摘 要 本实验研究利用PEG2000+(NH4)2SO4双水相萃取的方法来萃取南五味子多糖并优化其萃取条件。考察了不同的盐含量、PEG2000的含量、温度和加入粗多糖溶液的量等因素对南五味子多糖萃取的影响。PEG2000+(NH4)2SO4双水相萃取南五味子多糖的优化条件为保持温度在30℃时，加入2g粗多糖，利用PEG2000浓度为16%，(NH4)2SO4浓度为22%时组成双水相，体系达到最佳分离条件，南五味子多糖的萃取率最高可达为98.2%。
Key words: Double water phase system; extraction; Schisandra chinensis; polysaccharide;目录
1 绪论 1
1.1南五味子概述 1
1.2南五味子多糖 1
1.3南五味子多糖的功效 1
1.3.1保肝 1
1.3.2增强免疫作用 2
1.3.4抗变态反应 3
1.3.5药理保健作用 3
1.3.6其他药理作用 4
1.4双水相萃取 5
1.4.1双水相萃取（ATPE）技术 5
1.4.2双水相萃取技术在萃取多糖中应用 6
1.5选题意义与目的 7
2 南五味子多糖的萃取和测定 8
2.1材料与仪器 8
2.1.1试剂与药材 8
2.1.2仪器 8
2.2方法与结果 8
2.2.1材料制备 8
2.2.2南五味子多糖的测定 8
2.2.3南五味子多糖提取液中蛋白质含量测定 10
2.3双水相萃取体系 11
3 实验结果与分析 13
3.1盐含量的影响 13
3.2 PEG含量的影响 14
3.3温度的影响 15
3.4加入粗多糖量的影响 17
结论 19
参考文献 20
致 谢 22
绪论
1.1南五味子概述
南五味子为双子叶植物，干燥成熟果实，是一种珍贵的中药材， *51今日免费论文网|www.jxszl.com +Q: @351916072@ 
主要种植在黄河流域以南，《唐本草》中有讲到：“五味子皮肉甘酸，核中辛苦，都有咸味，”这是五味子的具体形态，所以才称作为五味子。五味子如今分为南五味子和北五味子，南五味子的色泽为红，北五味子的色泽偏黑，用来药补则用北五味子更佳。南五味子有收敛固涩、益气生津、补肾养心的功效，主要用来治疗肺虚喘咳、支气管哮喘、中毒性消化不良、急性菌痢、失眠健忘等[1]。最近几年来发现它还具有健脾消食的功能，还可以降低转氨酶[2]。此外，南五味子还有特别高的观赏价值，夏季花开香气扑鼻，适合做为公园和庭院种植的良好品种。
1.2南五味子多糖
多糖（Polysaccharide）是由9个以上糖单位缩合而成的一类高分子聚合物，有些多糖为直链结构如纤维素，有些多糖含分支结构如糖原，同多糖顾名思义是由相同的单糖组成，反之形成的多糖分子称为杂多糖。多糖具有免疫调节、抗肿瘤、抗病毒、降血糖和血脂等活性，因此提取南五味子多糖对于医药和保健方面都具有重要的作用。
研究表明，多糖最为明显的生物活性是提高机体免疫功能，它主要是通过激活补体系统、促进抗体产生，可以调节免疫活性。此外，多糖还具有抗辐射的作用，它的衍生物还具有良好的抗免疫缺陷病毒的作用。
单糖分子组合的不同结果、获取途径的转变，都可以使多糖的功能发生变化，从而呈现出其功能的复杂多样，如海带多糖、灵芝多糖具有一定的抗辐射活性，特别是针对肿瘤患者，在临床治疗上辅助使用会提高治愈率，改善患者的生活质量。还有一些中药多糖，具有很强的抗自由基侵害作用，比如南五味子多糖能够清除超氧自由基，在抗衰老活性中发挥着很大的作用。
1.3南五味子多糖的功效
1.3.1保肝
实验研究发现，实验中所选的有四氯化碳破坏小鼠肝部结构，使用五味子多糖后其致使肝损伤的谷丙转氨酶被明显抑制，肝功能有了显著地改善，肝糖原的含量在五味子多糖的作用下明显增多，糖原可提供的能量也有丰富的能量备货，韧性上有了增强，防止外来有害物质破坏肝脏的能力也显著提高 [3]，经过进一步的研究，四氯化碳中毒的小鼠，其肝组织内丙二醛被明显抑制，含量减少，通过五味子多糖灌汤给药可以改善丙二醛含量减少的情况，它可以抑制小鼠肝匀浆脂质过氧化反应，实验中除了肝组织的改善，其使用了五味子多糖的小鼠胆汁的分泌也高于正常小鼠，有个别切除了后肝的小鼠，后肝竟开始再生，实验表明五味子多糖具有保肝作用，其促使小鼠后肝再生的现象说明五味子多糖具有促进肝再生的作用 [4]。
曾靖[5]等人研究了腹腔注射五味子多糖对小鼠肝糖原合成的影响，他们在5天里连续给实验小鼠的腹腔里注射南五味子多糖200mg/kg，最终的实验现象是虽然小鼠肝糖原的合成没有任何变化，但是注入南五味子多糖后服用阿托品增加小鼠肝糖原合成的现象大幅度减小。实验结论说明肝指数可以通过使用五味子多糖来减小，且肝糖原的有效组成是五味子多糖，其在实验中表现出的抑制用阿托品来提高肝糖原的现象值得各位学者们去深入研究，对以后的医疗研究会有很大的贡献。
许珂玉[6]等研究了五味子多糖对四氯化碳诱导的肝损伤大鼠超微结构的保护作用，实验猜测五味子多糖可以降低血清的活性，实验中部分肝损伤的大鼠的血清中阻碍肝细胞修复的血清蛋白活性减小，而修复肝功能的酶活性显著增加，这些肝损伤的大鼠均是因四氯化碳作用促使其肝功能受损的，四氯化碳破坏了其原本的分子结构，使得肝细胞和脂肪变性，白细胞功能障碍引起炎症，线粒体发肿发胀，服用五味子多糖后这些现象均得到了改善。
1.3.2增强免疫作用
环磷酰胺引导的胸腺细胞死亡在五味子多糖的作用下有明显的减少，胸腺细胞的伤亡也呈现下降趋势，它的抑制效果是在促进Bcl2表现、阻碍Bax蛋白反应来完成的。其也显著提高了正常小鼠免疫器官的抗压能力，其网状内皮系统吸收的印度墨汁更多了，腹腔巨噬细胞吞噬细胞所占的比例和吞噬的效果大大增加，加快溶血素及溶血空斑形成，促使淋巴细胞分化转变，在大多数情况下可以促使细胞趋于安静。
1.3.3抗衰老及抗疲劳作用
脂质过氧化物诱导组织或者细胞的分子结构发生氧化反应，使其正常的生理功能破坏，五味子多糖可以抑制其对组织和细胞的破坏，减轻生物的伤害，同时又能提高细胞韧性，对脂质过氧化物的入侵产生抵抗作用，增加生物的防御能力，使其具有强大的免疫系统，来根据环境变化而迅速做出相关反应，以达到抗衰老的作用[7]。对于以及老龄化的小鼠，其各项身体器官都开始衰减，五味子多糖能让退化的器官恢复其之前甚至可以更好的能力，五味子多糖促使为数不多活性胸腺皮质细胞数及脾淋巴细胞数开始逐渐恢复生殖和分化的能力，让原来瘦小的脾小结变大变厚，推进神经细胞再生长。实验中小鼠可负担的重量和在水里游泳的时间长短都有了显著的增强，表明五味子多糖能增加小鼠韧性，使其影响运动时间的乳酸含量减少，提供能量的肝糖原含量变多，对其抗疲劳能力提高明显。
1.3.4抗变态反应
在实验中，患有耳异种皮肤过敏反应和腹腔肥大细胞脱颗粒的小鼠，服用五味子多糖后，患病的现象有了明显的阻碍作用，实验还分为了未脱蛋白组和脱蛋白组，结果二者都有显著的抑制效果，说明五味子多糖能使肥大细胞不再脱落，使其肥大细胞变得稳固安定，表示在抗变态反应活性里五味子多糖还是有明显的作用，虽然都有明显作用，但是未脱蛋白组在药理活性方面的效果要更加好一些，应该是除自身反应外，脱去的蛋白也在起着协助的功效。

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