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摘 要 I
ABSTRACT II
第一章 文献综述 1
1 Mark4研究简述 1
1.1 Mark4结构与调控 1
1.2 Mark4生物合成与表达 2
1.3 Mark4生物学功能 3
2 胎盘线粒体氧化损伤 4
2.1 线粒体氧化损伤机制 4
2.2 胎盘线粒体氧化损伤与妊娠肥胖 5
3 小结 5
第二章 实验 6
1 材料与方法 6
1.1 动物模型和饮食管理 6
1.2 shMark4基因筛选、超表达效率检测 6
1.3 猪胎盘滋养层细胞的体外原代培养 6
1.4 猪胎盘滋养层细胞脂毒性模型的建立 7
1.5 线粒体呼吸功能检测 7
1.6 线粒体膜电位检测 7
1.7 细胞氧化应激功能检测 7
1.8 柠檬酸合成酶CS、抗氧化酶和线粒体酶活性检测 8
1.9 线粒体形态检测 8
1.10 线粒体mtDNA拷贝数检测 8
1.11 ATP生成检测 8
1.12 统计分析 8
2 实验结果与分析 9
2.1 干扰/过表达Mark4的效率检测 9
2.2 Mark4促进脂毒性条件下猪胎盘滋养层细胞氧化应激 10
2.3 Mark4对脂毒性条件下猪胎盘滋养层细胞线粒体氧化呼吸功能的影响 12
2.4 Mark4对脂毒性条件下猪胎盘滋养层细胞中线粒体数量的影响 13
2.5 Mark4对脂毒性条件下猪胎盘滋养层细胞中线粒体结构影响 15
第三章 结论与展望 17
参考文献 19
致 谢 22
多功能蛋白Mark4对脂毒性条件下猪胎盘滋养层细胞线粒体的氧化损伤的影响
摘 要
母猪高膘妊娠引起的繁殖力下降是困扰母猪生产的一大难题。在人和动物已经检测到母体的妊娠肥胖可引起胎盘绒毛线粒体氧化应激损伤。功能性蛋白 *51今日免费论文网|www.51jrft.com +Q: ￥351916072￥ 
Mark4被证实对肥胖条件下的机体能量和葡萄糖代谢水平以及脂肪组织氧化应激和炎症反应发挥重要调控作用，然而Mark4能否对高膘母猪的胎盘绒毛膜线粒体氧化损伤发挥调节作用仍不清楚。因此，本课题利用现代分子生物学技术和体外原代培养猪胎盘绒毛滋养层细胞技术，在建立脂肪酸体外诱导猪胎盘滋养层细胞脂毒性（氧化应激）模型的基础上，利用体外基因超表达和shRNA干扰沉默技术检测Mark4对脂毒性条件下猪胎盘滋养层细胞线粒体结构和功能损伤的影响。研究结果显示：氧化应激可介导高膘妊娠母猪胎盘滋养层细胞线粒体结构和功能损伤，并且Mark4可促进脂毒性条件下猪胎盘滋养层细胞氧化应激和线粒体功能损伤。这些研究结果的获得对于阐明高膘妊娠母猪胎盘绒毛膜线粒体氧化损伤的分子机制具有较强的科学意义，同时也为今后从营养手段改善母猪繁殖性能提供新的思路和解决途径。

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