响应面法优化狮子七总黄酮的提取工艺研究
目 录
1 绪论 1
1.1 狮子七的研究背景与意义 1
1.2 狮子七的研究进展 1
1.2.1 狮子七的文献检索情况 1
1.2.2 狮子七的形态特征 1
1.2.3 狮子七的药理作用 2
1.3 总黄酮的提取方法 2
1.3.1 溶剂提取法 2
1.3.2 超临界流体萃取法 3
1.3.3 双水相提取法 3
1.3.4 超声提取法 3
1.3.5 微波提取法 4
2 实验部分 5
2.1 仪器、材料与试剂 5
2.1.1 材料与试剂 5
2.1.2 仪器设备 5
2.2 标准溶剂的配制 6
2.2.1 试剂的配制 6
2.2.2 标准曲线的绘制 6
2.3方法学考察 7
2.3.1精密度试验 7
2.3.2稳定性试验 7
2.3.3加样回收率试验 7
2.3.4 重复性试验 7
2.3.5提取工艺 7
2.4 单因素实验对狮子七总黄酮提取条件的优化 7
2.4.1 超声时间对狮子七总黄酮得率的影响 7
2.4.2 超声功率对狮子七总黄酮得率的影响 8
2.4.3 液料比对狮子七总黄酮得率的影响 8
2.5 狮子七黄酮总得率的计算 8
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实验结果与分析 9
3.1 芦丁标准曲线的绘制 9
3.2 方法学考察结果 9
3.2.1 精密度试验 9
3.2.2 稳定性试验 9
3.2.3 回收率试验 10
3.2.4 重复性试验 10
3.3 超声波提取过程的单因素实验 11
3.3.1 超声时间对狮子七总黄酮得率的影响 11
3.3.2 超声功率对狮子七总黄酮得率的影响 11
3.3.3液料比对狮子七总黄酮得率的影响 12
3.4 响应面试验及结果分析 12
3.4.1 响应面法 12
3.4.2 模型方差分析 14
3.4.3 各因素对提取率影响的响应面图及分析 15
3.5 总结 16
结 论 17
参考文献 18
致 谢 20
1 绪论
1.1 狮子七的研究背景与意义
狮子七[1],是太白山上常见的一味中药的中药名。分布在河北狮子七在当地称为狮子头、分布在山西的狮子七在当地称为狮子草、分布在陕西的狮子七在当地被称为九头狮子七、分布在甘肃的狮子七在当地被称为涩疙疸、分布在青海的狮子七在当地被称为红景天、分布在新疆的狮子七在当地被称为土三七、分布在四川的狮子七在当地被称为狮子七、还有些狮子七分布在云南、西藏一带。狮子七对我们的心脏能够产生很好的作用,跌伤了之后可以使用狮子七,它可以止住血流,清除我们体内的湿热和解除毒性的效果。也可以用于人体的元气不够用,元气很短并且总感觉到无力,心脏跳动的很快和晚上经常性睡不着,头部总感觉到晕乎乎和眼睛看不清楚,胸部总是感觉有些闷热和感到疼痛,用于身体部位擦伤,女性的经期不正常,有时候呕吐出血,拉肚子。狮子七黄酮类化合物在狮子七中的药效还是比较高的。狮子七具有诸多药理作用,如对心脑血管系统等具有显著疗效,现代医学对于狮子七的研究,具有深远的意义。
1.2 狮子七的研究进展
1.2.1 狮子七的文献检索情况
1.2.2 狮子七的形态特征
狮子七为多年生长的中药植物,它的根非常粗,一般是直立生长。它的根部茎的直径为1.5厘米,前端是一个三角形的片;茎的数量少,高度为1560厘米,很少一部分它们的高度可以达到90厘米,直径为46毫米;叶子生长茂密,植物叶子相互生长,类似于线的形状或者像披着的针形,长度为46厘米,尖锐尖,它的边上有像牙齿一样的东西稍有锯齿,或有时充满无梗。花的序是伞的形状,多花,710厘米宽;雌株和雄株不一样,呈三角的形状,先端是又锐又尖的;雄性花和雄性的花为10或8,与花同长或者稍微超出花的长度,花的丝及花药为黄色;心皮5或4,直立;果实为针形,长度为78毫米,有短而向外弯曲的东西;种子的形状为长的或者圆的,长度为1.5毫米。6月至七月开花,七月至八月结果实。
1.2.3 狮子七的药理作用
狮子七中黄酮[2]对心血管系统具有显著作用,可以高效的减小进入不是平原的地方后对心以及肺的中心的钠盐含量的减少;狮子七可以阻碍抗血凝滞作用的形成;狮子七对人体新陈代谢起的作用,狮子七对提高缺少氧气的动物的有氧气运动有很好的效果;狮子七可以增强人类对缺少氧气环境的最大承受能力,可以有用的降低氧气减少的速度,并且可以加大血管静态的脉搏、血管中动态的脉博之间的氧气之间的压力的差值,氧气的供给加大了对缺少氧气的可承受能力。
1.3 总黄酮的提取方法
1.3.1 溶剂提取法
这种提取方法是基于被提的成分的能够溶出的能力,选择一个比较合适的溶解剂型和恰当的方法来把所需要的物质提出来[3]。这种方法的原理是溶解剂型通过分散然后慢慢渗入到植物中,然后把能够与之互溶的物质释放出来,引起了细胞里面和细胞外面的一种差别,并且能够形成状态是可以变的一种稳定状态,这样才可以达到把所需要的物质提出来的效果。一般提取的物质选择的要点是根据相似的物质能够互相溶解的原理,也就是强的物质把强的物质提出来,弱的物质把弱的物质提出来。多糖是一类比较强的化合物,所以在实际操作中我们应该选择比较强的物质将其提出来。在所有溶剂中,水是很经典的一种比较强的物质,对中药的深入能力强,提的物质丰富,并且在日常的实验中我们大可放心使用。它能用于各种植物类的多糖,被广泛应用。
1.3.2 超临界流体萃取法
这种提取技术[4]是利用高于边界温度和压力的一种物质,具有气体和液体的两个相面的性质,它有着很好的溶出其他物质的能力,所以经常进行提物质和分开物质。可以用做超过临界值的流体有很多种,通常都是具有较小分子量的化合物,如二氧化碳、乙烷等。目前采用二氧化碳主要用作溶剂,因为密、对其他物质的可以溶出的能力比较强、对边界的压力中等、边界温度接近常温、不影响所要提取的物质的各方面的活性、没有毒,没有特殊气味、化学和物理的定性好、在其生产的过程中容易被回收、并且没有环境方面的破坏、价钱便宜等一系列优点。然而,作为提取其他东西的单方面的二氧化碳只对容易提取的物质、容易被油脂溶解的物质适应能力强,对这些东西有很强的溶出的能力,并且不适用于大多数,因此,在其中加入其它溶剂时,通过影响溶剂的密度和分子间的力来影响溶质在流体中的溶出能力和选择能力。这种技术有许多之前用的溶出的方法的无与伦比的优点:①该过程易于控制并且到达稳定的时间非常短。②萃取出物质的时间快速、没有其它溶剂留在其中③对于热非常敏感的物质不容易破坏它。但是缺点是:①它所需要的仪器设备较大,对于仪器和仪器操作人员的要求高,需要投入的成本也很大②很难去应用与大范围的生产当中。
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