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野马追有效成分提取工艺研究

2020-10-29 22:39编辑: www.jxszl.com景先生毕设
目 录
1 引言 1
1.1 野马追简介 1
1.2 化学成分研究 1
1.3 野马追利用价值 2
1.4 野马追的药理作用 2
1.5 本课题研究的目的与意义 3
2 实验材料 3
2.1 主要药材 3
2.2 主要试剂 3
2.3 主要设备 4
3 实验方法 4
3.1 球磨法微粉化提取野马追总黄酮 4
3.2 粒度检测方法 4
3.3 总黄酮含量检测 5
3.4 野马追内酯A,B和金丝桃苷的测定 6
4 结果与讨论 6
4.1 野马追黄酮含量的测定 6
4.2 黄酮含量及粒度检查 7
4.3 提取物HPLC测定结果 10
结 论 13
致 谢 14
参考文献 15
1 引言
野马追地产于江苏省盱眙,其主要化学成分有香豆精、生物碱、黄酮类和挥发油等。可以采用人工培植,在中医药理上具有清肺止咳、化疲平喘、降血压等[2]功效,用于支气管炎和慢性气管炎、高血压等疾病的治疗。由于野马追的研究起步较晚,并且相应的参考文献报道也比较少,本论文主要是以野马追作为研究对象,应用现代的研究方法综合的分析其所含的化学成分及药理作用,从而对野马追的药用价值有一定的了解,这对推动中草药化学成分的分析进展和药理研究、新药开发以及发展江苏地产中药等具有一定的意义。
1.1 野马追简介
野马追中药资源分布比较广泛,属于多年生草本植物,可以采用分株繁殖的方式进行栽培,在生产上以根莲繁殖为主。野马追性喜温暖湿润气候,六七月高温多雨季节生长旺 *51今日免费论文网|www.jxszl.com +Q: ^3^5`1^9`1^6^0`7^2# 
盛,生长于湿润的山坡、溪水旁或草地,国内除新疆外各地均有分布,野马追大都在秋季采收,剪径晒干后就可用做药材,胡林水[3]用不同采收期的野马追测定总黄酮含量[4]的变化规律,确定其最佳采收应该在顶花将开前2~3天收割,顶花后2~3天内收割完毕,否则会影响其动态有效成分的含量和经济效益。林如辉等[5]对江苏省盱眙产的窄叶、宽叶、紫花、白花4种类型的野马追以棕矢车菊素、槲皮素、总山栾素、黄酮苷元为指标,进行了有效成分积累动态变化的研究,发现8月上旬适宜采收野马追,其总黄酮苷元含量达到较高水平。
1.2 化学成分研究
Yang等[6]首次用重结晶、硅胶柱层析和工业酒精提取等方法从野马追地上部分中提取分离得到6 个化合物为正十六烷酸、谷甾醇、伪蒲公英甾醇、槲皮素、蒲公英甾醇乙酸酯、胡萝卜苷。肖晶等[7]用95%的乙醇和超临界萃取技术处理与分离野马追,得到了7种单体化合物。并借助理化性质和现代波谱学手段发现了6个化合物结构:正三十六烷、正三十二烷、蒲公英甾醇醋酸酯、齐墩果烷醋酸酯、β-谷甾醇、泽兰素。然后用95%乙醇回流提取处理其残渣分离并鉴定出槲皮素、金丝桃苷和在野马追中首次获得的2个单体化合物:山柰素、芦丁。
1.2.1 野马追含有的黄酮类成分
Qian等[8]通过硅胶色谱法对野马追的醋酸乙酯进行分离,并对黄酮类成分进行了光谱数据和理化性质的结构鉴定,首次得到了4种新的黄酮类化合物:黄芪苷、三叶豆苷、山奈酚、棕矢车菊素和 2 种已知黄酮类化合物:槲皮素和金丝桃苷。张晓玲[9]对野马追中的黄酮类成分运用 LC-MS/MS进行分析,确定了3 个黄酮苷:金丝桃苷、三叶豆苷、黄芪苷和3个黄酮苷元:槲皮素、山柰酚和棕矢车菊素。
1.2.2 野马追含有的倍半萜成分
杨念云等[10]从野马追地上全草中应用多种柱层析法和波谱学分析法进行分离和结构鉴定,得到2个新的倍半萜类化合物:野马追内酯 A,B和4 个已知化合物:腺苷、芦丁、咖啡酸、蒲公英甾醇棕榈酸酯。
1.2.3 野马追含有的挥发油成分
肖晶等[11]用水蒸气蒸馏法提取野马追花蕾中的挥发油,然后利用气相色谱-质谱(GC-MS)法对其化学成分进行分离鉴定出约占挥发油总成分的56.34%的含15个C的倍半萜类化合物,推测出了与倍半萜类化合物有关系的是野马追花蕾中含有的挥发油的生物活性和芳香气味。CHEN 等[12]从野马追中分离鉴定出主要成分为β-蒎烯(5.36%)、石烯内酯(15.90%)、棕榈酸(16.28%)的41 种化学成分,约占挥发油总量的93.44%。
1.3 野马追利用价值
野马追中含有内酯A,B,金丝桃苷,槲皮素等黄酮类成分,其中金丝桃苷和槲皮素具有抗炎、抗菌的作用;其中分离纯化得到的四种倍半萜内酯类化合物具有抗鼻咽癌的利用价值。
野马追具有降血压、化疲平喘、清肺止咳等效果。主要治疗支气管炎,痰多咳嗽,高血压等疾病。在临床上取得了良好疗效的是用于咳嗽疲多的治疗,具有极大的开发利用价值。
1.4 野马追的药理作用
1.4.1一般药理毒理
李剑平等[13]实验表明,野马追对心血管系统的心率、心律、血压;对动物正常呼吸系统和爬杆运动、激怒反应、自主活动等神经精神活动影响不明显。周远大等[14]用大小鼠进行激怒 *51今日免费论文网|www.jxszl.com +Q: ^3^5`1^9`1^6^0`7^2# 
反应、自主活动、爬杆运动、心血管与呼吸系统以及药理作用和慢、急性毒性试验,研究野马追的一般毒性作用,发现野马追对大小鼠各组织器官和正常生理活动无明显毒性影响。
1.4.2 心血管药理
周远大等[14]发现野马追能明显升高HDL-C水平,并能降低LDL-C、三酰甘油水平及实验性大鼠血清胆固醇,可以实验小鼠起到防治高脂血症作用。陈万一[15]研究发现,野马追提取液野马追提取液能促进外周组织细胞中的胆固醇向肝脏转运,明显减轻高脂模型大鼠肝变,从而发挥防治动脉粥样硬化、高脂血症的作用;并能激活脂代谢相关酶的活性,升高血管内皮舒张因子的含量,从而具有降低血黏度、改善血管内皮功能、调节血脂、抗脂质过氧化的作用。
1.5 本课题研究的目的与意义
野马追具有较明显的止咳、化痰、抑菌、抗病毒、抗氧化等功效。本课题以江苏盱眙野马追干为原料,利用不同传统中药提取技术和现代中药提取技术得到得到野马追提取物,并对其活性成分进行物理化学分析比较。本课题旨在为中药野马追的进一步研究和开发应用提供一定的参考,采用优化超声辅助法和球磨法提取野马追中的黄酮类化合物,测定黄酮类化合物和野马追内酯A,B的含量与收率。
2 实验材料
2.1 主要药材
表1 试验用药材
野马追药材种类 产地
药材1 安徽亳州野马追饮片
编号 球磨时间(h) 总黄酮提取率(%)
1 4 0.054
2 6 0.055
3 8 0.023
由上表可以得出,在球磨时间为4h和5h是黄酮提取率相差不多,而球磨时间达到8h时黄酮提取率反而下降,可能因为长时间的球磨导致黄酮的降解,因此在下面实验中选用球磨4h较好。
由上表的实验结果可知在料液比为1:12,球磨时间4h的情况下,装球量为20个球的野马追黄酮提取率为0.1054,比40个球的高,因此装球量为20个球的足够了。
致 谢
历时将近6个月的时间,终于把实验做完,论文写完。在做实验的过程中,在指导老师赵老师的指导下,替我解决了许多疑难,不断给我提出新思路,新方法,教我从多个角度解决一个问题,最终顺利地完成了实验。也是在赵老师的悉心指导下,多次帮我改阅论文,才能完成这篇论文。

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