摘 要植物多糖具有良好的生物相容性和可降解性。多糖在生物体内信息，能源和结构方面的功能也逐渐的得到了大家重视，所以对于糖生物学和糖复合物的研究已经成为了学术研究的热点领域。本研究以干燥的枸杞子为原料，经提取，醇沉，得到枸杞水溶性多糖粗品进行了分离纯化得到了 LBP1和LBP2。本文确定了枸杞多糖提取的工艺，乙醇沉淀的最佳添加量为每 50 mL 枸杞提取液添加 80 mL 体积分数 95% 乙醇，最佳醇沉时间为 12 h。采用 Sevag 法脱除蛋白，最佳脱除次数为 6 次。蛋白脱除率为 83. 45%。利用Sephadex G-50 葡聚糖凝胶柱层析和DEAE-cellulose 阴离子树脂柱层析进一步分离纯化，可得枸杞多糖LBP1 和 LBP2，凝胶柱层析色谱和紫外光谱扫描鉴定了多糖纯度。目 录
1 绪论
1.1 枸杞概述 1
1.1.1 枸杞植物及其产地的介绍 1
1.1.2 枸杞子的药用价值 1
1.1.3 枸杞加工生产现状 2
1.2 枸杞多糖 2
1.2.1 枸杞多糖的药用价值 2
1.2.2 枸杞多糖的制备 4
1.2.3 枸杞多糖的精制 6
1.3 糖蛋白叙述 6
1.4 糖蛋白分离纯化研究 7
1.5 本文研究工作 7
2 实验材料与方法
2.1 实验材料 8
2.2 试剂与仪器 8
2.3 实验方法 8
2.3.1 枸杞多糖的提取 8
2.3.2 乙醇沉淀工艺 8
2.3.3 Sevag法 9
2.3.4 多糖的分离纯化 9
2.3.5 多糖的纯度验证 9
3 实验结果与分析
3.1 醇沉工艺结果 10
3.2 脱除蛋白次数分析 10
3.3 色谱柱对枸杞多糖的分级结果 11
3.4 凝胶色谱柱对枸杞粗多糖的纯化的一项 11
3.5 纯度检验 12
4 结论 14
参考文献 15
致谢 19
1 绪论

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/> 3 实验结果与分析
3.1 醇沉工艺结果 10
3.2 脱除蛋白次数分析 10
3.3 色谱柱对枸杞多糖的分级结果 11
3.4 凝胶色谱柱对枸杞粗多糖的纯化的一项 11
3.5 纯度检验 12
4 结论 14
参考文献 15
致谢 19
1 绪论
1.1 枸杞概述
1.1.1 枸杞植物及其产地的介绍
枸杞(Lycium chinense mill)是多刺的可落叶的小灌木，它属于茄科枸杞族的枸杞属[1]。枸杞的适应性很好，喜干勿燥，对于雨水和潮湿的天气不适应。枸杞的分布比较广泛，枸杞的种类也各种各样，一般多分布在中亚，南北美洲、地中海沿岸，东欧，东亚各国也有[2]。枸杞在我国很广泛的分布，特别是是宁夏枸杞是最有名的枸杞品种。枸杞的医药食用价值很高，除了枸杞的果实以外，枸杞的芽，叶，根、花粉和枸杞籽都具有较高、很好的药用价值。枸杞的根又可以叫地节、地骨；味甘性寒；根皮中含有甜菜碱、β谷甾醇、枸杞酰胺、桂皮酸，蜂蜜酸、亚油酸和柳杉酚 [3]。经炮制后可治疗阴虚潮热、骨蒸盗汗、肺热咳嗽、咯血等症。枸杞叶又叫地仙苗、甜菜，性平味苦，可以补肝益肾，祛风除湿，可以治疗虚劳发热，烦渴，目赤昏痛，热毒疮肿的症[4]。枸杞花粉含有着丰富的维生素和蛋白质，可以曾强人体免疫力，邸多隆，滋补养颜 [5]等提到其发明的蜂花粉枸杞口服液有抗疲劳、改善肌肤水分，抗衰老、提高机体免疫功能，调节内分泌的作用。此外，它还含有大量的矿物质元素，如 K、Na、Ca、Mg、Fe、Cu、Mn、Zn、Se 等，近期研究发现，枸杞具有抗氧化的功效而且可以滋肝养肾，抗衰老。这些功效跟含有的枸杞多糖有很大的关系，因此对枸杞多糖的探索也是近年来营养学和医学界的研究热点之一。
1.1.2 枸杞子的药用价值
枸杞子又叫枸杞红实、枸蹄子，西枸杞，甜菜子 (Wolfberry fruit)等。它味甘、性平，有润肺、助阳、祛风，滋补肝肾，益精明目，坚筋骨，轻身不老的功效。在《中华本草》记载，枸杞子可制成多种剂型，用来治疗，腰膝酸痛，眩晕耳鸣，内热消渴等症。宁夏枸杞也在之后被载入《2010 年版中国药典》中。随着对枸杞研究的深入，现代医学还发现枸杞许多新的作用。枸杞子有退烧的作用，关于这个有很多人做过研究实验。将枸杞喂食发热的大鼠，可以使降低大鼠的体温，随之促甲状腺激素的含量相应下降了。此外，枸杞对于抗肿瘤的作用也比较明显，他能提人的高白介素2 ，肿瘤坏死因子α 基因和外周血单核细胞表达水平[6]。因此枸杞色素能治疗夜盲症，保护视力，还能促进视网膜内视紫质的合成 [7]。此外，类胡萝卜素还能促进免疫信号的传递和分泌，提高免疫力提高免疫力[8]。枸杞多糖可以调节和促进人体的免疫作用，它能够加强 Ts 细胞的作用，降低抗体排斥反应，并可以激活 T 淋巴细胞和 B 淋巴细胞[9]，在小鼠实验中可以对抗环磷酞胺对 NK 细胞和 CTL 细胞的抑制作用[10]，有增强细胞与体液免疫功能，对癌细胞的 DNA 合成有阻断作用[11]。。此外黄酮类化合物可以通过抑制肝脏中一系列酶，如 3羟3 甲基戊二酰辅酶 A（HMGCoA）[1415]酶，卵磷脂胆固醇酰基转移酶（LCAT）[1617]，的活性来降低血液中的胆固醇。黄欣[18]等通过递增游泳训练建立小鼠自由基生成模型，并对治疗组进行枸杞总黄酮灌胃，实验表明黄酮类可减少小鼠体内丙二醛(MDA)的含量。此外黄酮类化合物还具有预防和治疗强直性脊柱炎（AS）的作用[1920]。
1.1.3 枸杞加工生产现状
近几年以来，对枸杞的加工研究也不断加深。在 《76药材标准》中，将血枸杞和枸杞分西枸杞，后者可分为一、二、三个等级，有一到五个等级。市场上一般以每 50 g克的粒，把枸杞分为贡果、精果，特优级果、特级果、甲等果、乙级果六个等级。因等级不同所以市场价位也不同，若按大小论价，一般的 12~25 元/公斤，较优的 80~100 元/公斤，除了干果外，在市面上我们还可以看到枸杞浓缩汁，味道甜蜜，即是通过将枸杞原汁通过真空蒸发而得到的软饮品，工艺流程较简单。这个产品可速进市场对枸杞复合饮料的需求。
1.2 枸杞多糖
枸杞子糖含量大约为 39%[21]。其中糖类的成分包含：多糖、二糖、单糖以及纤维素、半纤维素、果胶。其中单糖为果糖 7.49%，葡萄糖 5.73%，木糖 0.43%；双糖为蔗糖 5.60%；多糖含量为 3.9%。
1.2.1 枸杞多糖的药用价值
LBP 是一种可溶于水的多糖，其相对分子质量处于 22~25KD 范围内，单糖组成包括阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、甘露糖、木糖、鼠李糖[22]。枸杞有药理活，所以跟保健品也有很大的关系。所以无论是国内还是国外都很关注枸杞多糖的药用价值。
1.2.1.1降血脂和抗动脉硬化
对与LBP有降血脂的功效，目前的研究很多，也有很多人做过实验，它对大鼠的血脂水平的作用，而且可以降血脂的疗效。Ma 等[23]采用高脂饲料喂养的方法建立了高血脂症雄性小鼠模型，用 LBP 灌胃 30 天后，测定出其血脂水平，结果显示 LBP 低中高剂量组的甘油三酯、总胆固醇及低密度脂蛋白较模型组有明显的下降，这说明 LBP可以降低高血脂的大鼠血脂的总胆固醇水平、甘油三酯，及低密度的脂蛋白水平。动脉粥样硬化（Atherosclerosis，AS）是由血管的内皮损伤产生的一种较慢且复杂的炎症性、增生性疾病。大量研究表明脂质过氧化产生大量自由基是 AS
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