目录
摘 要 I
ABSTRACT II
第一章 绪论 1
第二章 文献综述 3
1 衰老概述 3
2 NMN作用概述 4
3 NMN抑制干细胞衰老 4
4 NMN改善线粒体功能障碍 5
5 NMN改善DNA氧化损伤和胰岛功能 5
第三章 试验研究 7
1 材料与方法 7
1.1 试剂的配制方法 7
1.1.1 生理盐水的配置： 7
1.1.2 青霉素与链霉素的配置： 7
1.1.3 猪卵母细胞操作液（TLHPVA）的制备： 7
1.1.4猪卵母细胞体外成熟培养液基础液与体外成熟培养液（IVM）： 8
1.1.5 Hoechst33342： 9
1.1.6 4%多聚甲醛： 9
1.1.8 免疫荧光染色封闭液： 9
1.1.9洗液的配置 9
1.1.10 透明质酸酶的配置 9
1.2 试验方法 9
1.2.1 猪卵母细胞的采集和体外培养 10
1.2.2 NMN处理 10
1.2.3 免疫荧光染色 10
1.2.4 线粒体膜电位测定 10
1.2.5 共聚焦观察 10
1.2.6 统计分析 11
1.3 试验内容 11
1.3.1 NMN改善排卵后老化猪卵母细胞的形态 11
1.3.2 确定NMN挽救排卵后老化猪卵母细胞的适用浓度 11
1.3.3 NMN挽救排卵后老化猪卵母细胞的细胞器和染色体损伤 11
2 结果与分析 11
2.1 NMN挽救排卵后衰老影响的猪卵母细胞卵丘细胞的扩展 11
2.2 NMN改善排卵后衰老导致的猪卵母细胞胞质碎裂 12
2.3 NMN挽救排卵后老化猪卵母细胞的纺锤丝组装和染色体排列 13
2.4 NMN改善排卵后衰老影响的猪卵母细胞的线粒体完整性 14
3 讨论 15
第四章 结论与展望 *51今日免费论文网|www.51jrft.com +Q: ^351916072* 
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参考文献 18
致 谢 20
NMN提高老化猪卵母细胞质量的作用研究
摘 要
畜牧行业的发展与哺乳动物的繁殖能力息息相关，而卵母细胞的质量高低是繁殖能力的主要体现方式，正是由于卵母细胞在生殖中的重大意义，本试验提供了探索提高卵母细胞质量的方法，为提高畜禽繁殖力提供了一定的理论基础。本试验以猪卵母细胞为研究对象，采用猪卵母细胞体外培养技术和免疫荧光染色等试验方法，在猪卵母细胞成熟液中添加合成烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD+）的关键中间体烟酰胺单核苷酸（NMN），从而达到挽救排卵后老化猪卵母细胞质量的目的。研究发现添加烟酰胺单核苷酸（NMN）后可以改善老化猪卵母细胞培养成熟后的卵丘卵母细胞复合体周围卵丘细胞的扩展异常，保证缝隙连接和卵母细胞的质量，例如卵母细胞胞质的成熟程度和受精能力；同时还发现添加烟酰胺单核苷酸（NMN）可以使得老化猪卵母细胞在减数第二次分裂后可以维持染色体的排列正确和延长纺锤体组装的正常性，减少卵母细胞发育缺陷；添加烟酰胺单核苷酸（NMN）使老化猪卵母细胞胞质内的线粒体功能维持在正常水平，以达到改善成熟后老化猪卵母细胞质量的目的。综上，我们的试验数据都指明老化猪卵母细胞的遗传物质混乱，线粒体功能衰退，而添加烟酰胺单核苷酸（NMN）可以有效的提高改善排卵后老化猪卵母细胞胞质内的以上问题，从而挽救老化猪卵母细胞，提高排卵后老化的猪卵母细胞质量。

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