胚睾丸形态的影响
摘要
鸡是具有极高经济和实用价值的动物，性腺是所有动物物种和性别差异人群中最具多样性的组织。但是因为睾丸激素广泛存在于自然界，若在胚胎期注射雄激素可以使雄性胚胎的睾丸更早成熟，从而对自身发育有促进作用，使发育提早符合市场标准，则可预想到该技术对禽类养殖行业有着极大促进作用。本项目旨在探究雄激素对胚胎期雄性腺形态发育的影响，首先预实验探究了睾酮浓度对鸡胚成活率的影响，结果表明，0.05ml睾酮溶液时，经X2检验与正常孵化死亡率差异不显著（p＜0.05）。接着对孵化0天鸡胚进行注射雄激素（0.1mg/mL）的处理，此后每隔 *51今日免费论文网|www.51jrft.com +Q: ^351916072* 
三天注射一次，分别取E9,E18性腺样本进行形态观察，取睾丸组织制作石蜡切片，提取血液DNA，用于性别鉴定，准确筛选雄鸡胚。综合以上指标评价性腺的发育情况。实验显示注射雄激素的鸡胚性腺大小明显大于未注射雄性激素的雄性鸡胚。对于皮质部分显著变厚，同时期精原细胞数量也明显增多。结果显示睾酮能够促进鸡胚睾丸发育。
引言
文献综述
鸡胚性腺发育
鸡胚性腺的发育过程
鸡胚性腺功能的分化很明显，正常发育时间与其他脊椎动物非常相似。鸡胚的性腺可以从性腺分化为单独的睾丸或卵巢功能，但是形态没有差异。禽类的主要原始生殖细胞起源于上胚层，在孵化第三天后将在未来的生殖嵴中定植[1]。在孵化到第6.5天时,禽类性腺开始分化。ZW单倍体在鸟类中的生殖功能通常发展为不对称的卵巢，而右性腺自然退化。相反，ZZ的同一单倍体的性腺发育成两个对称的睾丸。[2]
鸡胚性腺异受外源性刺激从而影响发育
鸟类（如鸡）的性别主要取决于ZZ和ZW的染色体系统。与哺乳动物不同，早期胚胎性腺的结构分化不是由遗传基因的性别决定的，而是在正常发育的早期受到类固醇激素的影响。鸡胚性腺由于发育早期并无形态化差异，因此外源性物质可以影响到性腺发育。
研究雄激素对鸡胚睾丸形态的影响的意义
鸡具有非常高和经济价值，是很好的模式动物。全球养鸡业的发展是一段漫长的历史。其他相关科学方法的研究也不断深入到各个方面。性腺（Gonad）是与动物和人类差异最大的组织。自从1878年Balfour对脊椎动物卵巢的发育和结构形态进行了相关研究以来，有关动物性腺的科学研究从未停止过。
雄激素的主要成分是睾酮，血清中睾酮的生物合成和分泌主要由下丘脑性腺性腺轴控制，下丘脑能够释放促性腺激素释放激素（GNRH）、刺激黄体生成素（LH）、卵泡刺激素（FSH）的释放。在睾丸中，LH主要刺激睾丸间质细胞以合成睾酮。FSH刺激神经雄性睾丸的部分支持细胞有利于精子的发生。雄激素有利于雄性动物和人类的生殖功能以及其他器官更加成熟并继发于第二性征。它可以维持正常性生活和其他生殖功能。[34]在鸡胚发育的中后期，LH受体蛋白和性激素合成酶P45017ct被代谢，其他基因的表达可以增强LH在刺激合成雄激素和生精细胞的发育。LH和t均可显着改善鸡胚睾丸精子细胞的分裂和繁殖，但不具有协同作用，[5]因此，雄激素在鸡胚发育的过程中扮演着重要的作用。
而且Higgs等［6］的研究结果表明，激素类药物能明显提高饲料转化率，并促进鱼类生长。[7]而在激素对动物性状的影响被研究的越来越深入的今天，在我查阅了大量文献后，却几乎找不到雄激素对睾丸有何影响的文献资料。因此，本文探究了雄激素对雄胚的性别分化过程中起到了怎样的作用，而这个作用对现代养禽又有着怎样的意义。
研究背景
鸡精子的形成过程与哺乳动物相似，可分为三个阶段：精原干细胞的更新和减数分裂以及产生精子的过程[8]，即生精细胞可以通过自身的细胞增殖产生多个精原细胞。经过两次减数分裂，它们产生了各级精母细胞和精细胞，最后精细胞变态形成精子。另外，次级精细胞、精子仅在某些时间出现。细胞组织的分化是明显的，并且发育时期的时间总是会有很大差异的。第一批精子细胞在出生后第10周首次出现在猪曲精细管中，首次生成精子在出生后第20周产生。在小鼠模型中，大约在出生后第15天和第30天，首先在阴茎的生精小管中观察到主要的实质性精子细胞和卵细胞[9]。鸡的深入研究出乎意料地发现，在胚泡期的第15天，生精管是生殖系统细胞中的睾丸，不支持其他细胞和一定量的精原细胞[1011]，精子干细胞组织去除外壳后约6天生产。释放14天后，便分化为各种水平的生精细胞[12]。
性别分化是一个从性别发展到表型年龄和性别的时间过程。这一过程受到家族遗传学的严格控制。毫无疑问，脊椎动物早期胚胎的温带腺体具有无限的性潜能，可以分化为任何性别内容。有鉴于此，现代人对动物、人和性别的分化进行了大量的科学研究。此外，激素药物理论和诱饵理论可以更好地解释性别内分化和胚胎发生的机制。Lillve1 在激素分化理论的基础上提出了激素受精卵的市场分化理论。性染色体上的定性遗传与常染色体上的明确遗传之间的平衡刺激细胞组织产生诱导物，性腺结构分化为雄性和雌性。许多动物在受精卵时期形成两种性腺。如果受精卵正常发育为雌性动物，受精卵的雄性生殖系统腺体优先发育和分泌雌激素药物，促进雄性动物主要性状的正常发育，从而抑制雄性动物生殖功能腺的发育；如果，虽然小动物的性别最初是由性染色体基因决定的，而性别分化明显是由性激素控制。

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