响应曲面法优选贯叶连翘挥发油的提取工艺研究(附件)
1 前言 1
1.1 贯叶连翘简介 1
1.2 贯叶连翘的研究进展 1
1.3 贯叶连翘的主要化学成分 2
1.4 贯叶连翘的药理作用 3
1.4.1 抗抑郁作用 3
1.4.2 抗病毒作用 3
1.4.3 抗肿瘤的作用 4
1.5 挥发油的研究进展 4
1.6 挥发油的提取方法 4
1.7 挥发油的药理作用 5
1.7.1 抗肿瘤作用 5
1.7.2 抗氧化 5
1.7.3 抗炎免疫 5
1.7.4 抗菌 6
1.8 本课题研究意义 6
2 挥发油的提取工艺研究 7
2.1 材料与试剂 7
2.2 实验方法 7
2.2.1 提取方法 7
2.2.2 单因素实验 7
2.2.3 响应曲面实验设计 7
2.2.4 GC/MS分析 8
2.3 单因素实验结果 8
2.3.1 浸泡时间对挥发油提取率的影响 8
2.3.2 提取时间对挥发油提取率的影响 9
2.3.3液固比对挥发油提取率的影响 9
2.4.1 回归模型方程的建立及其显著性检验 10
2.4.2 因素水平的优化 11
2.4.3 验证实验 13
2.4.4 GC/MS 结果 14
结论 16
参考文献 17
致谢 19
1 前言
1.1 贯叶连翘简介
贯叶连翘，是
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挥发油提取率的影响 9
2.4.1 回归模型方程的建立及其显著性检验 10
2.4.2 因素水平的优化 11
2.4.3 验证实验 13
2.4.4 GC/MS 结果 14
结论 16
参考文献 17
致谢 19
1 前言
1.1 贯叶连翘简介
贯叶连翘，是藤黄科植物贯叶连翘（Hypericum perforatum L）的全草，是一种非常具有药用价值的传统草药[1]，是一种多年生本草，世界上销量最大的3种中草药之一，在欧洲具有着悠久的应用历史，它被视为是一种可以抗抑郁植物制剂的原料，在我国也有着此类记载。贯叶连翘的主要的分布地方是山东、贵州、江苏、四川等。全草含蒽酚化合物、双蒽酮化合物、黄酮化合物、胡萝卜素、维生素C、挥发油和鞣质等物质，具有止血消炎、抗抑郁、抗肿瘤等方面的明显疗效[2]，还被用于治疗疮伤。
1.2 贯叶连翘的研究进展
贯叶连翘(Hypericum perforatum Linn)，是藤黄科金丝桃属一的种多年生草本植物[3]，属于金丝桃属植物之一。作为一味古老的传统中药而言，贯叶连翘富含金丝桃素类成分，尤其在治疗抑郁症方面着非常好的疗效，因而在国际医疗市场上占据着非常重要的位置[4]。曾报道，贯叶连翘在世界范围引起了广泛的关注，因为还具有止血消炎、抗抑郁、抗肿瘤、抗AIDS等方面的多种作用。现在，国内大多对金丝桃素的研究还处于单纯的药理临床研究阶段[5]。贯叶连翘含有含假金丝桃属素 (pseudohypericin)、金丝桃属素(hypericin)、贯叶连翘树脂(hyperesin Ⅰ，Ⅱ)和衣马宁(imanin)等，不仅如此，贯叶连翘的医学作用在两千年前人们就已经有研究，不过在治疗抑郁方面，其有效成分还不清晰。
在外国，有数百篇关于贯叶连翘治疗抑郁病症的文献，中国传统医药文献关于这方面的却有着极少的记载。仅仅在德国，就有40%是使用贯叶连翘来治疗抑郁症的[6]。
在药理作用方面来看，贯叶连翘因味苦、辛、性平，所以它不仅可以调经止血，还可以清热解毒。经学者研究，伪金丝桃素和金丝桃素是贯叶连翘的有效成分，而且经过他们的次生代谢产生的产物可以抗病毒，还能治疗各种肿痛和烫伤、烧伤、创伤及出血等[7]。据报道，关于抗艾滋病病毒方面的临床试验已完成，临床效果甚好[8]。
关于贯叶连翘中的化学成分，大多数都是在对金丝桃素、黄酮类等这些抗抑郁活性物质的研究上和贯叶连翘的挥发油研究上共同建立起来的，都是建立在对其成分的初步认证上。不过，对于贯叶连翘主要成分的研究，目前尚处于鉴定阶段，对它成分的工艺提取过程的优化还未见研究。
1.3 贯叶连翘的主要化学成分
黄酮类化合物 (Flavonoids)：斛皮素(Quecetin)、山奈黄素(Kamperol)、木樨草素(Luteolin)、杨梅树皮素(Myricetin)、斛皮苷(Quecitrin)、异斛皮素(Isoquercitrin)、金丝桃苷(Hyperin)、白矢车菊苷元(Leucocyanidian)、穗花杉双黄铜(Amentoflavone)等都是已被鉴定的成分，同时贯叶连翘中还有着很多丰富的黄酮成分[911]。
苯并二蒽酮化合物（Naphthodianthrones）：它的含量主要以伪金丝桃素和金丝桃素为主，新鲜的植物中含的原伪金丝桃素和原金丝桃素被阳光照射后可转化为两种物质，分别是金丝桃素和伪金丝桃素。此类化合物包含了大黄素蒽酮（Emodinanthrone）、金丝桃素（Hyperein）、异金丝桃素（Isohypeticin）、原金丝桃素（Protohypericin）、伪金丝桃素（Pseudohypericin）、环伪金丝桃素（Cyclopseudohypericin）和原伪金丝桃素（Protopseudohypreicin）等[12]。
间苯三酚化合物（Phloro glucinols）：这类化合物的主要成分就是加贯叶金丝桃素（Adhyperforin）和贯叶金丝桃素（Hyperforin）两种。其中加贯叶金丝桃素含量为0.0020.019，贯叶金丝桃素含量为0.0020.045。
挥发油：金丝桃属植物中含有的挥发油成分均具抗真菌的作用，主要为月桂烯、丁香烯、β蒎烯、α蒎烯、等倍半萜和单萜物质，含量一般为0.06%0.35%。其它还有湖南的贯叶连翘的挥发油是曾氏等报道的，鉴定了有53种成分，有大根香叶烯[13]，最主要的成分为石竹烯。有75种化合物是通过气相色谱质谱联用技术测定了挥发油的化学成分，通过这个技术，检出的物质为桉油精、百里香酚、丁香油酚等酚类物质[14]。挥发油的组成的差异是由国产贯叶连翘在采收季节、地
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