摘 要目的研究半枝莲提取物对小鼠肝癌血管生成的影响，并初步探索其可能机制。方法用乙醇将多糖从半枝莲中提取出来，建立裸鼠移植性肝癌模型，随机分为对照组，半枝莲多糖低剂量组（25mg·kg-1），半枝莲多糖中剂量组（50mg·kg-1），半枝莲多糖高剂量组（100mg·kg-1），给药20天处死小鼠，摘取小鼠体内肿瘤，测其重量和体积。ELISA法检测小鼠血清中VEGF的含量，Western Blot法检测肝癌组织中VEGF蛋白的含量。结果与对照组相比，半枝莲多糖25mg·kg-1显著性抑制肿瘤体积，半枝莲多糖50mg·kg-1与100mg·kg-1能极显著抑制肿瘤的体积与重量；与对照组相比，半枝莲多糖50mg·kg-1与100mg·kg-1能极显著抑制血清中VEGF的含量；与对照组相比，半枝莲多糖能极显著下调肝脏组织中VEGF蛋白水平的表达。结论半枝莲多糖对肿瘤有明显的抑制作用，此作用可能是通过与肝癌血管生成密切相关的VEGF所介导的。
目 录
1概述 1
1.1 半枝莲主要化学成分的研究 1
1.1.1 黄酮类化合物 1
1.1.2 二萜及二萜内酯类化合物 1
1.1.3 多糖类成分 1
1.1.4 微量元素 2
1.1.5 其他成分 2
1.2 半枝莲药理作用 2
1.2.1 抗肿瘤作用 2
1.2.2 诱导细胞凋亡 2
1.2.3 增强机体免疫力 3
1.2.4 抑制肿瘤血管生成 3
1.2.5 抗氧化作用 4
1.2.6 抑制肿瘤细胞增殖 4
1.3 半枝莲抑制肝癌血管生成的研究概况 5
1.3.1半枝莲对肝癌的影响 5
1.3.2 VEGF对肝癌血管生成的影响 6
1.3.3 半枝莲通过VEGF对肝癌血管生成的影响 6
2 实验 7
2.1 实验材料 7
2.1.1 实验动物及瘤株 7
2.1.2 实验药物 7
2.1.3 主要试剂与仪器 7
2.2 实验方法 7
2.2.1 半枝莲多糖提取 7 *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: ￥351916072￥ 

2.2.2 小鼠移植瘤模型建立及给药 8
2.2.3 ELISA检测血清中VEGF含量 8
2.2.4 Western Blot法测肝癌组织中VEGF蛋白的表达 8
2.2.5 数据处理 8
3 实验结果 9
3.1半枝莲多糖对小鼠肝癌的抑瘤作用 9
3.2半枝莲多糖对小鼠血清中VEGF含量的影响 9
3.3半枝莲多糖对小鼠肝癌组织中VEGF蛋白水平表达的影响 10
4.讨论 11
结 论 12
参考文献 13
致 谢 15
1概述
半枝连属于唇形科黄琴属，又被称为并头草、韩信草等。主要分布在我国华南、华北等地，根据中国古代中药书籍记载，我国半枝莲资源广泛，主要产自于江苏、江南、福建、广西等地，半枝莲的各个部位都具有重要的药用价值，正在进一步的研究开发之中。现代临床研究表明，半枝莲的药理作用有诱导细胞凋亡、增强机体免疫力、抗氧化作用、抑制肿瘤血管生成、抗肿瘤[1]等疾病有效。
1.1 半枝莲主要化学成分的研究
根据现代医学研究表明，半枝莲是由多种化学成分组成的，其中主要化学成分是黄酮类化合物、多糖类成分，其次是二萜及二萜内酯类化合物、微量元素以及其他成分等，而且多糖类化学成分具有较多的药理作用。
1.1.1 黄酮类化合物
半枝莲中所含化学成分复杂，而黄酮类化合物为半枝莲化学成分中的一种，由于各地区气候差异较大，各地半枝莲的化学成分有所不同。根据各地调查表明，全国不同产地半枝莲的平均黄酮含量为2.32%[2]。为了进一步深入研究黄酮类化合物在半枝莲中的分布情况，邹箴蕾[3]等把半枝莲不同药用部位的黄酮含量采用紫外分光光度法进行了全面的检测。实验结果发现，半枝莲中黄酮含量分布，叶大于根，根大于花，花大于老茎。所以药厂一致在半枝莲枝繁叶茂的时候对半枝莲进行采收，且要求在储藏和加工过程严格防止叶的损失。
1.1.2 二萜及二萜内酯类化合物
二萜内酯类化合物是半枝莲的另一种化学成分，从半枝莲中分离得到的半枝莲二萜A、B、C、D、E、F、G、H[4]和I1，以及半枝莲内酯A、B、C、D1和C2。2010年，朱锋等在半枝莲植物地上部分的乙醇提取物中分离得到一个新的克罗烷二萜[5]，争取早日取得重大突破。
1.1.3 多糖类成分
多糖类成分[6]是半枝莲的主要化学成分之一，其中主要包括木糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖，摩尔质量比为0.62:0.46:1.5:2.68。另根据文献报道，有专家从多糖类成分中提取得到了均一性多糖，其中的单糖为D阿拉伯糖、C木糖、F甘露糖、C葡萄糖和E半乳糖，它们的摩尔质量比为0.21:0.76:1.95:2.43:2.13。
1.1.4 微量元素
对半枝莲采用紫外分光光度法检测，检测到了许多人体必需的微量元素含量。微量元素中最主要的就是Mg，再就是Fe和Cu，Zn和Mn的含量最少。但是Mn是世界公认的抗癌元素，且Mn、Cu、Fe等元素在降低与调节抗氧化方面具有积极意义[7]。
1.1.5 其他成分
2007年，Ducki等对半枝莲进行了提取分离，最后得到了半枝莲碱A，即反式1(4羟基笨基)丁1烯3酮；有机酸类中含有对香豆酸 (pCournaricacid)和半枝莲酸(scutellaricacid)等；甾醇类含有的是植物甾醇 (phytosterol)、植物甾醇β D葡萄糖苷等。
1.2 半枝莲药理作用
1.2.1 抗肿瘤作用
王刚[8]等在实验时采用的是对裸鼠肝脏进行接种肿瘤细胞，用来检测半枝莲多糖药物是否具有抗肿瘤活性。经过大量的实验操作，最后得出结论，移植性肿瘤对半枝莲多糖具有显著的剂量依赖，其抑制作用随着半枝莲多糖剂量的增加呈现加强趋势。谢珞琨等通过临床研究发现骨髓系淋巴瘤K562细胞增殖会受到半枝莲甲醇提取物的抑制，而且其抑制作用具有一定的浓度依赖性。徐敏[9]等实验意外发现肿瘤细胞小管形成和肿瘤细胞迁移的速度容易被半枝莲多糖药物所影响，而且对肿瘤细胞血管生成和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)的表达也有影响。根据文献报道显示QGY7703细胞增殖会被半枝莲多糖药物所抑制，还发现半枝莲多糖可能会诱导肝癌细胞凋亡、增强机体免疫力。
代志军[10]等研究发现小鼠细胞发生癌变后会受到半枝莲多糖药物的影响, 而且半枝莲多糖能够使肝脏的功能更加健全。经过实验证明，复方半枝莲乙醇提取液对人体肝癌细胞具有明显的剂量依赖作用，在实验过程中发现肝癌细胞最先是出现生长缓慢，然后生长停止，最后慢慢凋亡，复方半枝莲多糖能够缓慢地抑制移植性小鼠癌变细胞异常增殖，与相对应的对照组进行对比，差异较为突出。可以认为复方半枝莲多糖可能对肿瘤细胞和发生癌变的细胞异常增殖有抑制性作用。叶健[11]等以二乙基亚硝胺移植进入裸鼠癌变肝脏进行模型建立，然后以SBC为干扰因素，研究实验结果显示，其对肝癌前病变的形成和肝癌细胞都会产生较强的阻碍作用。因此，人们一致认为SBC值得进行深入研究，可能会成为治疗肿瘤的新方法。

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