摘 要 北柴胡的挥发油具有良好的解表退热的作用，同时具有退热开阳、疏肝解郁、升举阳气等功效。因为所研究北柴胡部位不同，故所提取出来的挥发油等有效成分含量也各不相同。研究北柴胡茎、叶、根三种不同部位挥发油的含量，其意义就是有利于北柴胡药材资源的新开发和新利用，便于中药资源进一步扩大和发展，便于新药物制剂的生产。故采用挥发油测定器来分别测定北柴胡根、茎和叶三个部位挥发油的含量。测定结果表明：叶部挥发油含量＞根部挥发油含量＞茎部挥发油含量。因北柴胡挥发油具有多种生物活性，其中包括抗菌作用。所以才应该进一步研究北柴胡不同部位所提取的挥发油的抑菌活性实验。又因为北柴胡不同部位挥发油所含成分不同，其所对应的体外抑菌活性也各不一样。所以初步研究北柴胡不同部位所提取出来的挥发油，对一些常见致病菌是否具有抑制作用，比较三个不同部位提取的挥发油抑菌活性的大小。所以采用大肠杆菌（Escherichia. coli）、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus. aureus)、沙门氏菌(SalmonellaS. enterica）三种菌对北柴胡不同部位体外抑菌活性分别进行了比较性试验，实验结果表明北柴胡茎、叶、根三部的挥发油成分对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌有明显的抑制作用。其中抑菌活性比较结果为：根部挥发油>叶部挥发油>茎部挥发油。目 录
1 绪论
1.1 概述 1
1.2 挥发油提取方法 1
1.3 北柴胡挥发油研究现状 3
1.4 北柴胡挥发油的研究意义 4
1.5 本章小结 4
2 北柴胡不同部位挥发油含量的研究
2.1 实验材料 5
2.2 实验仪器 5
2.3 实验过程 5
2.3.1 北柴胡不同部位挥发油的提取 5
2.3.2 北柴胡不同部位挥发油的含量测定 5
2.4 小结 6
3 北柴胡不同部位挥发油体外抑菌活性研究
3.1 实验材料 7
3.1.1 实验菌种 7
3.1.2 主要实验试剂及仪器 7
3.2 实验方法 7
3.2.1 北柴胡挥发
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北柴胡不同部位挥发油的提取 5
2.3.2 北柴胡不同部位挥发油的含量测定 5
2.4 小结 6
3 北柴胡不同部位挥发油体外抑菌活性研究
3.1 实验材料 7
3.1.1 实验菌种 7
3.1.2 主要实验试剂及仪器 7
3.2 实验方法 7
3.2.1 北柴胡挥发油提取 7
3.2.2 肉汤培养基配制 7
3.2.3 实验菌液制备 8
3.2.4 体外抑菌试验 8
3.3 实验结果测定 8
3.4 实验结果分析与讨论 8
3.4.1 北柴胡三个部位挥发油的体外抑菌作用 8
3.4.2 结果分析 9
3.5 本章小结 12
结论与讨论 13
参考文献 14
致谢 16
1 绪论
1.1 概述
北柴胡（Bupleurum chinense DC.)又名硬柴胡、津柴胡等，为伞型科多年生草本植物，为多分布于我国东北、华北、华东、中南、西南各地，它主产于陕西、甘肃、河北等地[1]。其临床上多以全草或根茎入药，药性偏凉，味苦，具有解表和里、退热开阳、疏肝解郁、升举阳气等功能，是中医治疗少阳证之首选药[24]。现在临床研究表明，柴胡具有提高中枢神经系统兴奋性、保肝、抗炎、降血脂、解热、抗急性辐射损伤、增强免疫调节功能和抗病毒感染等作用[512]。本课题所选择的材料产于陕西秦岭山脉以南的商洛市丹凤县地区，这里环境优美，土地肥沃，适宜北柴胡种植生长。据史料记载，商洛等陕南等地也是北柴胡发源地之一，所以才选此地的北柴胡作为研究对象。选择此种植地，生长日期为二年，春末夏初四月份，新鲜的北柴胡根部及全茎叶部作为实验对象。考虑生长周期和实验时间安排的原因，此时的北柴胡还没有花的形成，所以也无法采取北柴胡的花来作为实验品。论文主要通过挥发油测定器来测北柴胡根、茎、叶三种部位的挥发油的含量多少。
1.2 挥发油提取方法
所用主要仪器为挥发油提取器，分别北柴胡根，茎和叶中挥发油类成分进行提取。该方法是指将含有挥发油成分的植物或者药材与水共同蒸馏，使得挥发性的成分随着水蒸气一并蒸馏出，经冷凝提取挥发性成分的常用方法之一。此提取方法适合于具有挥发性的、能随水蒸气蒸馏而在水中稳定且难以溶解，同时不被破坏或不溶于水的药材或植物的提取。水蒸气蒸馏法根据“道尔顿分压定律”，植物挥发油与水不相混合、且不发生化学反应。在加热后，混合液体的蒸气压总和，与大气压相等的时候，溶液即开始沸腾。因此尽管各个组分的沸点高于混合液体的沸点，继续加热时，混合液体中的挥发油可随水蒸气蒸馏出来。用水蒸气蒸馏法提取5小时，分别得到黄绿色油状液体和黄色油状液体后，并分别进行密封保存待用[13]。
  上述方法所提取出的主要成分为北柴胡挥发油，北柴胡挥发油具有多种生物活性，其中包括抗菌作用。其抗菌作用是其中最重要的生物活性之一。在我们日常生活中，尤其是在中药种植，生产加工过程中，因为各种致病菌的存在，而带来很多危害和不便。本实验初步研究北柴胡不同部位所提取出来的挥发油，对一些常见致病菌是否具有抑制作用，比较其三个不同部位提取的挥发油抑菌活性的大小。因许多学术论文报告里，并未明确比较北柴胡不同部位挥发油的抑菌活性大小，所以才应该进一步进行北柴胡不同部位所提取的挥发油的抑菌活性比较实验。提出这一观念的原因是因为所研究北柴胡部位不同，故所提取出来的挥发油的有效成分也各不相同，所以其所对应的体外抑菌活性也各不一样。所以采用大肠杆菌（Escherichia.coli）、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus. aureus)、沙门氏菌(SalmonellaS .enterica）三种常见菌种对北柴胡不同部位所提取的挥发油成分，分别做体外抑菌活性比较性试验。
研究北柴胡不同部位所提取的挥发油的抑菌活性实验，第一步，先得制作好各种菌群所需要培养基，并不断的在培养基里培养大肠杆菌（Escherichia.coli）、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus. aureus)、沙门氏菌(SalmonellaS. enterica）三种实验菌种。第二步，将以上保存好的菌种分别接种到平板上，在37℃恒温培养箱里面培养24小时后，选择并挑选经典的菌群，放到做好的肉汤培养基里经行培养，肉汤温度控制在37℃，培养时间为18个小时。第三步，将装有已全部融化成为液体的固体培养基的三脚瓶，放到超洁净操作台里，将培养基倒入平板，每个平板倒大约15ml左右，水平放置，待凝固后，倒置放入30℃的温箱中，2天后观察是否有菌落生长。若有生长，则可以供下一步试验使用，否则需要重新做倒平板实验。直至实验有菌落生成以后，取出0.1ml菌液注入平板中，放置几分钟后，用涂布棒涂抹均匀，以无菌操作在培养基表面直接垂直放置上牛津杯，用双手轻轻加压，使其与培养基充分接触而无缝隙，在牛津杯中装满北柴胡挥发油，勿使其向外溢出。加满后放置在37℃下，培养1618小时，并每8小时观察一次，记录好观察结果。实验以无水乙醇溶液为空白组，并以阿莫西林药敏制剂片为对照组。最后通过游
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