目录
1前言
1.1南五味子概述 1
1.2南五味子多糖 1
1.3南五味子多糖的功效 1
1.3.1保肝 1
1.3.2耐缺氧与抗疲劳 2
1.3.3增强机体免疫力 2
1.3.4抗氧化和抗衰老 2
1.3.5抗肿瘤 3
1.4多糖辅助提取方法比较 3
1.5双水相萃取 4
1.5.1双水相萃取的基本要点 4
1.6课题研究的目的和意义 6
2实验部分
2.1实验材料与仪器 7
2.1.1主要材料与试剂 7
2.1.2仪器与设备 7
2.2具体实验操作步骤 8
2.2.1南五味子粗多糖提取液的制备 8
2.2.2双水相体系的制备 8
2.2.3多糖和蛋白质含量的测定 8
2.3单因素实验设计 11
2.3.1NaH2PO4浓度的影响 12
2.3.2PH值的影响 13
2.3.3温度的影响 14
2.3.4电解质浓度的影响 15
结论 18
参考文献 19
致谢 22
1前言
1.1南五味子概述
南五味子，它是一种木兰科植物五味子属中的干燥成熟果实，而且自身是一种特别名贵、用途广泛、用量较大的常用型中药材，集中在黄河流域以南，主要产于中国的四川、河南、陕西等各个省份。它具有益气生津、宁心安神、敛肺止咳、补肾涩精 *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: ^351916072#
、收敛固涩、抗氧化、保护肝脏等各种功效。南五味子含有多种有效成分[1]，例如我们常见的多糖、木脂素、氨基酸、挥发油、无机元素和萜类化合物等，这些有效成分给我们带来了更多的好处，比如对一般的呼吸、心血管、消化等各种系统都有着明显的药理作用，随着社会的不断发展，经研究还发现，南五味子还存在着其他的各种药理作用，比如：可以对肝细胞起到保护作用[2]、避免肿瘤细胞的扩散和生长[3]、抑制氧化作用的发生[4]和对人们起到显著的镇静催眠作用[5]，综上所述可知：五味子它有着较为广泛的各种药理作用，对人们的生活和身心健康带来了更多的好处，比如：可以治疗人们的肝炎和神经衰弱等各种疾病，不仅如此，五味子在保健食品中也有相当大的作用，也是一种很好的两用药食植物，且它具有相当高的开发和利用的经济价值。
1.2南五味子多糖
南五味子多糖是五味子和南五味子的一种主要化学成分且是一种较为理想的免疫促进剂，它具有抗病毒、抗肿瘤、调节免疫、降血糖等药理作用，并且在耐缺氧与抗疲劳、提升白细胞、增强机体的免疫力、保肝、抗肿瘤、镇静催眠等药物的研究中占有相当高的地位。
1.3南五味子多糖的功效
1.3.1保肝
五味子多糖和其他中药配伍可用于急、慢性肝损伤的治疗，且具有保肝的药理作用，其机制和促进肝的再生作用、抗脂质过氧化作用、利胆等作用有关[6,7]。
陈宝芝[8]等研究显示表明，SCP对CCl4诱导小鼠的急性肝损伤具有很好的疗效，且对肝损伤具有显著的保护作用。这是因为SCP高剂量组的丙二醛（MDA）、小鼠血清ALT和AST的活性水平都有明显的降低，一氧化氮合酶（NOS）的活性和总胆红素（TBIL）水平也明显的下降，肝组织还原型谷光甘肽（GSH）水平明显的提升，SCP高剂量组的HE染色肝细胞的形态也有较好的回转，肝细胞嗜酸性变性也比原有的情况更好一些。
1.3.2耐缺氧与抗疲劳
为了考察小鼠的耐缺氧能力，高普军课题组把五味子多糖分成各个不一致的剂量，然后用各不相同的剂量分别给小鼠灌胃，把小鼠放进密封的广口瓶中并加入石灰，然后来观察并记录小鼠的活动情况和存活的时间。通过此实验可以得出结论，五味子多糖的存在和加入，能明显的使小鼠的耐缺氧能力和存活的机会大大的提升，此外，课题组通过给小鼠一个负重，然后来观察它的游泳能力，会明显的发现，给灌胃了五味子多糖的小鼠它的体力增大，加入五味子多糖的剂量越多，它的体力就会保持越长久[9]，而且还能很好的延长小鼠的负重游泳时间。谭晓虹等[10]研究显示表明，南五味子多糖它具有超强的抗氧化作用和剂量依赖性，且具有很好的清除超氧阴离子自由基、二苯代苦味肼基自由基、羟自由基的作用。
1.3.3增强机体免疫力
五味子多糖自身就是一种免疫力增强剂，它可以增加正常的小鼠、对机体免疫抑制的小鼠的脾脏以及胸腺的重量，不仅能显著提高白细胞的数量[11,12]，而且还具有能使胸腺退化减慢、单核巨噬细胞的吞噬功能明显提高的作用。有实验结果显示表明五味子多糖可以促进机体溶血空斑和溶血素的形成，且对小鼠内皮系统的吞噬功能有很好的促进、增强的作用[13]，而且明显的发现，这也可以大大的促进淋巴细胞的生长和转化[14]，刘淼等[15]将通过一种免疫细胞（腹腔肥大细胞脱颗粒），用这个实验来观察和总结没有去除蛋白的五味子多糖和已经去除了蛋白的五味子多糖的具体疗效和相关的药理作用，通过实验可以发现，五味子多糖能很好的阻止肥大细胞的脱颗粒并能使肥大细胞很好的保持原有的形态，并且提取出的五味子粗多糖的提取物它对I型变态反应有着特别大的抑制作用，从反应的活性来看，未脱蛋白部位的反应活性比脱蛋白部位的反应活性强。
1.3.4抗氧化和抗衰老
机体的过度氧化则会加速衰老、疾病、死亡等，五味子多糖具有明显地消除氧自由基的能力[16]，可改善这一症状。苗三明[17]等研究了五味子多糖对衰老模型小鼠造成的影响，研究结果表明，五味子多糖不仅能使神经细胞发育，而且对衰老小鼠的免疫功能有所提高，这是因为五味子多糖可增加衰老小鼠的脾淋巴细胞和胸腺皮质细胞的数量，使得退变的神经细胞胞体、脾小结明显的增大，胸腺也明显的增大增厚。
1.3.5抗肿瘤
通过实验证明[18]五味子多糖对肿瘤的生长起抑制作用，所以对癌症的预防和治疗有相当高的潜在价值。黄玲[19]等通过研究五味子多糖的抑瘤作用且更加证实了这一作用。它是在光镜下观察包埋有荷瘤的小鼠肿瘤细胞，结果显示表明，进行五味子多糖灌胃的这一组小鼠中，和对照组相比，它的瘤细胞明显的比对照组少许多，而且这也促进了瘤细胞的凋亡，使得瘤细胞的核分裂也大大的降低，对瘤细胞不同形状的性状也明显的得到了好的改善，瘤细胞中的炎细胞也相对的增多，对抑制瘤细胞有轻度的形态学表现。
1.4多糖辅助提取方法比较
目前五味子多糖对成分的结构组成还不是很深入，现在主要研究对五味子多糖的提取分离等方面。徐佐旗等[20]为了提取出五味子中的木脂素，它们采用了CO2超临界萃取的方法进行提取，完成此项工作后，然后它从剩下的萃取物中把南五味子多糖的成分提取出来，随即得到的最佳工艺条件为：料液比1：20、用时6h、反应温度为100℃、从中进行提取1次即可。马涛等[21]通过以五味子多糖的得出效率作为实验考察的因素，在提取过程中分别给予不同的PH，然后以萃取的温度、时间和微波的功率为实验考察的单因素，通过响应曲面法和优化设计，可以得出为了提取出五味子中的五味子多糖，通常采用了微波辅助的方法，从而得出最佳的工艺条件为：两次提取过程中的PH分别为4.5和9.0，微波的功率为600W，萃取过程中最适的温度为60℃，然后整个实验萃取7min钟即可，由实验可知：利用微波辅助法使得五味子的萃取率大大的提高，萃取率达到91.2%，用此方法得出的萃取率明显的比传统的水提醇沉法高[22]。高晓旭等[23]他们采用了水提醇沉的方法，从五味子中进行提取北五味子多糖，当提取结束后，然后经过正交的方法进行筛选，最后确定最佳的工艺条件为：实验中将所给的料液比为1：30，然后控制温度在100℃进行3h，提取1次即可，通过实验可得：北五味子多糖的提取率为90.62％。如果对此实验进行超声波预处理一段时间，则可使多糖的提取率大大提高，可达到92.28%。
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