目录
摘 要 Ⅰ
ABSTRACT Ⅱ
第一章 文献综述 1
1 卵泡发育和闭锁 1
2 miRNA研究过程和作用机制 3
3 卵巢和卵巢特定组织中的miRNA 5
4 miR2145p研究进展 6
第二章 miR2145p抑制猪卵泡颗粒细胞的凋亡 7
1 材料与方法 7
1.1 实验动物 7
1.2 主要试剂与仪器 7
1.3 卵泡的分类 7
1.4 实时定量PCR 8
1.5 颗粒细胞的培养与转染 9
1.6 Western blot 9
1.7 流式检测 10
1.8 数据分析 10
2 结果与分析 10
2.1 健康卵泡和闭锁卵泡的分类 10
2.2 miR2145p在猪闭锁卵泡中显著上调 11
2.3 miR214 5p促进猪卵泡颗粒细胞凋亡 11
3 讨论 12
第三章 结论与展望 14
参考文献 15
致 谢 18
miR2145p促进猪卵泡颗粒细胞的凋亡
摘 要
在哺乳动物中，9099.9%的卵泡在发育的各个阶段退化闭锁。已有研究表明卵泡颗粒细胞的凋亡是导致卵泡闭锁的主要原因。miRNAs是一类短的、非编码的单链RNA分子，在基因表达的转录后调控中发挥作用。miRNA参与卵泡发育和闭锁的调控已被广泛报道。本研究拟分析miR2145p在猪健康和早期闭锁卵泡中的表达差异，并在体外培养的猪卵泡颗粒细胞中探索miR2145p对细胞凋亡的调控作用。利用qRTPCR技术，在健康与早期闭锁卵泡中对miR2145p进行定量分析，结果显示miR2145p在早期闭锁卵泡中的表达量显著升高。在体外培养的猪卵泡颗粒细胞中，转染miR2145p mimics/inhibitor及其相应的对照，利用流式细胞术和Western Blot检测miR2145p水平与颗粒细胞凋亡的关系，结果表明：过表达miR2145p时促进猪卵泡颗粒细胞的凋亡；抑制miR2145p的表达时猪卵泡 *51今日免费论文网|www.51jrft.com +Q: @351916072@ 
颗粒细胞的凋亡率则显著下降。本研究证实了miR2145p具有促进猪卵泡颗粒细胞的凋亡的作用，为进一步研究miR2145p通过调控靶基因的表达从而参与猪卵泡颗粒细胞的凋亡提供基础。

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